Мазок ПЦР у женщин: как готовиться, как берут ПЦР у женщин.

ПЦР мазок позволяет определить наличие возбудителя инфекции в организме человека. Чаще всего исследуют выделения человека на предмет хламидий и иных возбудителей венерических заболеваний, передающихся через половые контакты. Точность диагностики довольно высокая, однако, иногда бывают погрешности в определении ДНК возбудителя. С чем это связано, рассмотрим в статье.

Что представляет собой данный анализ

Метод ПЦР применяется не только в медицине. Его используют в археологии, генетике, криминалистике. Разработчиком этого вида диагностики является американский химик Кэри Мюллис – лауреат Нобелевской премии. Кстати, самую престижную международную награду он получил за открытие метода ПЦР.

Благодаря полимеразной цепной реакции у ученых появилась возможность определять сходство ДНК, устанавливать отцовство и родственные связи. И все же основным предназначением мазка методом ПЦР принято считать диагностику инфекционных заболеваний у человека.

Полимеразная цепная реакция представляет собой высокоточный способ молекулярно-генетического исследования, проведение которого позволяет выявлять вирусные, генетические и наследственные патологии. Преимущество данной методики заключается в возможности определения болезнетворных агентов не только на острой или хронической стадии заболевания, но и в инкубационный период, то есть до того, как проявятся первые симптомы патологии.

Мазок на ПЦР никогда не дает ложноположительного ответа. Этим и отличается данный метод диагностики от других. Если инфекции в организме нет, пациент не получит положительный результат – в этом можно не сомневаться. Сегодня анализ на полимеразную цепную реакцию сдают с целью определить тип возбудителя и его количество.

Мазок на бактериологический посев у женщин

Анализ представляет собой посев выделений у женщин на питательные среды.

После образования колоний микроорганизмов лаборант может определить разновидность патогена.

Результаты исследования готовятся несколько дней, что представляет некоторые неудобства для врача и пациентки.

Какие инфекции у женщин можно выявить, сделав анализ на бакпосев?

Бактериологический посев проводится только для выявления бактериальной микрофлоры.

Вероятность ошибки практически отсутствует.

Определить вирусы или грибки данным способом нельзя.

Достоинства ПЦР

Ни один из методов исследования не способен найти возбудителя непосредственно в гене, содержащемся в исследуемых материалах. ПЦР – это максимально точный и достоверный анализ на венерические заболевания и латентные вирусы в организме. В отличие от иных способов диагностики, анализ полимерной цепной реакции имеет ряд преимуществ:

он нацелен на обнаружение возбудителя инфекции;
является универсальным, поскольку позволяет выявлять сразу несколько типов инфекционных агентов;
при этом достаточно использования только одного биологического образца пациента;
обладает сверхчувствительностью, за счет чего вероятность возможных перекрестных реакций равняется нулю.

В сравнении с методом бактериологического посева, мазок на ПЦР считается самым надежным и быстрым диагностическим способом. Сама процедура лабораторной диагностики не занимает более четырех часов. Для получения результата бакпосева требуется не менее семи дней. Суть этого метода состоит в следующем: образец биоматериала помещают в благоприятную среду и наблюдают за активностью возбудителей, если таковые обнаруживаются, на протяжении всего периода исследования.

Этапы исследования

Анализ влагалищного секрета женщины осуществляется в оборудованной лаборатории.

Сначала проводится окраска мазка способом Грамма.

Для окрашивания используется метиленовая синь. Этот процесс способствует наиболее быстрому разделению бактерий по разновидностям.

Следующим шагом лаборант должен осуществить подсчет каждого типа клеток.

Оценивается количество лейкоцитов и степень чистоты влагалищного секрета.

В государственной клинике длительность изучения материала может достигать семи дней, в платных учреждениях результат анализа можно получить уже на следующий день.

Для выявления каких инфекций подходит ПЦР

Анализ мазка на ПЦР способен раскрыть любое количество инфекционных возбудителей в организме, включая «скрытые» вирусы, не проявляющие себя никакой симптоматикой в течение длительного времени. Этот диагностический метод применяют тогда, когда необходимо подтвердить или опровергнуть наличие у пациента:

вирусного гепатита;
уреаплазмоза;
хламидиоза половых путей;
вируса папилломы человека;
герпеса;
злокачественных клеток;
микоплазмоза;
вагиноза;
мононуклеоза;
трихомониаза;
ВИЧ-инфекции.

В качестве исследуемого материала для анализа на ПЦР используют кровь, слюну, мокроту, мочу. Перед процедурой взятия соскоба пациенту необходимо подготовиться к нему. О том, как подготовиться перед анализом ПЦР-мазка, пациенту сообщит лечащий врач. Как правило, специалисты проводят с больными соответствующую консультацию. Например, кровь сдают натощак, а непосредственно перед соскобом шейки матки нежелательно проводить гигиенические процедуры.

Когда обследоваться?

Многие представительницы прекрасного пола пренебрегают регулярными обследованиями у гинеколога и сдачей анализов на венерические инфекции, считая, что если никаких симптомов, то и волноваться не о чем. Такой подход нельзя назвать правильным.

Большинство ИППП протекают без каких-либо проявлений или характеризуются скудной клинической симптоматикой, которую часто списывают на усталость, переохлаждение, неподходящие средства гигиены и другие несущественные причины.

Вместе с этим, нелеченые хронические воспалительные процессы могут привести ко множеству проблем: нарушениям цикла, снижению полового влечения, дискомфорте при половом акте, бесплодию, невынашиванию беременности. Некоторые из ИППП, такие как папилломавирус человека, и вовсе приводят к появлению бородавок и повышают риск развития рака шейки матки.

Регулярные обследования нужны не только тем, кто ведет беспорядочную половую жизнь, ведь заразиться ИППП можно и от постоянного партнера, при случайной однократной половой связи, а также, в некоторых случаях, бытовым путем.

Обязательно сдать анализы нужно в следующих случаях:

При активной сексуальной жизни (независимо от количества партнеров и методов контрацепции) — 1-2 раза в год.
При незащищенном половом акте (классическом, оральном и других видах) со случайным партнером необходимо как можно скорее пройти полный комплекс обследования. Некоторые из анализов следует повторять через 1,3 и 6 месяцев после первого визита к врачу.
Перед началом новых отношений и при вступлении брак. Проверка репродуктивной системы и сдача анализов на ИППП не показатель недоверия, а признак заботы о собственном здоровье и здоровье и благополучии партнера.
На этапе планирования ребенка анализы на венерические инфекции в обязательном порядке следует сдать как будущей матери, так и отцу.

Обязательно сходить к врачу и сдать анализ нужно при наличии жалоб: зуд, жжение, патологические выделения, неприятный запах, нарушения мочеиспускания, боль при половом акте, невозможность зачать или выносить ребенка.

Также тест на ИППП нужен для контроля над проведенным лечением венерических инфекций и перед плановыми обширными операциями (в особенности хирургические вмешательства на сердце, легких, органах брюшной полости, пересадка органов и костного мозга).

Образцы для исследований

Материалом для ПЦР-анализа могут быть практически любые биологические жидкости человека. Чужеродные ДНК болезнетворных микроорганизмов способны проникать в любую среду. Чаще всего в качестве образца для исследований применяется кровь и ее отдельные компоненты (плазма или сыворотка). В жидкой ткани могут присутствовать РНК вирусного гепатита, простого герпеса, цитомегаловируса, ВИЧ.

Широкие показания к исследованию имеют биологические жидкости. К ним относятся:

сок простаты;
сперма;
вагинальный секрет;
спинномозговая (ликвор);
амниотическая;
бронхоальвеолярный лаваж;
суставная жидкость;
слюна.

Для диагностики венерических заболеваний типа гонореи, хламидиоза, микоплазмоза, уреаплазмоза, трихомониаза, гарднереллеза, герпетических форм и др., у пациентов берут эпителиальные соскобы со слизистых оболочек. У мужчин берут мазок ПЦР из уретры, а у женщин – из влагалища или шейки матки.

Отдельная категория – биоптаты. Чаще всего биоптаты исследуют с целью определения природы новообразования, подтверждения его злокачественности. Биоптаты желудка и двенадцатиперстной кишки требуются для выявления бактерии Хеликобактер пилори и ее количественной нагрузки.

Моча как биоматериал используется при инфекционных поражениях мочевыделительной системы. У мужчин мазок ПЦР нередко заменяют исследованием мочи, поскольку уретра у представителей сильного пола является универсальным элементом мочеполового тракта.

Для диагностики туберкулеза и обструктивных болезней легких исследуется мокрота. Материал могут собирать в стерильный флакон (15-20 мл) или брать мазок из зева. ПЦР-анализ также используют для выявления осложненных форм микоплазмоза и хламидиоза – при отсутствии лечения и других неблагоприятных факторов данные виды инфекции способны поражать респираторную систему человека.

Что такое скрытые инфекции

Список таких исследований для каждой женщины свой.

Доктор выбирает, какие анализы ей надо сдать по результатам осмотра и проведенного опроса:

наличие случайных половых отношений с партнерами, инфицированными ЗППП
при имеющихся симптомах и предъявляемых пациенткой жалобах
по полученным результатам анализа мазка на флору

На скрытые инфекции показаны исследования, когда:

анализ результатов мазка выявил признаки воспаления, но микроорганизмы в выделениях не диагностируются
у женщины отсутствуют признаки патологии или симптоматика, характерная для ИППП слабо выражена
если диагностировано венерическое заболевание. Как правило, часто у таких пациентов могут обнаруживаться и другие половые инфекции, симптомы которых отсутствуют или проявляются сходными признаками.

Скрытые инфекции несут в себе определенную опасность, даже если никак о себе не заявили:

оказывают негативное воздействие на структуру урогенитального тракта, в результате чего нарушается деятельность органов мочеполовой системы
повышается риск развития бесплодия
больная пациентка является распространителем заболевания, особенно для полового партнера

Как сдавать на ПЦР биологические жидкости: общие правила

Способ подготовки зависит от того, какой именно биоматериал необходимо сдать на исследование:

Если для анализа требуется образец слюны, то процедуру проводят натощак. За несколько часов до исследования нельзя принимать лекарственные препараты. Кроме того, нежелательно пить много жидкости, тем более горячей, чтобы не нарушить естественный состав микрофлоры ротовой полости.
Мочу для ПЦР необходимо собирать с утра. Для этого необходимо подготовить стерильный контейнер и тщательно подмыться. Материал не должен содержать посторонних примесей, поэтому мужчинам во время мочеиспускания необходимо оттянуть крайнюю плоть, а женщинам – закрыть влагалище ватным тампоном.
За три дня до сдачи спермы мужчине необходимо отказаться от сексуальных контактов. В период подготовки нежелательно посещать баню, принимать горячую ванну, употреблять алкоголь, острые блюда. Перед сбором биоматериала нельзя мочиться, поэтому за сутки до анализа желательно ограничить потребление жидкости.
Кровь, как уже было отмечено, сдавать нужно с утра, натощак. За 2-3 дня до анализа желательно отказаться от жирной пищи, алкоголя и сильнодействующих медикаментов.

Как сдавать и через сколько готов результат

Как сдавать и через сколько готов результат
Большинство посетителей клиники испытывает лёгкий страх перед тем, как сдавать анализы. Процедура является полностью безопасной и безболезненной, количество осложнений при её проведении стремится к нулю.

Забор для лабораторной диагностики проводится по предварительной записи, ведь к визиту врача необходимо подготовиться. Легче всего подготовиться к анализу крови, никаких ограничений здесь нет.

Сдача крови осуществляется натощак, забор материала происходит из вены в объеме до 10 мл. Мазок методом ПЦР делают со слизистых шейки матки (из цервикального канала), уретры и влагалища.

Каждое предметное стекло маркируется в зависимости от отдела, откуда брали материал, латинскими буквами C, V, U и направляется в лабораторию. Сколько будет готовиться результат во многом зависит от лаборатории и её загруженности. В среднем, срок составляет двое суток. В экстренных случаях время выполнения может сократиться до нескольких часов.

Показания для соскоба у женщин

При подозрении на то или иное заболевание, передающееся половым путем, врач может назначить женщине мазок на ПЦР. В лабораториях, которые относятся к бюджетным поликлиникам, такие анализы обычно не делают. Прежде чем выбирать место для исследования, необходимо убедиться, что там проводят необходимую диагностику.

Большинство из тех заболеваний, которые передаются половым путем, могут не проявлять себя в течение нескольких месяцев, поэтому отсутствие симптомов не является гарантией того, что девушка не заражена. Будучи носителем инфекции и не догадываясь о болезни, женщина может не только заразить партнера, но и упустить время для успешного лечения. Венерические заболевания могут приводить к бесплодию, воспалению органов малого таза и прочим осложнениям.

Мазок ПЦР на инфекцию назначается женщине в том случае, если имел место контакт с малознакомым партнером. Если венерический статус последнего неизвестен, значит, присутствует риск инфицирования. Сдача мазка на ПЦР целесообразна в случае, если:

женщина сомневается в «чистоте» своего нового партнера, так как во время полового акта не использовался презерватив;
в течение года у женщины было несколько половых партнеров;
у пациентки ранее было выявлено венерическое заболевание;
наступила беременность.

Обследование на половые инфекции является обязательным для будущих матерей, поскольку некоторые из них, даже если протекают скрыто и не дают о себе знать, могут нести серьезную опасность жизни и здоровью плода.

ПЦР мазок на ИППП

Как правильно сдать мазок на ИППП (хламидии, микоплазмы, уреаплазмы)? Возбудители половых инфекций относятся к скрытым — они не проявляют себя при других анализах, обнаружить их очень тяжело. Как берут выделения для лабораторной диагностики?

Чтобы получить точность анализа при исследовании, необходимо сдать мазок правильно:

ПЦР мазок из уретры берут у мужчин;
у женщин мазок на ИППП берут из выделений влагалища, мочевого канальчика или шейки матки;
нельзя брать мазок во время критических женских дней;
после интенсивного курса антибиотиков следует подождать 3 недели, потом сдавать анализы;
перед забором слизи из половых органов нельзя мочиться (после последнего опорожнения должно пройти не менее трех часов);
недопустимо использовать душистые моющие средства для подмывания половых органов перед сдачей анализов;
более достоверный результат можно получить при заборе выделений перед критическими днями либо сразу после их завершения;
недопустимо применять вагинальные свечи или спринцевание в день забора выделений.

Является ли процедура забора болезненной? Не следует опасаться мазка на диагностику — биоматериал берут медицинским зондом в малом объеме без повреждения поверхности слизистой оболочки. После забора выделения помещают в транспортировочную жидкость для хранения.

Важно! Забор слизи из уретры может спровоцировать дискомфорт в течение некоторого времени — жжение при выделении урины.

Процедура взятия мазка

Соскоб у женщин берет врач-гинеколог. Сама процедура взятия соскоба на полимеразную цепную реакцию ничем не отличается от обычного гинекологического исследования на влагалищную флору. Процедура взятия мазка ПЦР на хламидии, трихомониаз, вирус папилломы человека, гонорею и другие половые инфекции происходит по стандартной схеме:

Пациентка подготавливается к процедуре и занимает место на гинекологическом кресле.
Для сбора материала гинеколог надевает одноразовые стерильные перчатки и производит осмотр наружных половых органов.
Далее во влагалище женщины вводят специальный расширитель, который позволяет с помощью зеркала осмотреть внутренний эпителий.
Для забора биоматериала используется специальная щетка, которая не обладает впитывающими свойствами и не способна повредить слизистые оболочки. С ее помощью берут соскоб с цервикального канала, стенок влагалища. Обыкновенная ватная палочка для этой цели не подходит.
Использованный медицинский прибор, содержащий вагинальный секрет, вставляют в пробирку, закрывают и отправляют в лабораторию.

Процедура взятия соскоба обычно безболезненна, но иногда пациентки испытывают неприятные ощущения из-за контакта чувствительной слизистой с гинекологическими инструментами. Боль в процессе забора биоматериала может свидетельствовать о протекающем воспалительном процессе.

Методика взятия анализов на инфекции у женщин

Взятие мазка из урогенитального тракта осуществляется врачом.

Для забора биоматериала применяют стерильный шпатель или ватный тампон.

Во время осмотра пациентки в гинекологическом кресле берутся мазки на микрофлору, для бакпосева или ПЦР-диагностики.

Метод исследования выбирает врач.

Забор крови делается из вены, желательно натощак с утра.

Биоматериал берется для серологических реакций, ИФА или ПЦР.

Моча для исследования на наличие инфекции собирается в стерильную баночку, чтобы не допустить попадания в биоматериал посторонней микрофлоры.

Исследование проводится методом ПЦР, но не исключается и бакпосев.

Подготовка женщин к сдаче мазка

Вступать в интимную связь перед процедурой нельзя – после последнего контакта должно пройти не менее двух суток.
Если женщина проходит лечение антибиотиками или применяет вагинальные суппозитории, за три недели до взятия мазка ПЦР курс терапии необходимо завершить. В противном случае результат анализа может оказаться ложным.
Во время менструации мазок не берут.
Непосредственно перед забором биоматериала нельзя спринцеваться или использовать антибактериальное мыло.
Перед процедурой нельзя посещать туалет, последний раз помочиться можно за три часа до процедуры.

Как женщине подготовиться к анализам на инфекции

Ни один вид исследования женского мазка не может гарантировать стопроцентный результат.

В любом случае высок риск получения ложноположительных или ложноотрицательных результатов.

Часто причиной тому служит неправильная подготовка к сдаче анализов, либо нарушение правил взятия и транспортировки биоматериала.

Чтобы получить достоверные результаты необходимо соблюдение нескольких условий.

Перед тем, как сдать анализ на инфекции, женщине надо будет:

Отказаться от секса, как минимум, на пару суток.
Не посещать туалет перед взятием мазка, чтобы не смыть мочой патогенную микрофлору, хотя бы в течение 2-3 часов.
Исключить влагалищные процедуры с применением антибиотиков и антисептиков накануне похода к гинекологу.
Как минимум в течение семи дней не принимать антибактериальные препараты внутрь и не использовать местное лечение.

Особенности подготовки и проведения процедуры у мужчин

Как уже было сказано, мазок ПЦР у мужчин берут из мочеиспускательного канала. Чтобы получить необходимый биоматериал, врач-уролог использует специальный тонкий зонд и вводит его на глубину 3-4 см. Процесс взятия мазка ПЦР на уреаплазму, гонорею и другие распространенные возбудители может принести боль и значительный дискомфорт. Но придется потерпеть. Нередко у мужчин мазок на ПЦР вызывает жжение и зуд, поэтому перед введением зонда с целью уменьшить дискомфортные ощущения пациентам рекомендуют массажировать уретру. Поэтапно процедура взятия соскоба выглядит так:

Мужчина освобождает половые органы от одежды.
Прежде чем вводить зонд в уретру, врач надевает одноразовые перчатки и осуществляет визуальный осмотр кожных покровов, слизистых оболочек на предмет высыпаний.
Затем с помощью инструмента уролог берет мазок методом ПЦР из мочеиспускательного канала. Зонд вводится на 3-4 см в глубину уретры и несколько раз прокручивается.
После извлечения зонда врач делает мазок на предметном стекле, которое впоследствии и отправит в лабораторию.

Помимо болезненных ощущений, процедура взятия соскоба вызывает у мужчин психологический дискомфорт. У тех, кто посещает уролога регулярно, подобных проблем не возникает. Кроме того, имеет значение правильная подготовка к мазку ПЦР. Она заключается в соблюдении следующих условий:

За несколько дней до анализа мужчине нужно отказаться от интимных связей.
Мазок берут в утренние часы.
Перед процедурой мужчине не нужно проводить гигиену половых органов, лучше всего принять душ с вечера.
За три часа до взятия образца биоматериала нельзя посещать туалет.

Так же, как и у женщин, сильнодействующие препараты могут исказить результат анализа на полимеразную цепную реакцию.

В каких случаях дают направление

В каких случаях дают направление
Этот вид исследования имеет сверхчувствительность и позволяет быстро получить результаты, что сделало ПЦР в гинекологии неотъемлемой частью диагностики в гинекологии. Врачи-урологи тоже часто прибегают к нему для постановки диагноза у мужчин.

Мазок ПЦР у женщин и мужчин выявляет:

наличие скрытых инфекций, передаваемых половым путём: хламидиоз, уреаплазмоз, микоплазмоз, трихомониаз, вирус герпеса, в том числе его онкогенные штаммы;
ВИЧ;
вирусы гепатита A , B, C, D;
вирусы краснухи, кори, паротита;
вирус Эбштейна — Барр и цитомегаловирус;
вирус папилломы человека;

Направление на обследование врач акушер-гинеколог даёт в следующих ситуациях:

планирование беременности;
тяжелое течение беременности, выкидыши в анамнезе
острая мочеполовая инфекция во время беременности или обострение уже имеющегося хронического заболевания;
незащищенный половой акт или наличие нескольких половых партнёров в течение последних 36 месяцев;
при подозрении на наличие ИППП у женщин, когда другие методы обследования никаких патологических изменений не выявили;

Мазок на ДНК-исследование берут из цервикального канала, заднего свода влагалища и уретры специальной щёточкой, которая не травмирует слизистые оболочки. Для получения точного результата важно, на какой день цикла вы пришли сдавать мазок на инфекции. Гинеколог заранее обговаривает, что на момент визита менструальные кровотечения должны закончиться, лучше всего сдавать анализ во второй половине менструального цикла.

После забора материала на ИППП у женщин, что в среднем составляет три минуты, весь собранный материал переносится в пробирку и помещается в специальный аппарат (амплификатор). Суть его работы состоит в нахождении участков генетического кода патологического агента и их копировании, дальнейшей идентификации, обработке информации и выдаче уже готовых результатов. Стоит отметить, что ещё один из плюсов — это возможность комплексной диагностики: при проведении теста может быть обнаружено несколько патологических агентов.

Как расшифровываются анализы на ПЦР

В принципе для того, чтобы разобраться в результатах лабораторного исследования на полимеразную цепную реакцию, не нужно обладать медицинским образованием. Расшифровать заключение экспертов достаточно просто. В ответах, которые выдают пациенту на руки, содержится информация о типе инфекции. Если возбудитель обнаружен, в заключении будет отмечен положительный результат. Он свидетельствует о наличии в организме исследуемого человека ДНК или РНК вируса.

Для эффективного лечения некоторых заболеваний необходимо иметь точные данные о количественной нагрузке, которая означает присутствие РНК-копий возбудителя на 1 мл крови. В большей степени определение количественной нагрузки важно при болезнях, спровоцированных условно-патогенной микрофлорой, поскольку инфекционные агенты активизируются и негативно воздействуют на организм человека только в том случае, если их количество превышает установленные пороги. Такой анализ ПЦР имеет особое значение для составления плана лечения и наблюдением за динамикой пациентов, инфицированных вирусным гепатитом или ВИЧ-инфекцией.

Расшифровка результата

ПЦР бывает качественным и количественным. Качественный показывает, обнаружен или нет генетический материал микроорганизма. В бланке ответа это выглядит следующим образом:

РНК/ДНК обнаружена;
РНК/ДНК не обнаружена.

Количественный метод исследования возможен только в том случае, если микроорганизм есть. Тогда в бланке ответа пишется, сколько копий РНК или ДНК было найдено в единице исследуемого материала. Например — обнаружена ДНК количеством 1000 копий на мл. Количественный результат нужен для определения степени тяжести заболевания.

Как долго ждать ответ

Исследования на ПЦР отличаются максимальной точностью, специфичностью и чувствительностью. Мазок на полимеразную цепную реакцию позволяет узнать, есть ли в организме обследуемого конкретный тип инфекции, определить ее штамм и количество РНК-копий. Метод ПЦР позволяет выявлять возбудителя даже при минимальном содержании ДНК вируса в представленных образцах биоматериала.

Сроки выполнения анализа во многом зависят от того, какой из существующих методов полимеразной цепной реакции применяется в конкретной лаборатории. Самым простым способом изучения биологического материала считается микроскопический. Обычно этот метод исследования не занимает много времени. За срочность пациентам приходится платить дополнительно, но если по каким-либо причинам есть необходимость в проведении экстренного исследования, результаты могут выдать пациенту на руки спустя час. Быстрее всего ответы анализов получают те, кто обращается в специализированные медучреждения, оснащенные собственной лабораторией. Иначе необходимо учитывать время, которое будет потрачено на доставку биоматериала.

Диагностика скрытых инфекций

Обследование на наличие скрытых инфекций позволяет диагностировать патологию при отсутствии симптомов.

Основной метод исследования на скрытые инфекции – это ПЦР.

Анализ позволяет идентифицировать наличие нескольких патогенов одновременно.

Но, ограниченность исследования связана с тем, что у него достаточно высокая цена.

Стоимость идентификации одного патогена составляет от 300 рублей и выше.

ПЦР-диагностика относится к высокочувствительным методам и обладает высокой эффективностью.

Особенность методики в том, что облегчается диагностика заболевания даже, когда процесс еще находится в стадии инкубационного периода.

При этом концентрация ДНК патогенов еще сравнительно низкая и другими методами обнаружение инфекции невозможно.

Цены на мазок ПЦР в Москве

Конечная стоимость анализа будет зависеть от того, на какую инфекцию необходимо проверить пациента. В Москве на лабораторные исследования методом ПЦР установлены такие цены:

заболевания, передающиеся половым путем – анализ выполняется в среднем за 1-2 дня, стоимость составляет 300-500 руб. (за обнаружение одного возбудителя);
такие же сроки и цены установлены на диагностику методом ПЦР вируса Эпштейна-Барра, папилломы человека, герпеса, цитомегаловирусной инфекции;
обследование на гепатит A, B, C, D, G обойдется пациенту в 650-800 руб., за уточнение количественной нагрузки придется заплатить еще 2000 руб. (на выполнение исследования потребуется 4-5 дней);
подтверждение наличия в желудочном или кишечном биоптате бактерии Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori) – 400-600 руб.;
антитела и антигены ВИЧ— 400-500 руб.;
количество РНК ВИЧ в образцах крови – более 10 тыс. руб.

С целью экономии врачи рекомендуют выбирать пакеты анализов — такие исследования обходятся дешевле. Услуги со скидками предоставляются в большинстве сетевых клиник, где делают анализы по методу ПЦР («СМ-Клиника», «Инвитро», «ОН-Клиник») и многопрофильных медцентрах.

Если в мазке обнаружились патогенные возбудители, не нужно отчаиваться. Главное – это как можно скорее начать терапию. Сегодня существует немало препаратов, благодаря которым даже пациенты с неизлечимыми болезнями имеют все шансы на высокое качество и нормальную продолжительность жизни. Выбор тактики лечения должен осуществлять врач. Самолечение при инфекционных заболеваниях недопустимо.

Расшифровка женских анализов

Правильная интерпретация проведенного анализа мазка на флору является одной из задач специалиста.

Только врач, который занимается лечением женщины, сможет оценить достоверность анализа.

Поэтому, при трактовке результата доктор обращает внимание на следующие показатели:

Количество лейкоцитов. Если в женском мазке содержится количество лейкоцитов, превышающее нормальные показатели и много эпителиальных клеток, то это будет свидетельствовать о наличии воспаления. При выявлении в уретре повышенного показателя лейкоцитов делают вывод о развитии воспаления мочеиспускательного канала, если численность лейкоцитов превышает норму во влагалище – то это признак вагинита, в цервикальном канале – кольпита. Здесь речь может идти о воспалении, вызванном, как специфической микрофлорой, так и неспецифическими видами инфекции.
Есть ли эритроциты. Их наличие может указывать на повреждение микроскопических кровеносных сосудов.
На наличие слизи. Если ее много в мазке, то это сигнализирует о развитии патологического процесса.

Нормальным мазок считается, когда:

Анализ женского мазка может показать наличие эпителия. Если его мало, то вероятно у женщины снижен уровень эстрогенов. При значительном количестве эпителия возможно развитие воспалительного процесса.
В нем не обнаружены патогенные микроорганизмы.
Флора преимущественно палочковая.
Отсутствуют ключевые клетки.
Имеется небольшое количество слизи.
В единичных количествах могут присутствовать условно-патогенные микроорганизмы.

Обязательно при расшифровке анализа исследуемого урогенитального мазка учитывается наличие в нем патогенов: трихомонад, хламидий, гонококковой инфекции и др.

Если имеется патогенная микрофлора, то это подтверждает наличие инфекционного заболевания, которое требует безотлагательного лечения.

Исследование мазка – это один из самых распространенных способов изучения биоматериала, имеющий высокую диагностическую ценность.

Анализ позволяет установить наличие инфицирования даже в сомнительных случаях.

После того, как врачом сделана расшифровка мазка и у доктора имеются некоторые сомнения относительно патологий, передающихся половым путем, он обязан женщине предложить сделать дополнительные обследования, в том числе сдать анализ крови на скрытые инфекции, которые часто сопутствуют некоторым венерическим заболеваниям.

ПЦР: что это такое? Диагностика инфекционных заболеваний методом полимеразной цепной реакции

7656 10 Октября

ВАЖНО!

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.
В конце статьи см. словарь
Полимеразную цепную реакцию (ПЦР, PCR)
изобрёл в 1983 году Кэри Мюллис (американский учёный). Впоследствии он получил за это изобретение Нобелевскую премию. В настоящее время ПЦР-диагностика является, одним из самых точных и чувствительных методов диагностики инфекционных заболеваний.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
— экспериментальный метод молекулярной биологии, способ значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе). В основе метода ПЦР лежит многократное удвоение определённого участка ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro). В результате нарабатываются количества ДНК, достаточные для визуальной детекции. При этом происходит копирование только того участка, который удовлетворяет заданным условиям, и только в том случае, если он присутствует в исследуемом образце. Кроме простого увеличения числа копий ДНК (этот процесс называется амплификацией), ПЦР позволяет производить множество других манипуляций с генетическим материалом (введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК), и широко используется в биологической и медицинской практике, например, для диагностики заболеваний (наследственных, инфекционных), для установления отцовства, для клонирования генов, введения мутаций, выделения новых генов.

Специфичность и применение

ПЦР — метод молекулярной диагностики, ставший для ряда инфекций «золотым стандартом», проверен временем и тщательно апробирован клинически. Метод ПЦР позволяет определить наличие возбудителя заболевания, даже если в пробе присутствует всего несколько молекул ДНК возбудителя.

ПЦР позволяет диагностировать наличие долго растущих возбудителей, не прибегая к трудоёмким микробиологическим методам, что особенно актуально в гинекологии и урологии при диагностике урогенитальных инфекций, передающихся половым путем (ИППП). Также, этим методом проводят диагностику вирусных инфекций, таких как гепатиты, ВИЧ и др. Чувствительность метода значительно превосходит таковую у иммунохомических и микробиологических методов, а принцип метода позволяет диагностировать наличие инфекций со значительной антигенной изменчивостью. Специфичность ПЦР при использовании технологии PCR даже для всех вирусных, хламидийных, микоплазменных, уреаплазменных и большинства других бактериальных инфекций достигает 100%. Метод ПЦР позволяет выявлять даже единичные клетки бактерий или вирусов. ПЦР-диагностика обнаруживает наличие возбудителей инфекционных заболеваний в тех случаях, когда другими методами (иммунологическими, бактериологическими, микроскопическими) это сделать невозможно. Особенно эффективен метод ПЦР для диагностики трудно культивируемых, некультивируемых и скрыто существующих форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях, поскольку этот метод позволяет избежать сложностей, связанных с выращиванием таких микроорганизмов в лабораторных условиях. Применение ПЦР-диагностики также очень эффективно в отношении возбудителей с высокой антигенной изменчивостью и внутриклеточных паразитов. Методом ПЦР возможно выявление возбудителей не только в клиническом материале, полученном от больного, но и в материале, получаемом из объектов внешней среды (вода, почва и т. д.). В урологической и гинекологической практике — для выявления хламидиоза, уреаплазмоза, гонореи, герпеса, гарднереллёза, микоплазменной инфекции, ВПЧ — вирусов папилломы человека; в пульмонологии — для дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных пневмоний, туберкулёза; в гастроэнтерологии — для выявления хеликобактериоза; в клинике инфекционных заболеваний — в качестве экспресс-метода диагностики сальмонеллёза, дифтерии, вирусных гепатитов В, С и G; в гематологии — для выявления цитомегаловирусной инфекции, онковирусов. Специфичность ПЦР основана на образовании комплементарных комплексов между матрицей и праймерами — короткими синтетическими олигонуклеотидами длиной 18 — 30 букв. Каждый из праймеров сопоставим (комплементарен) с одной из цепей двуцепочечной матрицы, обрамляя начало и конец амплифицируемого участка. После соединения (гибридизации) матрицы с праймером (отжиг), последний служит затравкой для ДНК-полимеразы при синтезе комплементарной цепи матрицы.

Проведение ПЦР

Для проведения ПЦР в простейшем случае требуются следующие компоненты:

ДНК-матрица, содержащая тот участок ДНК, который требуется амплифицировать;
два праймера, комплементарные концам требуемого фрагмента;
термостабильная ДНК-полимераза;
дезоксинуклеотидтрифосфаты (A, G, C, T);
ионы Mg2+, необходимые для работы полимеразы;
буферный раствор.

ПЦР проводят в амплификаторе — приборе, обеспечивающем периодическое охлаждение и нагревание пробирок, обычно с точностью не менее 0,1°C. Чтобы избежать испарения реакционной смеси, в пробирку добавляют высококипящее масло, например, вазелиновое. Добавление специфичеких ферментов может увеличить выход ПЦР-реакции.
Ход реакции
Обычно при проведении ПЦР выполняется 20 — 35 циклов, каждый из которых состоит из трех стадий. Двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94 — 96°C (или до 98°C, если используется особенно термостабильная полимераза) на 0,5 — 2 минуты, чтобы цепи ДНК разошлись. Эта стадия называется денатурацией — разрушаются водородные связи между двумя цепями. Иногда перед первым циклом проводят предварительный прогрев реакционной смеси в течение 2 — 5 минут для полной денатурации матрицы и праймеров.

Когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться с одноцепочечной матрицей. Эта стадия называется отжигом. Температура отжига зависит от праймеров и обычно выбирается на 4 — 5°С ниже их температуры плавления. Время стадии — 0,5 — 2 минут.

ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, используя праймер в качестве затравки. Это — стадия элонгации. Температура элонгации зависит от полимеразы. Часто используемые полимеразы наиболее активны при 72°C. Время элонгации зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и от длины амплифицируемого фрагмента. Обычно время элонгации принимают равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований. После окончания всех циклов часто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты. Эта стадия длится 10 — 15 мин.
Подготовка материала к исследованию и транспорт его в лабораторию
Для успешного проведения анализа важно правильно собрать материал у пациента и правильно провести его подготовку. Известно, что в лабораторной диагностике большинство ошибок (до 70%) совершается именно на этапе пробоподготовки. Для взятия крови в лаборатории ИНВИТРО в настоящее время применяются вакуумные системы, которые с одной стороны минимально травмируют пациента, а с другой — позволяют произвести взятие материала таким образом, что он не контактирует ни с персоналом, ни с окружающей средой. Это позволяет избежать контаминации (загрязнения) материала и обеспечивает объективность анализа ПЦР.

Словарь

ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота — биологический полимер, один из двух типов нуклеиновых кислот, обеспечивающих хранение, передачу из поколения в поколение и реализацию генетической программы развития и функционирования живых организмов. Основная роль ДНК в клетках — долговременное хранение информации о структуре РНК и белков.

РНК– рибонуклеиновая кислота — биологический полимер, близкий по своему химическому строению к ДНК. Молекула РНК построена из тех же мономерных звеньев — нуклеотидов, что и ДНК. В природе РНК, как правило, существует в виде одиночной цепочки. У некоторых вирусов РНК является носителем генетической информации. В клетке играет важную роль при передаче информации от ДНК к белку. РНК синтезируется на ДНК-матрице. Процесс этот называется транскрипцией. В ДНК имеются участки, где содержится информация, ответственная за синтез трех видов РНК, различающихся по выполняемым функциям: информационной или матричной РНК (мРНК), рибосомальной (рРНК) и транспортной (тРНК). Все три вида РНК тем или иным способом участвуют в синтезе белка. Однако информация по синтезу белка содержится только в мРНК.

Нуклеоти́ды — основная повторяющаяся единица в молекулах нуклеиновых кислот, продукт химического соединения азотистого основания, пятиуглеродного сахара (пентозы) и одной или нескольких фосфатных групп. Нуклеотиды, представленные в нуклеиновых кислотах, содержат одну фосфатную группу. Они называются по содержащемуся в них азотистому основанию — адениновый (A), содержащий аденин, гуаниновый (G) — гуанин, цитозиновый (C) — цитозин, тиминовый (Т) — тимин, урациловый (U) — урацил. В состав ДНК входят 4 типа нуклеотидов — A, T, G, C, в состав РНК также 4 типа — A, U, G, C. Сахаром в составе всех нуклеотидов ДНК является дезоксирибоза, РНК — рибоза. При образовании нуклеиновых кислот нуклеотиды, связываясь, образуют сахаро-фосфатный остов молекулы, по одну сторону которого находятся основания.

Праймер – котроткая ДНК, используемая для репликации матричной цепи. Каждый из праймеров комплементарен одной из цепей двуцепочечной матрицы, обрамляя начало и конец амплифицируемого участка.
Литература

Глик Б., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. Пер. с англ. — М.: Мир, 2002. — 589 с., илл. ISBN 5-03-003328-9
Щелкунов С.Н. Генетическая инженерия — Новосибирск: Сиб. унив. изд-во, 2004. — 496 с.; илл. ISBN 5-94087-098-8
Патрушев Л.И. Искусственные генетические системы — М.: Наука, 2005 — В 2 т. — ISBN 5-02-033278-X