ПЦР тест на коронавирус: как проводится и когда делается?

ПЦР или полимеразная цепная реакция (Рolymerase Сhain Reaction) – это высокоинформативный метод диагностики, предназначенный для выявления генетических отклонений и дифференциации инфекционных заболеваний.

Клинико-лабораторная оценка биоматериала (крови, мочи и т.п.) основана на определении генно-молекулярной структуры возбудителя инфекции, что нивелирует риск ложноположительного результата анализа. За научно-медицинскую ценность метода его разработчик Кэри Мюллис был удостоен Нобелевской премии в 1993 г.

Полимеразная цепная реакция (PCR)

Полимеразная цепная реакция это технология позволяющая выделить из двойной спирали ДНК участок с конкретным геном, размножить его и изучить. Открытие ПЦР в биологии и генетике, по своей значимости можно сравнить с изобретением микропроцессора в мире компьютерных технологий. Новые возможности, которые дала методика, взбудоражили научный мир.
Методика вдохнула новую жизнь в молекулярно-генетические исследования, и сделал возможными многие тестирования, которые по разными причинам были не выгодны, или не доступны широким массам.

ПЦР на герпес зостер

Вирус варицелла зостер является возбудителем ветрянки и опоясывающего лишая.

Его ДНК появляется в крови только в острую фазу инфекции.

Ветрянка обычно диагностируется клиническим методом.

Потому что она имеет достаточно характерные симптомы.

В то время как при опоясывающем герпесе происхождение болезни не всегда очевидно.

Высыпания появляются не сразу.

А если появляются, то клиника может быть атипичной.

Для подтверждения диагноза может быть использована диагностика крови методом ПЦР.

Такая диагностика применяется нечасто.

Но иногда в ней возникает необходимость в спорных клинических ситуациях.

Плюсы и минусы

Как и большинства сложных и высоких технологий, у полимеразного метода присутствуют, как достоинства, так и недостатки. В двух слова;

Из полюсов:

1. Превосходная точность результатов исследования. Если вся технология соблюдена в точности, то вероятность ошибки в результатах стремится к сотым долям процента.
2. Обширный выбор материалов для анализа. Полимеразная цепная реакция позволяет извлечь из образца любой генетический материал, который может в нём содержаться. Благодаря этому можно с равным успехом исследовать образцы слюны, крови, волос (с луковицами), ногтей, окурков от сигарет т.д.
3. Сверхраннее диагностирование. Других универсальных методик способных обнаружить любую известную инфекцию на ранней стадии, до возникновения симптомов инфекционного заболевания, нет. Эта же методика, позволяет обнаружить дремлющие наследственные болезни, которые проявляют себе в разных поколениях по разному.
4. Один метод ПЦР породил множество тестов, отвечающих разным тематикам исследований во многих отраслях человеческой деятельности.

Из Минусов:

1. Высокая стоимость. Конечно тестов много, и стоят они по-разному, но самые информативны исследования всё ещё стоят не дешево. Но стоит учитывать, что всего за пару десятилетий технология сделала скачек стоимости в 100.000$ за полное исследование ДНК одного человека в лаборатории США, до ценника в районе 20-30 тысяч рублей в вашем или соседнем городе.
2. Нехватка специалистов высокого уровня профессиональной подготовленности. Отчасти это сказывается и на конечной стоимости тестирования – генетика отрасль относительно молодая и развивающаяся. Общество не успевает изменяться под новые потребности в специалистах, как и само медленно привыкает к новым услугам и инновациям.
3. Результаты теста будут искаженны, если образец для исследования был случайно или намеренно загрязнён. Тот момент, когда в очередной раз кажется, что безупречность почти достигнута. Но точность анализа настолько высока, что это является её плюсом и минусом одновременно.

Диагностика

Обследование на ИППП включает в себя следующие диагностические методы:

• Микроскопическое исследование мазка из уретры и влагалища. Может быть простым и люминесцентным. Полученный образец обрабатывают специальными красителями или флюорохромами. Затем биоматериал изучают под микроскопом.
• Культуральное исследование. Образец помещают в специальную питательную среду, где вирусы и бактерии активно размножаются.
• Иммуноферментный анализ крови. Выявляет специфические антигены к определенному возбудителю. Основан на том, что антитела связываются исключительно со своими антигенами и ни с какими другими. Таким образом удается определить вид возбудителя.
• Анализ крови на torch-инфекции. Проводят в обязательном порядке всем беременным. Аббревиатура torch составлена из первых букв английских названий следующих инфекций: токсоплазмоз, сифилис, гепатит, краснуха, цитомегаловирус, герпес. Эти болезни оказывают негативное влияние на плод, вызывая неправильное внутриутробное развитие. У женщины берут кровь и исследуют ее на антитела к торч-инфекциям. Количество антител показывает, болеет ли женщина в данный момент или когда-то перенесла эти заболевания. В последнем случае опасности для ребенка нет. Если будущая мама заразилась во время беременности, то ей предлагают прервать беременность.

ПЦР на ИППП

Копирование ДНК происходит только при условии его присутствия в данном образце. ПЦР на ИППП применяют к инфекциям, которые протекают скрыто. К плюсам данного метода относятся: быстрота, точность, информативность.

Методом ПЦР исследуются такие заболевания, как:

• Хламидиоз.
• Цитомегаловирус.
• ВИЧ.
• Гепатит.
• Уреаплазма.
• Гарднереллез.

Как проводится расшифровка результатов ПЦР на ИППП?

Вариантов здесь может быть только 2: положительный и отрицательный. Если результат положительный, а симптомы отсутствуют, то доверяют ПЦР, это значит, что болезнь протекает латентно или находится на доклиническом этапе. Также для диагностики ИППП используют специфические тесты, например, реакцию Вассермана для диагностики сифилиса. При гепатите проводят печеночные пробы.

Если есть подозрения на осложнение ЗППП, то назначают дополнительно инструментальные методы диагностики:

• УЗИ органов малого таза у женщин, предстательной железы у мужчин.
• Анализ крови на онкомаркеры (в случае заражения вирусом папилломы человека).
• УЗИ печени при обнаружении гепатита.

Подготовка к сдаче анализов

Для того, чтобы получить наиболее достоверные результаты, перед сдачей мазка нужно подготовиться. За неделю прекратить принимать антибиотики, вагинальные свечи, спреи. Исключаются половые контакты за 3 дня до исследования. У женщин мазок берут после окончания менструации. Нельзя мочиться за 3 часа до анализа.

Для проведения анализа методом ПЦР или ИФА специфической подготовки не требуется.

Кому нужна диагностика

Поскольку ПЦР позволяет выявить даже мигрирующие из поколения в поколение наследственные заболевания в их скрытой фазе, провести такое исследование наверно будет полезно каждому. Конечно, не всем такие знания кажутся насущными и необходимыми здесь и сейчас, Но, думается, что по мере развития цивилизации будут расти и успехи медицины и генетики. А новые открытия позволят далеко продвинуться в достижении долголетия и здоровья. К тому момент, тест на наследственность вполне может стать обыденным и обязательным для всех анализом.

Пока же этого не случилось, чаще всего тест необходим в таких случаях:

1. При возникновении подозрений о получение заболевания половым путем, или через укол, попадание зараженной крови на слизистые или открытые раны (достаточно небольшого пореза), нападение диких и одичавших животных, случайная травма об окружающие предметы, например, наступить в поле на старый гвоздь.
2. Для уточнения диагноза, сделанного иными средствами, особенно в случаях, когда лечение даёт не специфическую реакцию организма.
3. Для установления родственных связей для заявления прав на наследство, или в алиментной тяжбе.
4. Для идентификации личности человека.

Остальные тестирование больше относятся к сферам индивидуальных интересов. Кому интересно узнать, что показывает расшифровка всех народностей в его роду. Кто-то пытается планировать будущего ребенка и тестируется на совместимость. Кто-то решил заменить ДНК-тестом диетолога, и получить индивидуальные инструкции, советы по правильному питанию.

Когда делают тест по методу ПЦР?

Сделать ПЦР тест на коронавирус можно любому человеку даже без видимых у него симптомов заболевания. Если вирус проник в организм, тестирование это покажет. Но сегодня его делают далеко не всем желающим. Направляют на тест только врачи и в приоритете следующие группы населения:

• граждане с признаками простуды или гриппа, прибывшие в ближайшие 2 недели из стран, неблагополучных по коронавирусной ситуации, а также контактировавшие с ними лица;
• лица старше 60 лет, обратившиеся к врачу с признаками ОРВИ;
• все, кому поставлен диагноз «пневмония» в ближайшие дни;
• лица с хроническими заболеваниями: сердечно-сосудистыми, эндокринными, онкологическими;
• контактировавшие с гражданами, у кого диагноз COVID‑19 подтвердился.

Так же на анализ направляют при обнаружении положительного результата при прохождении экспресс-теста.

Специфика

Специфика всех тестов на основе метода обследования ПЦР в том, что его результаты не могут быть ложноположительными. То есть, если результаты анализа говорят о присутствие ДНК возбудителя болезни, оно точно имеется в пробе. Но из-за такой точности при несоблюдении всего технологического процесса в стерильных условиях, есть риск понести расходы на исследование и провалить его, когда загрязнение будет обнаружено и определено. Что выявляет некоторую слабость методики.

Поэтому, лучше всего обращаться за ДНК-тестирование в специализированную клинику со своей собственной хорошо оборудованной лабораторией. Создание таких учреждений происходит с большими вложениями, как в оборудование, так и в квалифицированный персонал.

Диагностика инфекций методом ПЦР: что это такое?

Перечень анализов, проводимых при помощи ПЦР-диагностики расширяется с каждым днём. Что это за метод, как его проводят и в чём его достоинства? На эти и другие вопросы отвечает Владислав Александрович Чередниченко, врач-инфекционист, заместитель директора по развитию «Клиника Эксперт» Воронеж.

— Владислав Александрович, ПЦР – что это такое?

ПЦР или, иначе, полимеразная цепная реакция – это современный высокоинформативный метод молекулярно-генетической диагностики, активно применяемый для выявления у человека различных инфекционных и наследственных заболеваний.

За создание метода ПЦР американский биохимик Кэри Муллис был удостоен Нобелевской премии

— Как давно появилась ПЦР-диагностика и насколько она распространена сегодня?

Официальной датой изобретения этого метода диагностики считают 1983 год, а «родителем» — американского биохимика Кэри Муллиса. Он хотел создать метод, благодаря которому можно было бы амплифицировать ДНК (увеличивать число её копий) в ходе многократных последовательных удвоений исходной молекулы ДНК с помощью фермента ДНК-полимеразы. Это событие стало поистине революционным и оказало в последующем серьёзное влияние на развитие молекулярной биологии, генетики и медицины. Подтверждение этому — Нобелевская премия в области химии, которой был удостоен К. Муллис в 1993 году.

Кэри Муллис

Сегодня без ПЦР-диагностики в клинической медицине практически невозможно обойтись. Высочайшая чувствительность метода позволяет опираться на него при выявлении различных инфекционных агентов в разных аспектах － как в качественном (возбудитель есть или нет), так и в количественном (какое количество микроорганизмов).

Помимо медицины метод нашёл применение в генетике, криминалистике, археологии.

— Для выявления каких заболеваний назначают проведение ПЦР?

Универсальность метода позволяет применять его для диагностики большинства патологий вирусной, бактериальной, грибковой природы, а также вызываемых гельминтами и простейшими. Например, метод ПЦР активно используется для выявления таких болезней инфекционной природы, как ВИЧ, гепатиты всех видов, уреаплазмоз, хламидиоз, микоплазмоз, кандидоз, мононуклеоз, трихомониаз, герпетические инфекции, сальмонеллёз, туберкулёз и многие другие.

Читайте материалы по теме:

«Тихий убийца» современников

Как уберечься от болезни Боткина?

Щит и меч от гепатита С. Как защитить себя и своих близких?

Туберкулёз: болезнь, не знающая границ

— Какой биологический материал исследуют при ПЦР-диагностике?

Все биологические среды и жидкости человека: кровь, мочу, кал, мокроту, слюну, сок простаты, сперму, спинномозговую и суставную жидкость, и другие. Выбор биологического материала зависит от локализации возбудителя. К примеру, для проведения ПЦР на обнаружение хламидии, уреаплазмы или герпеса используют соскобы со слизистых оболочек, для выполнения ПЦР на гепатиты А, В, С и др. требуется кровь, а ПЦР-анализ на выявление туберкулёза лёгких будет максимально информативным при исследовании мокроты пациента. Использование метода полимеразной цепной реакции при изучении биоптатов из органов желудочно-кишечного тракта позволяет обнаружить хеликобактерную инфекцию.

О хеликобактере пилори и истории его открытия — наши статьи:

Живущие в кислоте: что мы знаем о хеликобактере пилори

Риск на грани. Как открыли хеликобактер пилори?

— Как проводится процедура ПЦР? В чём её суть?

Любой живой организм обладает своей уникальной «визитной карточкой» — молекулой ДНК или РНК с расположенным в ней набором генов. Эта молекула состоит из звеньев – нуклеотидов. У каждого микробного агента нуклеотиды расположены в определённом порядке и комбинации. Взятый у пациента биоматериал может содержать фрагменты ДНК или РНК инфекционного возбудителя, однако его обычно крайне мало для определения принадлежности микроорганизма к какому-либо из видов. Вот тут на помощь и приходит полимеразная цепная реакция.

Суть ПЦР в том, что берётся малое количество ДНК или РНК-содержащего материала для исследования, а реакция способствует увеличению количества генетического материала, принадлежащего конкретному возбудителю, поэтому становится возможным его идентификация.

Пациента обычно отправляет на ПЦР-диагностику лечащий врач. В процедурном кабинете или в кабинете специалиста у пациента берут необходимый биоматериал, который упаковывается с соблюдением условий стерильности, температурного режима и маркировки. Затем биоматериал отправляют в ПЦР-лабораторию, где помещают в специальный аппарат, в котором происходит три этапа трансформации биоматериала.

Через 1-2 дня пациент получает результаты исследования.

— Требуется ли для проведения ПЦР-исследования специальная подготовка?

Нет, но рекомендуется придерживаться некоторых правил. Кровь для анализа сдают натощак. Слюну, мокроту, мочу и кал собирают в чистую посуду. Перед сдачей материала из половых путей для диагностики заболеваний мочеполовой системы следует на протяжении двух суток воздержаться от половой жизни. Также целесообразно перед исследованием уточнять особенности подготовки в лечебном учреждении либо в лаборатории.

А как готовиться к другим распространённым анализам? Об этом и не только читайте ниже:

Как правильно сдать общий анализ крови?

Что показывает биохимический анализ крови?

Не только колоноскопия: о чём расскажет анализ кала?

— Владислав Александрович, расскажите о преимуществах и недостатках данного метода исследования.

Недостатков у ПЦР-диагностики при условии строгого соблюдения технологии проведения анализа и чистоты материала, на мой взгляд, нет.

Главным достоинством данного метода является его высокая чувствительность и возможность обнаружения самого возбудителя как в качественном, так и в количественном отношении. Определение количества микроорганизмов служит хорошим подспорьем для лечащего врача, так как позволяет оценить степень поражения, а также эффективность проводимого лечения.

Бесспорным преимуществом ПЦР-диагностики является также пригодность различных видов биологического материала пациента: крови, мочи, кала, спермы и т.д. В одном образце материала можно обнаружить нескольких возбудителей. К плюсам ПЦР-диагностики я бы отнёс и то, что это аппаратная методика, практически исключающая субъективизм в оценивании биологического материала.

Беседовала Севиля Ибраимова

Редакция также рекомендует:

Вирусы и бактерии – в чём принципиальное отличие?

Чем опасны ТОРЧ-инфекции?

Герпес: как распознать и вылечить?

Я умру, упав лицом на клавиатуру пишущей машинки

Для справки:

Чередниченко Владислав Александрович

В 2000 году закончил Донецкий государственный медицинский университет им М. Горького по специальности «Лечебное дело».

В 2002 году закончил магистратуру в Украинской военно-медицинской академии (г. Киев) по специальности «врач-инфекционист».

Заместитель медицинского директора по развитию региона в «Клиника Эксперт» Воронеж. Принимает по адресу: ул. Пушкинская, д. 11.

Применение ПЦР

Спектр применения технологии полимеразной цепной реакции столь широк, что позволяет проводить различные исследования молекулярно-генетической направленности. Метод используется, как для ДНК-тестов, ставших быстрыми и повседневными, так и для изучения ещё не изученных структур ДНК

И всё благодарят тому, что технология позволяет извлечь из любого количества ДНК интересующий исследователя участок, размножить его и провести глубокий анализ его свойств в различных формах, посредством изучения химических реакций. Таким образом, ПЦР выявляет, позволяет наблюдать зависимости между генами и изучать их совместные реакции на искусственные экспериментальные раздражители.

Как сдавать анализы

Как мы уже говорили, врач может попросить сдать для исследования различный биологический материал, поэтому подготовка к процедуре зависит от того, на что именно вы проверяетесь.

Сдача слюны, мочи, спермы

Если специалист берет на анализ слюну, то перед процедурой нельзя есть и принимать лекарства как минимум 4 часа. Перед тем, как сдать анализ, наберите в рот кипяченой воды, чтобы прополоскать его.

Если доктор попросил сдать мочу, то нужно брать только утреннюю. Перед тем, как собрать мочу на анализ, необходимо тщательно подмыться. Чтобы материал был чистым, без посторонних примесей, женщинам во влагалище лучше вставить тампон, а мужчинам постараться оттянуть кожную складку. В контейнере должно быть не менее 50-60 мл мочи.

Если берут на анализ сперму у мужчин, то перед ее сдачей он должен воздерживаться от половых контактов как минимум 3 дня. Также в это время не стоит посещать сауну, принимать горячую ванну, употреблять спиртные напитки, есть острую пищу. Важно перед тем, как сдать анализ, как минимум 3 часа не ходить в туалет, т.е. воздержаться от мочеиспускания.

Если врач попросил сдать кровь, то это делается утром, натощак. Перед этим не стоит увлекаться жирной пищей и пить алкогольные напитки.

Проведение ПЦР

ПЦР исследование, что это такое? ПЦР диагностика проводится в специальном аппарате – амплифакторе. Это прибор, в который устанавливаются пробирки с биологическими пробами. В зависимости от исследования амплифактор настраивается на нужное количество циклов и начинает попеременно нагревать и охлаждать пробирки, в которых в это время идут реакции. При этом создаётся однородность температуры по всей внутренней камере, необходимая температура задается буквально в один миг и регулируется с точностью до 0,1 градуса.

Такая точность при нагреве и охлаждении необходима для того, что бы ни превысить пороговые значения и не испортить биоматериал.

Что необходимо для проведения, или, что определяет ПЦР:

• Буферный раствор;
• ДНК-матрица с содержанием искомого участка генов для амплификации;
• Термоустойчивая ДНК-полимераза;
• Ионы Mg2+;
• Два коротких фрагмента нуклеиновой кислоты для запуска синтеза комплементарной цепи с помощью ДНК-полимеразы.

Анализ крови на паразитов методом ПЦР

В крови определяют ДНК листерий и токсоплазм.

Это одноклеточные паразиты.

Листериозом чаще всего заражаются через еду.

Болезнь может давать осложнения, вызывать воспаление структур центральной нервной системы.

В группе риска – беременные, пожилые, лица с иммунодефицитом или онкозаболеваниями.

В большинстве же случаев листериоз протекает как кишечная инфекция.

Септическая его форма очень опасна и часто приводит к летальному исходу.

Токсоплазма – распространенная, не столь опасная инфекция.

Она представляет наибольшую угрозу для беременных.

Анализ назначается при:

• привычном невынашивании беременности
• длительной лихорадке неясного происхождения
• ВИЧ
• увеличении печени и селезенки

Все беременные сдают анализ на токсоплазму.

Хотя обследуют их обычно при помощи серологических методов.

Болезнь часто манифестирует на фоне иммунодефицита.

Ход реакции

Один цикл реакции протекает в три стадии:

• Стадия нагревания. Спираль ДНК в пробе нагревается на период от половины до двух минут на 94-96 градусов. Под воздействием высоких температур цепи ДНК распадаются на отдельные фрагменты
• На второй стадии, как бы вылавливаются необходимые фрагменты с помощью праймеров и сплавляются. Эта стадия проходит при температуре немного ниже, на 4-5 градусов и называется «отжигом». Продолжительность стадии так же варьируется от половины до двух минут.
• Добавляется специальный фермент для запуска самовоспроизводства (синтеза) «пойманного» участка генов – ДНК-полимераза. И этот фермент запускает реакцию удваивания фрагмента, используя стартовый фрагмент, как матрицу для синтезирования копии. Протекает реакция при 72 градусов от 10 до 12 минут.

Обычно одно исследование составляет от 20 до 35 подобных циклов.

Какие инфекции можно диагностировать при помощи ПЦР?

ПЦР помогает диагностировать инфекции мужской и женской мочеполовой системы: уреаплазмоз, хламидиоз, герпес, гонорею, микоплазмоз, гарднереллез, папилломавирусную инфекцию. В гастроэнтерологии метод применяют для выявления возбудителя язвенной болезни H. pylori, в пульмонологии — для диагностики туберкулеза, пневмоний, вызванных бактериями и вирусами.

ПЦР помогает обнаруживать возбудителей дифтерии, кишечных инфекций (сальмонеллеза), вирусных гепатитов (B, C, G), онковирусов, цитомегаловирусов.

Сдача анализов

Анализ методом ПЦР требует особой аккуратности. Поскольку главное требование всей процедуры это идеально чистый образец для пробы, многие анализы сдаются непосредственно в клинике: кровь, другие физиологические жидкости, иногда ткани.

Самый простой метод сбора биоматериала это сбор слюну с внутренней полости рта на ватную палочку. Способ прост, выполняется на дому, но подходит не для всех тестов.

Отдельно протекает подготовка нестандартных образцов, что индивидуально и лучше проконсультироваться у клиники, в каком прядке она их примет.

На какие инфекции проверяет мазок на ПЦР

ПЦР чувствительна к любым известным микроорганизмам.

То есть способна выделить ДНК любого возбудителя: бактерии, вирусы, простейшие, грибы.

Список возбудителей, которые выявляются методом ПЦР, совпадает со списком инфекционных агентов, способных вызывать ИППП.

• сифилис
• трихомониаз
• хламидиоз
• микоплазма и уреаплазма
• гонорея
• ВПЧ
• мягкий шанкр
• гарднереллез
• генитальный или иной герпес
• донованоз
• цитомегаловирусная инфекция
• ВИЧ
• вирусные гепатиты
• контагиозный моллюск
• саркома Капоши
• кандидоз
• фтириаз
• чесотка

Подготовка у женщин

Для женщин наставлений, запретов и рекомендаций к сдаче несколько больше:

• Не переусердствовать с интимной гигиеной и не использовать мыла с антибиотиками.
• Вообще любой прием антибиотиков более чем за 4 недели до сдачи анализов запрещён.
• Имеются запреты и на специфические интимные средства. Поэтому, для верности соблюдения допусков проще ограничиться стандартной гигиеной. И ограничиться желательно за месяц до сдачи анализов.
• Запрещена сдача анализов в особо острые дни месячных женских циклов.
• Запрещаются близкие интимные контакты за 48 часов до проведения процедур.

Технология забора мазка на ПЦР

Для женщин необходима некоторая подготовка к забору мазка, в том числе на ПЦР.

Подготовка к забору мазков:

• в день забора материала не мыться, не спринцеваться
• не мочиться минимум за 2 часа до забора
• мазки не собирают в период менструации и в течение 2 дней после нее
• накануне не применять антисептические и антибактериальные средства, в том числе местно (свечи, орошение, таблетки, инъекции)
• антибиотики должны быть приняты курсом, но первое исследование назначают через месяц после последнего приема

Рассмотрим, как именно берут мазок на ПЦР у женщин. Процедура выполняется врачом-гинекологом, урологом, венерологом или акушеркой при помощи стерильного тампона.

Им проводят по местам забора материала, по кругу, без нажатия:

• ​мочеиспускательный канал
• цервикальный канал
• стенка влагалища
• ​ампула прямой кишки
• слизистая глаза и нижнее веко
• задняя стенка глотки и миндалины

Тампон помещается в стерильную пробирку или им проводится по предметному стеклу с фиксатором. После чего материал доставляется в лабораторию.

Соскоб проводится тем же стерильным тампоном. Только вращательными движениями и с приложением некоторого усилия или специальной «щеткой». Далее щетка или тампон также помещается в стерильную пробирку или ими проводится по предметному стеклу.

Забор мочи на ПЦР осуществляется стерильный контейнер, первые 50 мл, не выделяя средней порции. Далее контейнер закрывается и доставляется в лабораторию.

Забор мокроты на ПЦР проводится в стерильный контейнер. Предварительно пациенту предлагают выпить побольше жидкости.

С утра пациенту предлагают откашляться и отделить мокроту в стерильную посуду. Данное исследование используют для диагностики туберкулеза, хламидиоза и микоплазмоза.

Расшифровка результатов ПЦР

Когда речь идет всего лишь о выявлении заболевания, из всего спектра возможности полноценной диагностики, расшифровка, как и сам тест довольно просты. Высокая точность анализа позволяет выявить самые незначительные следы присутствия чужеродной ДНК, размножить её до необходимых объемов и исследовать.

С непривычки, такое точное диагностирование, выявляющее заболевания на сверхранней стадии, может вызвать недоверие к результатам. Симптомов нет, самочувствие хорошее, а результаты теста говорят об обратном. Если в теме о проблемах здоровья можно, как-то говорить о везении, то выявить заболевание так рано и сразу начать его лечение — это своего рода удача.

Тем временем за расшифровкой каждого известного гена стоят десятилетия непрерывных исследований ведущих университетов разных стран мира. Например, один из самых длительных из известных исследовательских проектов, проект «геном человека», продолжался без малого 13 лет к ряду. За время проведения только этих исследований было изучено около 25 тысяч генов, составляющих человеческую ДНК.

Правила сбора материала на анализ

Чужеродные ДНК и РНК можно выявить, обследовав разнообразные биологические жидкости конкретного человека. Для того чтобы обследовать человека на присутствие определенных инфекций, передаваемых половым путем, необходимо взять на пробу выделения из половых органов (мазок или соскоб) больного и его мочу.

Если возникла необходимость обследовать человека на различного рода инфекции (ВИЧ, герпес, гепатит и другие), то берется ПЦР анализ, для чего используется кровь больного.

Чтобы диагностировать герпетическое поражение, мононуклеоз, нужно взять мазок из полости рта больного. Для подтверждения ЦМВИ для осуществления анализа берется моча больного. Возникают случаи, когда обследуют спинномозговую жидкость для выяснения причин возникших неврологических отклонений.

Врач-пульмонолог при этом обследует методом ПЦР мокроту и жидкость из плевры конкретного больного.

Если у новорожденного ребенка возникло подозрение на внутриутробное инфицирование, врачи берут анализ околоплодных вод у беременной женщины и кусочек тканей плаценты.

Проверка на ВИЧ

У ДНК-анализа не ВИЧ имеется несколько специфических особенностей и рекомендаций:

1. Если произошел нежелательный контакт с ВИЧ инфицированным человеком, то анализы на проведение диагностики необходимо сдавать не ранее 14 суток, после него.
2. Во время проведения диагностирования в образце происходит поиск не ДНК-вируса, а клеток им уже поврежденных. Эти клетки несут в себе специфическую вирусную информацию, которая самокопируется в незаражённые клетки.
3. Хоть синдром иммунодефицита и остаётся одной из самый опасных болезней. Но, период истерии средств массовой информации по её поводу сильно омрачил её, и без того опасные особенности. Заразность даже при попадании инфицированной крови в кровь здоровую составляет 85%, что много не 100%. При прочих же контактах она составляет не более чем от 1% до 10%.
4. Сроки получения готовых результатов анализов находятся в пределах от 4 до 7 дней.

Что нужно сдавать на ПЦР

Мазки:

• из мочеиспускательного канала
• из прямой кишки
• со слизистой глаза и нижнего века
• из цервикального канала
• из влагалища
• из зева
• с поверхности кожных высыпаний и язв

Кровь, секрет предстательной железы, вода, почва, смывы с поверхностей и даже продукты.

Кому мы обязаны появлением метода ПЦР?

Со слов американского биохимика Керри Мюллиса (Kary Mullis), идея идентифицировать живые организмы по короткому участку их генетического кода (ДНК) пришла ему в голову в 1983 году, по пути с работы домой. А в основе этой идеи, лежала работа другого американского биохимика, Артура Корнберга (Arthur Kornberg), которая в свое время не нашла отклика у научного сообщества.

Керри допустил возможность того, чтобы взять молекулу ДНК какого-либо организма, с помощью высокой температуры «распустить» ее спираль на две нити, специфическими маркерами-праймеры пометить уникальные для этого микроорганизма участки ДНК и затем, применив фермент ДНК-полимеразу, создать из двух нитей две новые молекулы ДНК. Но уже содержащие в себе меченные праймеры. И потом останется просто искать эти участки в диагностическом материале.

В итоге, корпорация CETUS, в которой работал Мюлис, выделила ему команду ученых. И в 1985 году, в издании Американского общества генетики человека, появилась публикация с теоретическим обоснованием ПЦР, как метода идентификации генетического материала живых организмов.

Стоимость ПЦР-анализа

В нашей клинике анализы на ПЦР можно пройти быстро, без очереди. Анализ проводится на современном оборудовании. Записывайтесь по телефону +7 (495) 308-39-92.