Как можно сдать анализ на хеликобактер пилори, подготовка к сдаче

В 2005 году австралийские ученые Робин Уоррен и Барри Маршалл опровергли доктрину о роли неправильного питания, повышенной кислотности, наследственности и хронического стресса в происхождении гастрита и язвенной болезни. Им удалось доказать, что часто самые разные проблемы с желудком имеют конкретного виновника – бактерию Хеликобактер пилори.

Бактерия легко приспосабливается к агрессивной среде. В некоторых случаях иммунитет справляется с заражением, если нет – врач ставит диагноз «гастрит» или «язва». В 1994 году ВОЗ даже признала связь между бактерией и онкологическими заболеваниями пищеварительной системы, так что наличие в организме Хеликобактер пилори – повод пройти комплексную терапию. Но как сдавать анализ на Хеликобактер пилори, где?

Распространенность Хеликобактер пилори

Есть мнение, что Хеликобактером заражено практически 70% населения Земли. Многие являются носителями бактерии, не зная об этом, и передают ее здоровым людям. Хеликобактер пилори действительно может годами скрываться в организме и начинать свою «подрывную» деятельность в исключительно благоприятных для себя обстоятельствах: при хроническом стрессе и усталости, истощении организма, снижении иммунитета, сопутствующих заболеваниях, нездоровом питании и неправильном образе жизни.

Что касается России, зарегистрированных случаев заражения в одной только Москве — 60% от общей численности населения столицы. И ведь это один из самых развитых городов России. Медики говорят, что в разных регионах распространенность бактерии достигает 70-90%, что намного выше, чем в той же Европе или Соединенных Штатах. Объясняется такая большая распространенность относительно низким уровнем жизни большинства населения, пренебрежением нормами гигиены и проживанием в антисанитарных условиях.

Показания к диагностике

Врачи рекомендуют регулярно сдавать основные анализы, чтобы вовремя выявлять и лечить нарушения. Но поступают таким образом далеко не все. Как правило, мы отправляемся в больницу только в том случае, если уже что-то заболело. Так получается и с Хеликобактер пилори.

Как можно скорее обратиться к методам диагностики бактерии в организме обязательно нужно при наличии следующих симптомов:

1. Периодические боли в животе, как правило, во время или после принятия пищи. Это объясняется застоем и проблемами с перевариванием вследствие низкого уровня ферментов.
2. Болезненные ощущения на голодный желудок, которые утихают при приеме пищи. При этом можно почувствовать, как еда спускается по пищеводу, а если выпить стакан воды, можно ощутить, как течет вода – это ощущение проявляется отчетливее и свидетельствует о том, что на стенках есть поврежденные места.
3. Появление или учащение изжоги. Единичная изжога (выбрасывание желудочного сока в пищевод с раздражением его стенок) – это вариант нормы, но повторяющаяся требует консультации врача и сдачи анализов.
4. Ощущение тяжести даже после приема незначительного количества пищи. В таком случае человек чувствует, будто пища встала и не переваривается, «стоит в горле».
5. Частая тошнота и периодическая рвота, которая не вызвана другими причинами (например, токсикозом на ранних сроках беременности).
6. Постоянный дискомфорт в желудке, ноющие боли, легкая тяжесть, ухудшение аппетита. Если симптомы появляются, но потом быстро проходят, это может свидетельствовать о начальной стадии неблагоприятного воздействия Хеликобактер пилори на слизистую.
7. Кровь и иные нехарактерные примеси в кале. Если взрослый человек может определить, что у него болит, то в случае с детьми все не так просто. Именно поэтому нужно обращать внимание на стул малыша, его общее состояние и движения.
8. Часто повторяющаяся диарея, запоры, нарушения дефекации.
9. Повышенный метеоризм и урчание в животе.

Все вышеперечисленные признаки вовсе не указывают на стопроцентное наличие инфекции в организме. Такие симптомы как в комплексе, так и по отдельности могут свидетельствовать о наличии совершенно другой проблемы, а то и вовсе являться вариантом нормы в каком-то конкретном случае.

Как происходит заражение и кому показан анализ на Helicobacter pylori?

Хеликобактер пилори «живет» в нижнем отделе желудка, отлично переносит воздействие желудочного сока, а передается через слюну. Поэтому заражение, как правило, происходит при тесном общении или пользовании одной посудой. По статистике Хеликобактером инфицировано более 60% живущих на нашей планете людей, но проблемы со здоровьем возникают не у всех. Почему? Все зависит от состояния иммунной системы и наличия факторов риска: стрессы, вредные привычки, нарушение режима питания. Срочная диагностика нужна тем, у кого имеются следующие симптомы:

• тяжесть в животе и изжога;
• боли в области желудка (особенно, если они проходят после еды);
• физическое неприятие мясной пищи.

В группе риска также близкие тех, у кого выявлен хеликобактериоз.

Методы диагностики Хеликобактер пилори

Какой анализ сдать на Хеликобактер пилори? Существует несколько методов диагностики бактерии, которые отличаются по точности, необходимости подготовки, времени обработки результатов и так далее. Первое, что сделает врач – это соберет анамнез. Пациента расспросят о симптомах, рационе и режиме питания, сопутствующих заболеваниях, истории болезни, патологиях, которые есть у близких родственников и могут передаваться по наследству. Только потом врач даст направление на определенный вид анализа.

Выявить присутствие в организме вредоносной бактерии можно различными способами. При подозрении на Хеликобактер пилори могут назначить следующие исследования:

1. Лабораторный анализ крови на наличие антител к Хеликобактер пилори. Если антитела будут обнаружены, то значит, что организм распознает бактерию.
2. Анализ кала на антиген. Стул-тест направлен на выявление генетического материала возбудителя в кале.
3. Дыхательный тест. Экспресс-анализ определят активность Хеликобактер пилори в желудке по составу выдыхаемого воздуха.
4. Гастроскопия на Хеликобактер.
5. Цитологическое исследование. Метод является самым точным среди перечисленных.

Какой анализ нужно сдать на Хеликобактер пилори? Для повышения точности диагностики желательно сдать как минимум два теста. Если бактерия была выявлена, то после курса терапии необходимо сделать повторное исследование.

Как сдавать анализ на Хеликобактер пилори? Предварительная подготовка (как сами мероприятия, так и ее необходимость в принципе) зависит от вида исследования.

Состав микрофлоры ЖКТ

Полость рта – входные ворота для микроорганизмов. Оптимальные и стабильные условия для жизнедеятельности микроорганизмов в полости рта (температура, влажность, питание и др.) приводят к тому, что качественный состав микрофлоры чрезвычайно разнообразен и постоянен. Общее количество микроорганизмов в 1 мл слюны примерно находится на таком же уровне, как в дистальных отделах толстой кишки и составляет 10^7 и 10^8, но отличается видовой специфичностью. Среди бактерий доминируют стрептококки, составляющие 30-60%.

Содержимое желудка у 10% здоровых людей стерильно благодаря бактериостатическому и бактерицидному действию соляной кислоты и лизоциму, при сохраненной желудочной секреции, не превышает 10^3 микроорганизмов в 1 мл желудочного сока и преобладают анаэробные микроорганизмы.

По данным Drazer B.A. et al, 1969, Bauchop N.,1971, Browning et al., 1974 и др., у здоровых лиц в слизистой оболочке желудка и желудочном соке наблюдаются: бактериоиды, лактобактерии, энтеробактерии, вейлонелла, стрептококки, стафилококки, микрококки, нейссерии, кампилобактер и др., всего более 14-22 видов бактерий. Среди микрофлоры преобладают стафилококки и стрептококки, грамотрицательные бактерии.

Исследования последних лет по данным разных авторов показал, что у здоровых людей выделяется от 6 – 85% хеликобактер пилори и в 46% определяются антитела к хеликобактеру, у некоторых людей в желудке вместе с хеликобактером определяются кандиды. Основная масса бактерий обитает в пилорическом (выходном) отделе желудка, у здоровых лиц выделяются в 44,4% случаев Н.pylori., в 55,5% — стрептококки, в 61.1% — стафилококки, в 50% молочнокислые лактобациллы, в 22,2% грибы рода Candida и др. Из биоптатов слизистой желудка разных отделов желудка обнаружены Н.pylori — в 33,3%, стафилококки -в 61,1%, стрептококки и лактобациллы встретились в 44,4% случаев и в 27,7% — грибы рода Candida и др. микроорганизмы. Представляется чрезвычайно интересным сочетанность выявления микроорганизмов в слизистой оболочке различных отделов желудка.

Такое разнообразие представителей микрофлоры желудка составляет микроэкологию желудка у здорового человека и нарушение ее приводит к проявлением патогенных свойств микроорганизмов, относящихся к условно-патогенной микрофлоре (H.pylori, стафилококки, стрептококки, Candida, коринобактерии и другие) и находящихся в избыточном количестве в желудке, наряду с другими причинными факторами, может способствовать или поддерживать патологические процессы в желудке.

Иммуноферментный анализ крови на антитела

Данный вид исследования назначается с целью определения наличия антител к Хеликобактер пилори в крови пациента. В медицинской практике принято считать, что антитела к определенным бактериям и инфекциям появляются не просто так, а только в случае заражения как ответ иммунной системы организма.

Определить Хеликобактер иммуноферментный анализ в состоянии только в том случае, если с момента заражения прошло от одной до трех недель и более. Если инфицирование произошло всего несколько дней назад, исследование может дать ложноотрицательный результат, так как организм еще не успел положенным образом среагировать на появление бактерии.

Ложноположительный результат может быть дан по двум причинам:

1. Человеческий фактор, т. е. ошибка лаборанта, который перепутал материал для исследования, неправильно написал вывод и так далее.
2. Недавняя терапия, в ходе которой человек вылечился от Хеликобактер, но антитела все еще присутствуют в составе крови. Контрольный анализ можно проводить не ранее чем через месяц после комплексной терапии, но и в таком случае можно получить положительный результат при отсутствии бактерии в организме. В некоторых случаях (в зависимости от индивидуальных особенностей и некоторых других факторов) антитела сохраняются в крови пожизненно.

Как сдавать анализ крови на Хеликобактер пилори? Нужна ли предварительная подготовка? Накануне исследования следует отказаться от чрезмерно жирной пищи и употребления алкогольных напитков, следует избегать нервных и физических перегрузок. Забор крови делают из вены утром, натощак. Процедура безболезненна, но разные пациенты переносят ее по-разному, поэтому после анализа лучше выпить сладкого чая и съесть кусочек черной шоколадки.

Как определить наличие хеликобактерии в желудке

Глазом увидеть такой мельчайший организм длиной всего 2-3 мкм не представляется возможным, как и провести диагностику в домашних условиях.

Пациент может только предположить наличие гастрита по соответствующим симптомам: боли в эпигастрии после еды, тяжесть и дискомфорт в желудке, изжога, отрыжка воздухом или кислым, металлический привкус во рту. Эти признаки повышения кислотности очень часто сопровождают гастриты, ассоциированные с патогенным микробом.

Но достоверно выявить, поселилась ли бактерия хеликобактер пилори в организме или нет, можно лишь в диагностическом отделении амбулаторно-поликлинического звена, стационара или лаборатории.

Существуют специальные методы, позволяющие с высокой достоверностью обнаружить как сам микроб, так и продукты его жизнедеятельности, а также вырабатываемые организмом антитела в ответ на внедрение микроба:

• Бактериологический

Обнаружение патогена в мазках с участка внутренней стенки желудка или культивирование микроорганизма на питательных средах.

• Серологический

Обнаружение антител в крови, антигенов микробов в кале.

• Морфологический

Выявление Н. руlori под микроскопом при покрытии образца исследования специальными красителями.

• Молекулярно-генетический

Методы полимеразно-цепной реакции.

• Биохимический

Уреазный тест, дыхательный тест.

Все вышеперечисленные методы можно классифицировать на две большие группы:

1. Инвазивные. Способы диагностики, основанные на проведении эндоскопического исследования – ФГДС, со взятием биоптата. Участок внутренней стенки желудка затем можно подвергнуть цитологическому, культуральному исследованию, провести уреазный тест.
2. Неинвазивные. Другие способы обнаружения инфекции, при которых ФГДС не проводится.

Где сдать анализ крови в Москве

Где можно сдать анализ на Хеликобактер пилори в Москве? Во-первых, можно обратиться в государственную поликлинику. Терапевт или гастроэнтеролог, если сочтут необходимым, дадут направление на исследование в лабораторию. Во-вторых, можно сдать кровь на выявление бактерии можно в любой частной клинике, например «Инвитро» или «Литех».

И в том, и в другом случаях результаты будут готовы на следующий день, правда, в частных медицинских центрах можно сделать доплату за срочность и получить вывод специалиста уже через 1-2 часа. Стоимость анализа составит 500-1000 рублей в зависимости от ценовой политики клиники и срочности подготовки результатов. В государственной больнице анализ можно сделать бесплатно.

Анализ кала на антиген к Хеликобактер

Стул-тест – это один из самых удобных для пациента методов диагностики Хеликобактер пилори. Во-первых, исследование не требует личного присутствия в амбулатории, во-вторых, забор материала производится безболезненно (неинвазивно, т. е. без повреждения кожного покрова, как при взятии крови), в комфортных для пациента условиях. Так что есть определенный ответ на вопрос о том, какой анализ сдать на Хеликобактер пилори, например, ребенку, — это стул-тест. Такой анализ особенно удобен для диагностики заболевания у детей, пожилых людей и тяжелобольных пациентов.

Правда, эффективность исследования кала в определении наличия Хеликобактер пилори недостаточна. Количество вредоносных бактерий, если они и есть в пищеварительной системе, при прохождении через кишечник уменьшается, возбудитель подвергается воздействию кислот. В результате исследование может дать ложноотрицательный результат. Но в настоящее время используется специальный метод, с помощью которого специалисты могут определить даже частички генетического материала Хеликобактер в кале.

Как сдавать анализ кала на Хеликобактер пилори? За трое суток необходимо полностью отказаться от использования свечей, перед забором материала нельзя стимулировать стул клизмой, касторовым или другим маслом. За несколько дней до анализа следует исключить из рациона пищу, богатую клетчаткой, содержащую много красящих веществ, солей, нужно отказаться от применения медицинских препаратов, стимулирующих работу кишечника.

4.1. Методы лабораторной диагностики Helicobacter pylori-инфекции

Оглавление

Чтобы просмотреть текст книги нажмите на нужную главу в оглавлении

Следующая часть

4.1.1. Количественное определение IgG к Н.Pylori иммуноферментным БПТ ИммуноКомб

Предыдущая часть

Глава 4. Описание медицинской технологии

Внешний вид

Для выбора варианта лечения необходима своевременная и достоверная диагностика Н.Рylori.

Все способы диагностики Н.Pylori, используемые в настоящее время, условно можно разделить на прямые и не прямые (косвенные). На инвазивные и неинвазивные [5, 7]. Инвазивные методы требуют проведения биопсии слизистой оболочки желудка при эндоскопическом обследовании, неинвазивное – не требуюет биопсии. Прямые методы позволяют непосредственно выявить H.Pylori. Косвенные методы регистрируют не саму бактерию, а последствия ее персистирования в организме.

Большинство прямых методов, основаны на инвазивных способах забора материала. Прямая диагностика инфекции H.Pylori, является достаточно трудоемким и отсроченным во времени процессом [13].

После принятия Маастрихтского консенсуса [14] несколько лет в странах Европы существовала концепция «тестирования и эндоскопии» («testing and endoscopy») [15]. Последняя заключалась в том, что при первичном обращении пациента тестировали на наличие инфекции H. Pylori, и при положительных результатах, обязательно проводили эндоскопическое исследование. Однако, опыт повседневной практики показал неоправданное увеличение количества гастроскопий, которое не компенсировалось положительными эффектами в виде улучшения симптоматики или же повышения качества жизни пациентов. Необходимость в проведении гастроскопии при желудочной диспепсии диктуется онконастороженностью врачей. Вместе с тем, известно, что для пациентов молодого возраста при отсутствии тревожных симптомов в виде потери массы тела или анемии в превалирующем большинстве случаев злокачественные новообразования желудка не характерны. Поэтому для первичных пациентов с язвенной болезнью начали использовать как обязательную концепцию «тестировать и лечить» («test and treat»), принятую на Маастрихтском консенсусе II в 2000 году [10, 16-19]. Руководящие органы здравоохранения многих стран рекомендуют такой же подход для ведения первичных пациентов молодого возраста. Возрастные границы в рекомендациях варьируют в зависимости от уровня заболеваемости раком желудка в конкретной популяции (таблица 1). Возрастной порог составляет 45 — 55 лет [20-26].

Таблица 1. Пороговый возраст при использовании концепции «test and treat»

В соответствии с выработанной концепцией Маастрихтского консенсуса II, Европейской и Российской группами были приняты диагностические алгоритмы, определяющие проведение первичной диагностики инфекций H.Pylori неинвазивными методами: серологическим, дыхательным, ПЦР в кале и слюне.

В России для быстрой диагностики H.Рylori зарегистрированы серологические тесты на основе латекс-агглютинации и сэндвич-метода: FastRead H.Рylori® (CQI-biomed) и Pyloriset® Dry (Orion Diagnostica). Преимуществом этих методик является простота их выполнения и быстрота получаемого результата. К недостаткам следует отнести невысокую степень чувствительности и специфичности, а также невозможность количественного определения антител к Н.Рylori, что не позволяет их использовать для контроля за эрадикацией.

Среди неинвазивных методов диагностики Н.Рylori, за рубежом наиболее распространен серологический иммуноферментный анализ: в крови пациента определяют антитела IgG, IgM к Н.Рylori [27-32]. Данные тесты оптимальны для эпидемиологических исследований и скрининга. Такие исследования проводятся во всех западных странах. В качестве примера можно привести обследование, проведенное в Италии, с помощью ИФА-тестов 1010 доноров, у 298 из которых были определены антитела IgG к Н.Pylori [23]. При последующей гастроскопии у 70 (23,5%) человек из IgG серопозитивной группы выявлены пептические язвы, у 41 (13,8%) – эрозивный дуоденит, у 2 (0,7%) – рак желудка. К сожалению, в России не проводят аналогичные плановые исследования по выявлению инфицированности населения Н.Pylori, хотя скрининг, направленный на обнаружение антител к Н.Рylori, способствует выявлению лиц с гастродуодеальной патологией. Своевременная диагностика и последующая адекватная терапия помогают предотвратить рецидивы заболевания и исключить инфицированность Н.Рylori больших групп населения.

До последнего времени серологические тесты рассматривали только с позиций выявления Н.Рylori у пациентов до лечения. Действительно, существовали ограничения, затрудняющие проведение мониторинга эффективности эрадикации Н.Рylori с их помощью. Последнее связано с тем, что исходное значение концентрации специфических антител к Н.Рylori в сыворотке крови пациентов, установленное стандартными ИФА-тестами, варьирует в значительных пределах, а снижение ее после эрадикации бактерии имеет нелинейный характер. Современное поколение ИФА-тестов, благодаря усовершенствованию технологии сорбции антигена и модификации данного метода, позволяет количественно оценивать степень инвазии H.Pylori, а также степень эрадикации [33-37]. Различными авторами доказано, что снижение титра специфических антител к Н.Pylori на 40% от исходного позволяет констатировать эрадикацию более чем у 90% больных к 3 месяцу после окончания лечения. Серонегативность у всех вылеченных больных наступает через 12 месяцев [38].

В таблице 2 представлены литературные данные по чувствительности, специфичности, предсказательной ценности положительного результата (РРV) и предсказательной ценности отрицательного результата (NPV) наиболее используемых в мире серологических тестов [39].

Таблица 2. Характеристики серологических тестов для выявления НР

Как видно из представленных данных, чувствительность и специфичность ИФА тест-систем выше аналогичных показателей серологических тестов на основе латекс-агглютинации и сэндвич-метода.

При выборе методов диагностики Хеликобактериоза для данной медицинской технологии были учтены следующие факторы:

• чувствительность, специфичность и достоверность тестов;
• возможность количественного определения антител к H.Pylori;
• неравномерное оснащение различных институтов, клиник, стационаров и поликлиник современной диагностической аппаратурой и реактивами;
• необходимость в укреплении диагностической службы первичной медицинской помощи современными высокотехнологичными, доступными методами диагностики.

Из зарегистрированных в Российской Федерации, вышеперечисленным требованиям отвечают иммуноферментные Быстрые Простые Тесты ИммуноКомб H.PILORI IGG (Орженикс), как наиболее чувствительные, специфичные, позволяющие количественно определить титр антител IgG в сыворотке, плазме или цельной крови. БПТ ИммуноКомбне требуют специальной квалификации персонала и дополнительного оборудования. Методика ИммуноКомб основана на оригинальной модификации твёрдофазного иммуноферментного анализа: зубцы пластикового гребня сенсибилизированы соответствующими антигенами или антителами, ячейки ванночек заполнены готовыми растворами конъюгата, промывочными буферами и красителем. При проведении анализа зубцы гребня приводят в контакт с исследуемыми образцами в первом ряду ванночки, а далее последовательно переносят из ячейки в ячейку. В случае положительного результата на зубце гребня появляются точки (окрашенные комплексы антиген-антитело). Правильность постановки анализа подтверждается появлением на зубце контрольного пятна. Учёт результатов – визуальный (для количественной оценки результатов сравнивают интенсивность окраски точек в опыте со стандартной цветовой шкалой, входящей в состав набора)или автоматический с помощью прибора КомбСкан Набор позволяет провести от 1 до 36 анализов, время анализа — 66 минут, срок годности наборов 9 месяцев.

Тест-системы Иммунокомб сертифицированы СЕ 0459 и широко используются более чем в ста странах мира. Тесты ИммуноКомб удовлетворяют всем стандартам качества, установленным директивой 98/79/EC Европейского парламента и Совета для in-vitro диагностики.

Производство тест-систем ИммуноКомб имеет GMP Certificate и соответствует нормам ВОЗ. Качество тестов подтверждено международными стандартами SI ISO 9001:1994, и ISO 13485:1996 и Европейскими стандартами EN 928:2001, EN 928:1996, EN 980:1997, EN 13612:2002, EN 13640:2002, EN 13641:2002, EN 46001:1996

Как достоверные, высокочувствительные и специфичные тестыИммуноКомб отобраны для программ ВОЗ, Юнеско, Красного Креста. Проверены и одобрены институтом П.Эрлиха (Германия), институтом А.Фурниэ (Франция), AFSSAPS, ГИСКом им. Тарасевича.

В настоящее время БПТ ИммуноКомб комплектуются в России совместным предприятием ЗАО «Биоград» (Санкт-Петербург) из реагентов, производимых фирмой Орженикс.

В 1997 г., в ГИСК им. Л.А.Тарасевича, при проведении Государственных испытаний с целью регистрации Иммуноферментного БПТ ИммуноКомб H.PILORI IGG фирмы Орженикс, был проведен сравнительный анализ предлагаемой методики с референс-ИФА тест-системой (Регистрационное удостоверение МЗМПР № 97/316). Сравнение проводилось на 30 человеческих сыворотках от взрослых и детей с патологией пищеварительного тракта и здоровых, либо больных с поражением других органов. Для анализа полученных данных была составлена таблица сопряженности двух признаков: первый признак – выявление IgG антител к H.Pylori в сыворотках по методике Орженикс и второй признак – выявление указанных антител по методике Био-Рад. Четыре сыворотки были отброшены, т.к. не могли быть оценены при помощи референс-метода. Данные представлены в таблице 3 [40].

Таблица 3. Сопряженность выявления антител к H.Pylori двумя методиками

l1 = 21, m1 = 19, n = 26

l2 = 5, m2 = 7

Статистическая обработка данных показала относительно большое значение = 16,8, свидетельствующее о том, что признаки сильно сопряжены друг с другом. Отметим также, что коэффициент корреляции в данном случае оказывается равным 0,8 и это также свидетельствует о наличии сильной связи двух рассматриваемых признаков.

Таким образом, по данным проведенного эксперимента можно сделать вывод, что сравниваемые методики приблизительно эквивалентны.

Клинические испытания проводились в клинике гастроэнтерологии детской клинической больницы № 7 г. Москвы.

Всего было исследовано 95 сывороток.

В детской больнице была исследована 41 сыворотка от детей с различной гастропатологией и 18 – от здоровых и детей с другими диагнозами, не связанными с нарушениями функций желудочно-кишечного тракта. Параллельно с серологическим методом, основанным на применении диагностического набора ИммуноКомб ИммуноКомб H.PILORI IGG, диагноз у пациентов устанавливали совокупностью методов клинической диагностики: эндоскопическим исследованием, рентгеноскопией и т.д. При сопоставлении данных клинической диагностики и серологического исследования были получены следующие цифры: у детей, страдающих различными формами гастрита, гастродуоденита, язвенной болезнью и полипозом, повышенный уровень IgG антител к H.pylori выявлялся в 24 случаях, что составляло 58,5%. При обследовании взрослых пациентов (всего в группе 36 больных) совпадение положительных результатов серологического анализа и клинического диагноза обнаружено в 97,2% случаев; у пяти больных данные серологического исследования были подтверждены гистологическим методом (в препаратах биоптатов антрального отдела и тела желудка, окрашенных по Гимза), цитологическим методом (в мазках-отпечатках биоптатов, окрашенных по Гимза) и уреазным методом с применением Де-нол теста. Положительный результат серологического теста у такого контингента больных является закономерным.

Параллельное определение чувствительности и специфичности препаратов фирм Орженикс и Био-Рад на 30 сыворотках обнаружило сходные результаты:

• чувствительность тест-системы ИммуноКомб фирмы Орженикс – 85 %,
• чувствительность тест-системы фирмы Био-Рад – 80%.

Если за точку отсчета брать данные, полученные при помощи референс-препарата Био-Рад, то чувствительность теста ИммуноКомб H.PILORI IGG составляет 100%, а специфичность – 71% (см.Таблицу 3) [40].

При сопоставимых характеристиках сравниваемых тестов в заключении ГИСКа им. Тарасевича [40] было отмечено, что тесты ИммуноКомб не требуют дополнительного оборудования, позволяют получать результат анализа через 66 минут и документировать его, делают доступным, наряду с групповым, индивидуальное тестирование. Наличие внутреннего контроля в тестах ИммуноКомб обеспечивает безошибочную постановку анализа и максимальную достоверность результата.

ИммуноКомб — оригинальная модификация Иммуноферментного анализа – единственные Иммуноферментные Быстрые Простые Тесты. В отличие от других БПТ и экспресс-тестов, чувствительность и специфичность ИммуноКомб достигает, а в некоторых случаях превосходит характеристики классических ИФА ELISA-тестов, требующих дорогостоящего оборудования, специальных помещений и подготовки персонала. Оснащение диагностической службы первичного медицинского звена БПТ ИммуноКомб H.PILORI IGG позволит своевременно и достоверно поставить диагноз и назначить адекватную медикаментозную терапию.

Где сдать анализ кала на Хеликобактер пилори

В Москве сделать стул-тест на выявление Хеликобактера можно и в частных медицинских центрах, и в государственных поликлиниках. Где сдать анализ (Хеликобактер пилори) кала в столице, если выбор пал на частную клинику? К , МЦ в Марьино, «Столичная медицинская клиника», клиника «Столица», «Семейный МЦ», «Парацельс», «Добрый Доктор», «Медикал Он Груп», «Клиника экспертных медицинских технологий», «АВС Медицина», «Прима Медика», «Эдем», Андреевские больницы, «К+31» и так далее.

Как сдавать анализ на Хеликобактер пилори, подскажет врач-гастроэнтеролог в поликлинике. Пройти консультацию можно и в любой частной клинике, но из соображений экономии лучше, конечно, сдавать анализ и в любой государственной – метод не инновационный, так что специальное оборудование не понадобится, а квалифицированные врачи есть и в районных поликлиниках.

Что касается стоимости, исследование обойдется в 500-4000 рублей. Самые дорогие клиники: «Столица» на Летчика Бабушкина, МЦ на Боткинском, «Столица» на Арбате. Дешевле всего в «АВС Медицина», «Доктор Озон», «Добрый Доктор».

Как правильно сдать анализ на Хеликобактер пилори? Немного изменить рацион за несколько дней до исследования, отказаться от алкоголя и некоторых медицинских препаратов. Сбор материала нужно проводить в чистую емкость, специальные медицинские наборы для анализа кала можно приобрести в аптеках.

Когда сдавать анализы после лечения Хеликобактер пилори? Повторное исследование можно провести через 3 недели после окончания курса терапии. Конкретные рекомендации даст лечащий врач.

13С/14С-уреазный дыхательный тест

УДТ также основан на выявлении уреазной активности НР. В присутствии НР происходит гидролиз принятого per os раствора мочевины, меченного изотопом углерода (13C или 14C). Углекислый газ (13CO2 или 14CO2) поступает в кровь и, в конечном итоге, выделяется через легкие в выдыхаемом воздухе. Пробы воздуха берутся исходно и через определенное время (при использовании 13C-мочевины – через 30 мин) после приема тестового раствора. Прирост меченого CO2 выражается как дельта по сравнению с исходным значением (DOB). Обычно в качестве критерия присутствия инфекции HР используют DOB >2,0‰. Показано, что значение DOB положительно коррелирует с бактериальной нагрузкой HР [30]. Чувствительность 13C-УДТ составляет 96%, специфичность – 93% [31].

Изначально УДТ разработан с использованием мочевины, меченной слабо радиоактивным изотопом 14С, однако в настоящее время он практически полностью заменен на тест с мочевиной, меченной стабильным не радиоактивным изотопом 13С [31]. 13C-УДТ предпочтительнее 14C-УДТ, поскольку позволяет избежать даже минимального воздействия радиации. Однако меньшая стоимость теста и оборудования обеспечивает популярность 14C-УДТ в развивающихся странах. Точность диагностики 13C-УДТ и 14C-УДТ не отличается, и оба теста можно считать «золотым стандартом» среди неинвазивных методов диагностики HР [32]. Ложноположительные результаты редки, но могут наблюдаться после выполнения ЭГДС с биопсией непосредственно перед тестом, у больных, перенесших резекцию желудка, а также при значительном снижении секреции желудка.

УДТ также основан на выявлении уреазной активности НР. В присутствии НР происходит гидролиз принятого per os раствора мочевины, меченного изотопом углерода (13C или 14C)

Небольшое количество ложноотрицательных результатов может быть связано с нарушением методики взятия и хранения проб выдыхаемого воздуха, физической нагрузкой накануне и в процессе выполнения теста. Как и при большинстве других тестов, достоверный результат УДТ может быть получен после 2-недельной отмены ИПП и не ранее чем через 4 нед после прекращения приема антибиотиков и препаратов висмута. Консенсус Маастрихт V оценивает УДТ с меченой мочевиной как лучший способ диагностики НР с высокой чувствительностью и специфичностью и с отличной производительностью как для первичной диагностики инфекции, так и для оценки эффективности эрадикации [10].

В России получил распространение дыхательный тест с немеченой мочевиной («Хелик-тест»). Результаты открытого многоцентрового исследования эффективности дыхательных тестов продемонстрировали его недостаточную чувствительность (78%) и низкую специфичность (62%) [33]. Авторы другого исследования «Хелик-теста» отметили, что низкая специфичность NH3-уреазных тестов и, как следствие, высокая частота ложноположительных результатов не допускают их использование для первичной диагностики инфекции и контроля эффективности эрадикации НР [34].

Дыхательный уреазный Хелик-тест

Дыхательный анализ основан на том, что бактерия продуцирует специальные ферменты, которые можно определить при выдыхании. Как сдавать анализ на Хеликобактер пилори? Пациенту предлагают подышать через трубку, которая находится глубоко во рту. Время от времени врач напоминает сглатывать слюну, чтобы не испортить результаты анализа. Как правило, берутся две пробы выдыхаемого воздуха.

Основными преимуществами такого теста являются его высокая результативность, относительная безопасность исследования и удобство для пациента. Время проведения теста не превышает 40 минут.

Общая информация о методах исследования H. pylori

Существует несколько методов выявления H. pylori. Прямые методы позволяют непосредственно выявить сам микроорганизм. Для большинства прямых методов необходим образец ткани слизистой оболочки (биоптат) и/или содержимое желудка и двенадцатиперстной кишки (аспират), которые обычно получают во время эндоскопического исследования. Таким образом, прямые методы исследования, как правило, являются инвазивными. В отличие от этого, непрямые методы выявляют не сам микроорганизм, а косвенные признаки инфекции, например специфические антитела в сыворотке крови (серологические тесты) или содержание меченого атома углерода в выдыхаемом воздухе (дыхательный уреазный тест). Так как для проведения непрямых тестов не требуется эндоскопического исследования, они называются неинвазивными. Как прямые, так и непрямые тесты на H. pylori, имеют свои преимущества и недостатки. Для точной диагностики геликобактериоза требуется сразу несколько тестов. В связи с этим особенно удобным для врача и пациента является комплексный анализ, включающий все необходимые тесты на H. pylori.

Одним из самых чувствительных методов выявления H. pylori является полимеразная цепная реакция в режиме реального времени (РТ-ПЦР). РТ-ПЦР – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в образце ткани) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. Так как анализ основан на выявлении генетического материала, РТ-ПЦР позволяет выявлять присутствие любых форм H. pylori (не только активных спиралевидных, но и неактивных кокковых, некультивируемых), в результате чего исследование характеризуется очень высокой чувствительностью, превосходящей чувствительность метода бактериологического посева.

Теоретически для осуществления РТ-ПЦР достаточно присутствие 1 молекулы ДНК. На практике концентрация возбудителя в образце должна составлять около 10-100 КОЕ/мл. Такая высокая чувствительность теста означает, что получение отрицательного результата исследования позволяет исключить H. pylori как причину заболевания. Это имеет принципиальное значение при дифференциальной диагностике НПВС-ассоциированных, стрессовых и ишемических гастритов и язв.

Следует отметить, что, несмотря на очень высокую чувствительность теста (85-98 %), ложноотрицательные результаты все же возможны. Так, например, ложноотрицательный результат может быть получен, если бактериальная нагрузка очень низкая (например, на фоне приема некоторых антибиотиков). Ошибок диагностики можно избежать при комбинации этого прямого теста с серологическими исследованиями.

Инфицирование H. pylori сопровождается значительным нарастанием иммуноглобулинов класса IgG и IgA в сыворотке крови

Инфицирование H. pylori сопровождается значительным нарастанием иммуноглобулинов класса IgG и IgA в сыворотке крови. Эти иммуноглобулины (антитела) определяются в крови с помощью непрямых тестов. IgG обнаруживаются в 95-100 % случаев геликобактериоза, а IgA – в 68-80 %. Исследование позволяет определить титр антител, то есть является количественным. Как правило, высокие титры антител более характерны для активной, текущей инфекции. Следует отметить, однако, что четкой корреляции между титром антител и степенью тяжести инфекции нет.

Серологические тесты, как и метод РТ-ПЦР, имеют некоторые ограничения. Так, результат анализа зависит от особенностей иммунного ответа пациента. Иммунный ответ пациентов, принимающих цитостатические препараты, и пожилых людей характеризуется пониженной выработкой специфических антител (любых, в том числе к H. pylori). По этой причине во избежание диагностических ошибок серологические тесты целесообразно дополнять прямыми тестами. Эта особенность была учтена при составлении комплексного анализа на H. pylori.

Таким образом, комплексный анализ на H. pylori – это комбинация необходимых и достаточных тестов для выявления этого микроорганизма. Комплексный анализ не предназначен для контроля лечения. Результат как РТ-ПЦР, так и исследования иммуноглобулинов IgG и IgA будет оставаться положительными даже в случае полной эрадикации H. pylori. Ложноположительный результат РТ-ПЦР в этом случае обусловлен способностью этого метода выявлять ДНК любых, даже разрушенных микроорганизмов, ложноположительный результат серологических тестов − особенностями динамики иммунного ответа.

Рекомендации по подготовке к тесту

Как сдать анализ на Хеликобактер пилори? Подготовка к дыхательному тесту требуется серьезная. Во-первых, следует несколько видоизменить рацион накануне исследования:

• исключить бобовые, черный хлеб, капусту и яблоки (продукты, которые могут вызвать повышенное газообразование в пищеварительном тракте);
• отказаться от алкогольных напитков, в день проведения исследования – от жевательной резинки и сигарет;
• не употреблять жидкость за час до анализа;
• допускается только ранний и легкий ужин, после 10 часов вечера в день накануне теста кушать уже нельзя;
• утром перед анализом нужно почистить зубы и прополоскать рот чистой водой, использовать освежители и ополаскиватели для полости рта нельзя;
• лечащего врача нужно проинформировать обо всех медикаментах, которые пациент принимал за 2-3 дня до теста.

Что показывает гистологическое исследование биопсии

При воспалении резко увеличивается инфильтрация в полость лейкоцитов – гноя. На поверхности эпителия различают мелкие фолликулы и лимфоидные агрегаты. При сильном увеличении видны клетки хеликобактер пилори как в слизи, так и на срезе в пробе биопсии. В наблюдении медикам помогает стандартное окрашивание гематоксилином и эозином. Однако это не идентифицирует бактерию.

Красители Ворфина-Стэрри

В этом случае применяются красители Ворфина-Стэрри или Гимса. В некоторых ситуациях помогают тройные составы. Используется краситель Гента из нитрата уранила, в сочетании с микроволновой печью медики вводят нитрат свинца. Подогрев снижает время приобретения нужного оттенка до 28 минут. Доказано, что это промежуток сокращается как минимум втрое.

Ожидаемые результаты получаются с красителями Гента и Эль-Цимати. Диф-Квик – недорогая альтернатива. В сомнительных ситуациях, когда ведётся проверка о диагнозе рекомендуется использовать краситель Эль-Цимати. Это способ обнаружить хеликобактер на эпителии 12-перстной кишки. Некорректный подбор красителей часто приводит к постановке отрицательных диагнозов.

Эксперты советуют брать 2 пробы биопсии из антральной области и столько же – из тела желудка. Микроорганизмы преимущественно сосредоточены в приповерхностном слое. Ложные отрицательные результаты возникают в нескольких случаях:

• Области метаплазии.
• Атрофированные участки слизистой.
• Приём ингибиторов протонной помпы, либо антибиотиков.