Как проводится определение и результаты исследования осмотической резистентности эритроцитов, нормы и отклонения

Под резистентностью эритроцитов понимают их устойчивость к различным разрушающим факторам: механическим, тепловым и другим. Особое значение в лабораторных исследованиях имеет осмотическая резистентность эритроцитов, то есть устойчивость к гипотоническим растворам NaCl разной концентрации. С помощью специального теста определяют, при какой концентрации хлорида натрия начинается распад красных кровяных телец (гемолиз).

Эритроциты для нормального функционирования должны сопротивляться осмотическому давлению, то есть должны быть прочными. Способность к сопротивлению и называется осмотической устойчивостью, или резистентностью. Если красные тельца становятся слабыми, иммунная система их маркирует как отработанный материал и удаляет из организма.

Выделяют резистентность максимальную и минимальную. Максимальная соответствует концентрации гипотонического раствора NaCl, при которой в течение 3-х часов происходит гемолиз всех красных клеток. Минимальная определятся концентрацией раствора, при которой разрушаются наименее устойчивые эритроциты.

Что такое ОРЭ

ОРЭ – это устойчивость красных кровяных клеток к разрушающим факторам: высокой или низкой температуре, химическим веществам, а также к механическому воздействию. Обычно в лабораторных экспериментах выявляют резистентность эритроцитов к хлористому натрию (NaCl). В ходе опытов важно выяснить, какая концентрация этого химиката вызывает разрушение эритроцитов. Это помогает выявить устойчивость мембран кровяных клеток к давлению и химическому воздействию соляного раствора (осмосу). Нормальные эритроциты могут сопротивляться. Они остаются прочными, а их оболочки – целыми. Это и называется осмотической резистентностью эритроцитов.

Иммунная система способна определять кровяные клетки, которые слабы и не могут сопротивляться воздействию. Со временем такие эритроциты выходят из организма.

Как происходит агрегация эритроцитов?

Самую простую агрегацию эритроцитов можно видеть под обычным микроскопом, когда на предметном стекле находится маленькая капля крови. В ней постепенно образуются склеенные столбики, «пачки» эритроцитов, которые называются монетными столбиками.

Плотность этих столбиков постепенно возрастает, и затем уже не видно, что они склеены из отдельных эритроцитов. Они представляют цельный конгломерат. Этот феномен в лаборатории называется гомогенизацией.

К счастью, этот процесс вполне обратим, и в организме эритроцитарные сладжи (такое название есть у подобных структур) могут распадаться на отдельные клетки.

Важное клиническое значение агрегации эритроцитов в том, что эти сгустки из отдельных клеток нарушают капиллярный кровоток, поскольку они ухудшают текучесть крови, или ее реологические свойства. В крупных сосудах, таких как аорта, подключичная артерия, крупные сосуды печени агрегация эритроцитов незаметна.

Но в мелких капиллярах ее игнорировать уже нельзя. Этот феномен может развиться быстро и сильно, сразу во всем организме, что наблюдается при некоторых заболеваниях.

В том случае, если агрегация эритроцитов происходит по причине какого-либо токсина, острой инфекции, например, при малярии, при крупозной пневмонии, при различных шоках, то во всём организме возникает серьезное препятствие для микроциркуляции. Кровь очень плохо поступает из мелких артерий в капиллярную систему.

Кроме этого агрегация, если она произошла внутри мелких капилляров, очень плохо воздействует на газообмен в тканях. Существует наука патофизиология, которая изучает типичные патофизиологические процессы, повреждающие различные структуры организма. С точки зрения этой науки, пределом вредности является полная остановка капиллярного кровотока, или стаз.

В результате возникает выраженный метаболический и тканевой ацидоз, или происходит повышение кислотности крови. Это состояние требует лечения, Но в данном случае применяется вовсе не сердечный аспирин, а специфическая терапия, направленная на выведение токсинов из организма человека, интенсивная терапия, направленная на восстановление капиллярного кровотока и микроциркуляторной функции. Наиболее частыми причинами агрегации эритроцитов являются:

• гемодинамический фактор, который определяет поведение эритроцитов в потоке крови.

На этот фактор в значительной степени влияет концентрация эритроцитов. Понятно, что если у пациента возникло обезвоживание, то эритроциты находятся близко друг к другу, и их агрегация произойдёт наверняка,

• вторым фактором является плазменный.

Этот фактор определяет состояние плазмы крови и нахождение в ней различных веществ, которые помогают эритроцитам сблизиться или оттолкнуться. Именно плазменным фактором дезагрегации будет являться прием аспирина. Его молекулы, находясь в плазме крови, препятствуют сближению эритроцитов их слипанию.

Наконец, третий фактор является электростатическим. Это не что иное, как обычные силы кулоновского притяжения разноименных зарядов. Этот фактор также помогает эритроцитам слипнуться в комочки, и они становятся склеены.

Как исследуют ОРЭ

Для определения осмотической резистентности эритроцитов проводят наблюдения за реакцией крови и раствора хлористого натрия. Эти ингредиенты смешивают в равных пропорциях.

Если концентрация раствора хлорида натрия равна 0,85%, то его называют изотоническим (или физраствором). При более низком содержании соли химикат называют гипотоническим, а при более высоком – гипертоническим. В изотоническом растворе эритроциты не разрушаются, в гипотоническом – набухают и распадаются, а в гипертоническом – сжимаются и погибают.

Что такое физраствор?

Физраствор – это дистиллированная вода с растворенной в ней поваренной солью. Физиологический раствор с концентрацией 0,85 процентов называют изотоническим. В нем разрушения эритроцитов не происходит.

Если концентрация соли ниже, раствор называют гипотоническим, если выше – гипертоническим. При помещении в такие растворы эритроциты начинают разрушаться. В гипертоническом, или гиперосмотическом, они теряют воду и сморщиваются. В гипотоническом, или гипоосмотическом, они поглощают воду и набухают.

Как проводят анализ

Метод определения осмотической резистентности эритроцитов связан с использованием гипотонических растворов концентрацией от 0,22 до 0,7%. В них помещают одинаковое количество крови. Эту смесь держат около часа при комнатной температуре, а затем подвергают обработке в центрифуге. При этом наблюдают за цветом жидкости. В начале процесса распада эритроцитов смесь становится слегка розовой, а при полном разрушении кровяных клеток – красной.

Таким образом, при определении осмотической резистентности эритроцитов получают 2 показателя: минимальный и максимальный.

Осмотическая резистентность эритроцитов

Осмотическая резистентность эритроцитов — показатель устойчивости эритроцитов к осмотическому давлению. Стойкость ККТ определяется только путем диагностических мероприятий. Превышение или понижение нормы будет свидетельствовать о развитии определенного патологического процесса, а потому показатель следует всегда контролировать.

Осмотическая резистентность эритроцитов имеет свои минимальные и максимальные значения:

• максимум — воздействие гипотонического раствора натрия хлорида, когда в течение трех часов происходит гемолиз совершенно всех клеток;
• минимум — воздействие вещества другой концентрации, при которой происходит разрушение только минимально устойчивых клеток.

Следует отметить, что осмотическая резистентность эритроцитов будет зависеть от их возраста. Самая большая устойчивость у молодых ККТ как у самых плоских.

Определение осмотической резистентности эритроцитов осуществляется следующим образом:

• используется несколько стеклянных пробирок, в которые заливается раствор натрий хлорида разной концентрации — чаще всего от 0,7 до 22 %;
• в пробирки с раствором добавляют образцы крови, но только в одинаковом количестве;
• образцы помещают в условия комнатной температуры на 60 минут;
• по истечении срока пробирки с образцами центрифугируют;
• полученный после этого окрас жидкости будет указывать на показатели осмотической стойкости эритроцитов.

Если окрас жидкости розовый, это говорит о минимальной концентрации, а вот ярко-красный цвет будет говорить о максимальной. Норма для сферической резистентности эритроцита составляет 0,32–0,44 процента раствора натрия хлорида.

Осмотическая резистентность эритроцитов

Норма для взрослого человека следующая:

• максимальная устойчивость — норма 0,32–0,34 %;
• минимальная осмотическая резистентность эритроцитов — 0,46–0,48 %.

Если норма не соблюдается, то есть показатели выше или ниже, это может свидетельствовать о развитии определенного патологического процесса в организме. Даже незначительное отклонение от нормы может указывать на довольно тяжелые патологические процессы в организме, поэтому осмотическое давление нужно обязательно контролировать.

Норма показателей может нарушаться вследствие определенных заболеваний как острого, так и хронического типа. Максимальные показатели резистентности могут наблюдаться в следующих случаях:

• атеросклероз;
• злокачественные новообразования в желудочно-кишечном тракте;
• талассемия;
• полицитемия, но только в некоторых случаях;
• спленэктомия;
• гемоглобинопатия;
• гемоглобиноз;
• застойная желтуха;
• врожденные заболевания крови;
• системные и аутоиммунные патологии.

Минимальная осмотическая резистентность может быть следствием таких патологических процессов:

• железодефицитная анемия;
• гемолитическая анемия у новорожденных;
• отравление тяжелыми металлами;
• обширная интоксикация организма;
• наследственная форма гемолитической анемии.

Небольшое отклонение от нормы может быть обусловлено такими заболеваниями:

• лейкоз;
• цирроз печени;
• туберкулез.

Предрасполагающие факторы для снижения устойчивости ККТ:

• выработка шарообразных эритроцитов — генетическое отклонение;
• завершение жизненного цикла ККТ, что приводит к шарообразной форме;
• сердечно-сосудистые заболевания.

Определить, что именно привело к такому нарушению, можно только путем диагностических мероприятий. Поводом для начала обследования будет соответствующая клиническая картина.

Клиническая картина будет носить общий характер. Специфических симптомов, которые будут характерны только отклонению от нормы резистентности ККТ, нет.

Может присутствовать симптоматика такого характера:

• бледность кожных покровов;
• снижение веса без видимой причины;
• повышенная утомляемость и нарастающая слабость, что будет больше похоже на синдром хронической усталости;
• плохой аппетит;
• сонливость;
• обострение хронических заболеваний.

При наличии клинической картины нужно обращаться к врачу. Первоначально это врач общей практики, то есть терапевт. Далее обследованием занимаются гематолог и смежные специалисты.

Если диагностически будет установлено, что показатели ниже или выше допустимых, в обязательном порядке нужно проходить лечение, так как большая часть этиологических факторов представляет опасность не только для здоровья, но и для жизни пациента.

Лечение будет полностью основываться на первопричинной патологии. Терапевтические мероприятия могут быть как консервативными, так и радикальными. Прогноз носит исключительно индивидуальный характер.

Норма резистентности

Норма показателя ОРЭ не зависит от возраста и пола пациента. Небольшое снижение этого значения наблюдается у пожилых людей, а повышение – у детей до 2 лет.

Нормой осмотической резистентности эритроцитов считается максимальный показатель – от 0,32 до 0,34% и минимальный – от 0,46 до 0,48%.

Это означает, что нормальные эритроциты проявляют наибольшую устойчивость в растворе концентрацией 0,32 – 0,34%, и наименьшую – в 0,43 – 0,48%.

Осмотическая резистентность эритроцитов: что это такое и каковы ее нормы?

Анализ на осмотическую резистентность эритроцитов практически никогда не назначается врачом — терапевтом, кардиологом, гастроэнтерологом. А вот врач-гематолог, который занимается диагностикой и лечением заболеваний крови, выписывает Пациенту направление на этот анализ довольно часто. Что это за исследование? Для чего оно проводится, и какие значения определяются у здорового человека?

Чтобы выяснить это, следует вспомнить, что такое эритроциты, что такое резистентность, и какое отношение она имеет к осмосу. Прежде всего, следует заменить красивое слово «резистентность» его синонимом: устойчивость. Поэтому речь пойдет о феномене осмотической устойчивости эритроцитов.

Причины отклонения

В некоторых случаях ОРЭ может быть выше или ниже нормы. Повышение устойчивости мембран красных кровяных клеток наблюдается при гемолитической желтухе. При этом происходит повышение билирубина, и на оболочках эритроцитов откладывается холестерин. А также повышение ОРЭ бывает при аномалиях мембраны эритроцитов (сфероцитозе) и при нарушении строения гемоглобина (гемоглобинопатии).

Понижение осмотической резистентности эритроцитов встречается в следующих случаях:

1. Болезни крови, удаление селезенки, массивные кровопотери.
2. Сердечно-сосудистые патологии. При этом красные кровяные клетки по форме напоминают сферу и имеют плохую устойчивость к внешним воздействиям.
3. Генетические аномалии, при которых эритроциты по форме похожи на шары. Такие измененные клетки имеют низкую резистентность.
4. Большое количество старых эритроцитов, с высокой проницаемостью мембран. Это может быть связано с заболеваниями почек. Именно этот орган отвечает за вывод старых кровяных клеток из организма.

Однако нужно помнить, что при некоторых видах анемии показатель ОРЭ может оставаться нормальным. Например, при недостаточной активности фермента эритроцитов (Г-6-ФДГ) результат анализа будет в пределах допустимых границ. Но при этом у пациента наблюдаются все признаки анемии.

Причины изменения ОРЭ и характерные симптомы

Состояние мембран эритроцитов и их резистентность напрямую зависит от характера заболевания или наследственной патологии:

• причиной увеличения стойкости клеточных стенок может быть механическая желтуха, стомацитодоз, наследственный или приобретённый сфероцитоз, разновидности гемоглобинозов;
• истончение мембран и перенасыщение крови незрелыми формами эритроцитов происходит после большой кровопотери, а также характерно для онкогематологических заболеваний, гемоглобинопатий, железодефицитных анемий, при иммуносекретирующих опухолях.

Некоторые сердечно-сосудистые заболевания способствуют насыщению крови уплощёнными формами эритроцитов с малым индексом сферичности, а отдельные виды наследственных патологий – излишне шарообразными формами. Такие изменения клеток обладают одинаково плохой резистентностью.

Об избыточном количестве билирубина, недостаточном снабжении тканей кислородом, вызванной пониженной концентрацией здоровых форм эритроцитов, свидетельствует следующий набор гемолитических признаков:

• апатия, общий упадок сил, быстрая утомляемость;
• абсолютное отсутствие аппетита, снижение веса;
• повышение температуры тела (в том числе до граничных показателей);
• непреодолимая сонливость;
• бледность или лёгкая желтушность на видимых участках кожи.

Границы нормы

При исследовании проводят определение границ осмотической резистентности эритроцитов. Превышение или снижение этих показателей может означать патологию.

Верхняя граница ОРЭ в норме составляет не более 0,32%. Если резистентность становится меньше этого показателя, то это может свидетельствовать о следующих патологиях:

• гемоглобинопатия;
• желтуха застойного типа;
• операция удаления селезенки;
• талассемия;
• полицитемия;
• сильная потеря крови.

Если нижняя граница осмотической резистентности эритроцитов становится больше 0,48%, то это может быть при разных видах гемолитической анемии и после отравления свинцовыми соединениями.

При некоторых видах патологий крови границы ОРЭ могут расширяться. Так происходит при анемии, связанной с авитаминозом В12 и разрушении эритроцитов при остром гемолитическом кризе.

Причины изменения показателей

Повышение осмотической стойкости (максимальная резистентность меньше 0,32%) возникает при следующих патологиях:

1. Массивные кровопотери (более 5% от объема крови), так как в качестве компенсаторного механизма в крови увеличивается число молодых эритроцитов, но в условиях дефицита ресурсов. В итоге образуется большое количество клеток с недостаточно прочными мембранами.
2. Атеросклероз: производные холестерина могут откладываться на мембране эритроцита, что приводит к изменению ее свойств.
3. Механическая желтуха, ее причины: закупорка желчевыводящих протоков вследствие образования желчных камней, заболевания желчного пузыря и некоторые болезни печени.
4. Наследственные анемии, связанные с изменением структуры гемоглобина (гемоглобинопатии): талассемия, серповидно-клеточная анемия.
5. Наследственные заболевания, в результате которых изменяется структура мембраны эритроцитов (мембранопатии).
6. Состояние после удаления селезенки.
7. Истинная полицитемия – чрезмерное увеличение количества клеток крови из-за опухоли в кроветворных органах.
8. Рак органов желудочно-кишечного тракта.

Снижение осмотической резистентности (минимальная становится выше 0,48%) может быть связано с:

1. Отравлением свинцом и его производными.
2. Гемолитической анемией, при которой происходит массивный гемолиз красных кровяных телец. Причины различны: аутоиммунные, наследственные заболевания, гемолитическая желтуха новорожденных и другие.
3. Небольшое снижение возможно из-за туберкулеза, сердечной недостаточности, лейкоза (рак крови), цирроза печени.

Форма и зрелость красных клеток крови

Осмотическая резистентность эритроцитов зависит от формы этих клеток. Резистентность значительно ниже у красных кровяных телец, имеющих выраженную сферическую или шарообразную форму. Такие клетки очень подвержены разрушению под воздействием различных факторов. Форма эритроцитов может быть наследственно обусловлена или являться следствием их старения.

На устойчивость эритроцитов влияет также их возраст. Самая высокая резистентность выявляется у молодых клеток, имеющих плоскую форму.

Признаки нарушения ОРЭ

При отклонениях в анализе на ОРЭ всегда изменяется самочувствие пациентов. Больные жалуются на следующие симптомы:

• быструю утомляемость;
• общий упадок сил;
• сонливое состояние, постоянное желание прилечь;
• бледность кожи;
• ухудшение аппетита;
• беспричинное повышение температуры;
• похудение.

Такие проявления являются результатом кислородного голодания тканей. Обычно при отклонениях в анализе ОРЭ врач назначает дополнительные исследования, чтобы уточнить причину патологии. Если нарушения не являются следствием генетической болезни, то после курса терапии эритроциты приходят в норму.

При нарушениях резистентности эритроцитов больным назначают кортикостероидные гормоны, витамины (фолиевую кислоту), лекарства, содержащие железо. В тяжелых случаях, при частых обострениях заболевания делают хирургическую операцию по удалению селезенки.

Специфическая профилактика нарушений резистентности эритроцитов не разработана. Многие виды таких отклонений имеют наследственный характер. Таким пациентам требуется консультация генетика, чтобы больные не передали патологию своим детям. Нужны также профилактические меры, предотвращающие развитие гемолитического криза. Пациентам нужно обеспечивать условия для хорошего кроветворения. Необходим прием витаминов и препаратов для профилактики анемии, а также диета с достаточным содержанием железа. Это поможет избежать обострения гемолитических проявлений, а в некоторых случаях и улучшить результаты анализа ОРЭ.