Анализ крови рмп с кардиолипиновым антигеном

Показания к исследованию и подготовка

Анализ на РМП проводится в серологических лабораториях, которые находятся в кожно-венерологических диспансерах. Кровь сдают по направлению врача. Показания к исследованию бывают разные:

• незащищенный акт, после которого появилась сыпь в области половых органов;
• появление шанкра (твердое уплотнение, похожее на язву). Может возникнуть на половых органах, в области заднего прохода, на слизистых оболочках рта, глаз. Не сопровождается дискомфортом, проходит сам посебе на 15-45-й день;
• увеличение лимфатических узлов;
• высыпания по телу, повышение температуры тела в течение нескольких дней;
• фимоз, баланопостит у мужчин.

Анализ крови сдается натощак, но не ранее чем через 4 часа после еды. Недопустим алкоголь, в течение 2-3 дней перед сдачей следует воздержаться от жирной пищи, так как сыворотка крови после инактивации мутнеет и реакцию будет невозможно учесть.

Откуда берут кровь на анализ

Техника забора предусматривает определенные нюансы: кровь забирают из вены в объеме 5 мл в стерильную стеклянную пробирку или вакутайнер в манипуляционных кабинетах. Допустимо взятие крови из пальца, в редких случаях – спинномозговую жидкость. Манипуляции проводятся в медицинских учреждениях, материалы далее транспортируются в серологические лаборатории, где и осуществляют анализ.

Интерпретация и расшифровка

Учет анализов проводит квалифицированный врач-лаборант. Выделяют четыре вида распознавания анализов на РМП:

• Положительный (++++) ;
• слабоположительный (++) ;
• сомнительный (+) ;
• отрицательный (-)

Любой из неотрицательных результатов является поводом для обращения к специалистам, не следует игнорировать даже сомнительную реакцию, она может быть первым признаком скрытого сифилиса, который не проявляется клиническими признаками и выявляется только лабораторно. Положительный и слабоположительный результат предусматривает в первую очередь пересдачу анализа, анамнез больного и осмотр.

Скрининговые тесты, к которым относится РМП, имеют некоторые недостатки – низкую чувствительность при первичном и третичном сифилисе и ложноположительные реакции.

Ошибочные результаты на РМП

Причинами ложноположительных реакций являются:

• инфекционные заболевания, возбудители которых имеют сходство с бледной трепонемой (сапрофиты в полости рта и на половых органах);
• состояния, приводящие к изменению обмена веществ, особенно липидного (беременность, пневмония, лепра, онкологические заболевания, инфаркт миокарда, искусственная иммунизация и пр.);
• технические погрешности при постановке.

Если при сдаче крови обнаружен неотрицательный результат на РМП или RPR, в первую очередь необходимо обратиться к врачу-венерологу. Чтобы убедиться в правильности предыдущего анализа, придется еще раз дать кровь. Следует учесть, что ни один из этих тестов не является основанием для выставления диагноза сифилис, а является причиной для дальнейшего обследования более чувствительными, трепонемными методами (РПГА, РИТ, РИФ).

Ложные результаты

Нередко бывают случаи, когда проба Вассермана показывает образование антител, однако при этом человек не страдает сифилисом. Ложная положительная реакция отмечается при следующих заболеваниях и состояниях:

• беременности;
• инфекционном мононуклеозе;
• подагре;
• сахарном диабете;
• малярии;
• кори;
• скарлатине;
• бруцеллезе;
• пневмонии;
• хламидиозе;
• микоплазменной инфекции;
• вирусном гепатите;
• туберкулезе;
• злокачественных опухолях;
• тиреоидите;
• аутоиммунных болезнях (системной красной волчанке, склеродермии, ревматоидном артрите);
• инфицировании энтеровирусами;
• недавней вакцинации;
• у пациентов старческого возраста (в 10 % случаев);
• употреблении алкоголя накануне исследования;
• наркотической зависимости.

Можно сделать вывод, что перечень заболеваний и состояний, при которых отмечаются ложные результаты теста, довольно обширен. Поэтому для постановки точного диагноза назначают иммунофлюоресцентный анализ крови. Он позволяет более достоверно выявить наличие иммуноглобулинов G к бледной трепонеме. Проводят также анализ крови методом ПЦР-диагностики. Он показывает наличие у пациента фрагментов ДНК бледной трепонемы. Окончательный диагноз врач ставит только на основании комплексного исследования.

Является отборочным тестом при массовом обследовании населения на сифилис.

Постановка:

плазма или инактивированная сыворотка крови + специ­альный кардиолипиновый антиген (экстракт бычьего сердца, обогащенный холестерином и лецитином). Образуется преципитат (комплекс антиген — ан­титело), выпадающий в осадок в виде хлопьев белого цвета.

РМП можно проводить и по количественной методике с разведением сыворотки крови.

Преимущества экспресс-метода:

быстрота ответа (30-40 минут),

небольшой объем необходимой для анализа крови (2-3 капли плазмы или сыворотки).

Источники ошибок при постановке РМП:

неправильное взятие крови из пальца (наличие пузырей воздуха в капил­ляре пипеток);

неравномерная концентрация антигена в эмульсии вследствие недоста­точного перемешивания ее перед использованием;

бактериальное загрязнение эмульсии;

нарушение сроков и условий хранения плазмы и сыворотки крови, ан­тигена и его эмульсии, растворов;

Читайте также:  Миеломная болезнь: что это такое, отчего возникает, что провоцирует болезнь, симптомы и лечение

использование при постановке реакций загрязненных пробирок, пипе­ток, пластинок, растворов.

Вышеуказанные ошибки могут приводить к появлению как ложноот­рицательных, так и ложноположительных результатов реакции.

После окончания терапии ставится РМП и по снижению титра судят о ди­намике инфекционного процесса и эффективности терапии.

Подтверждением эффективности проведенной терапии считается сниже­ние титра в 4 и более раз в течение 1 года; по окончании этого срока осуще­ствляется постановка той же специфической реакции, что и при первичном обследовании.

Что такое сифилис

Сифилис относится к заболеваниям, передающимся половым путем. Оно имеет инфекционную природу, очень опасно и в большинстве случаев протекает тяжело.

Основным путем заражения является незащищенный половой акт (оральный, анальный, вагинальный) с зараженным партнером.

Иногда фиксируется бытовая передача:

• через ранки на слизистых оболочках,
• при поцелуях,
• через предметы общего пользования (особенно обувь, полотенца, белье, расческу, бритву),
• при переливании крови,
• при наркомании через шприцы,

Возбудитель заболевания — бледная трепонема, бактерия из семейства спирохет. Инкубационный период длится, в среднем. 7-10 суток, реже — 21 день. Он начинается с момента заражения и до образования шанкра — твердого уплотненного образования на коже или слизистых оболочках.

Еще один признак заболевания, который проявляется на начальном этапе, — увеличение лимфоузлов.

При остром течении заболевания появляется лихорадка и обширная сыпь. В этом случае человеку необходимо пройти ряд диагностических процедур, среди которых одно из важных мест занимает РМП-исследование крови.

Что такое сифилис и чем опасно данное заболевание рассказывается на видео:

RPR модификация

Также в современных лабораториях можно столкнуться с другим похожим названием — тест RPR. Это уже современная модификация преципитации, в которой обнаруживаются быстрые плазменные реагины. Такими реагентами называют антитела, принадлежащие к классам иммуноглобулинов G и M.

Именно RPR тест (его второе название — неспецифический антифосфолипидный или реагиновый тест) рекомендуется приказом Минздрава Российской Федерации для скрининга или первичного исследования на сифилис. Поэтому, если у вас есть выбор: сделать РМП либо выполнить RPR, — то лучше принять решение в пользу второго метода.

RPR — метод исследования позволяет выявить практически 80% лиц с течением первичной инфекции и почти 100% лиц, которые болеют вторичным сифилисом или латентными (скрытыми) формами. RPR — реакция способна выявить сифилис уже через 7 дней после появления первичной сифиломы, например, твердого шанкра. Обычно это можно сделать через месяц после заражения.

Иммуноферментный анализ для серо- и ликвородиагностики сифилиса

«■ } ; // U! £//-

Принцип:- шшша

Т. pallidum сенсибилизируются к поверхности твер­дофазового носителя (лунки панелей). Добавляется исследуемая сыворотка. При наличии антител против Т. pallidum образуется комплекс антиген- антитело, связанный с поверхностью носителя. На следующем этапе в лунки наливают антивидовую сыворотку (против иммуноглобулинов человека), ме­ченую ферментом (пероксидазой или щелочной фосфатазой). Меченые анти­тела взаимодействуют с комплексом антиген-антитело, образуя новый ком­плекс. Для его выявления в лунки наливают раствор субстрата (5- аминосалициовая кислота). Под действием фермента субстрат меняет цвет, что указывает на положительный результат.

Оптимальным в случае использования ИФА считается одновременное применение трех его вариантов:

выявление суммарных AT (CAT)

последующее дифференцированное определение трепонемоспецифических IgM и IgG.

Появление противосифилитических антител происходит в соответствии с общими закономерностями иммунного ответа. Вначале появляются IgM на 2- 4 неделе после заражения и исчезают у нелеченных больных примерно через 18 месяцев; при лечении раннего сифилиса через 3-6 месяцев; позднего — че­рез год. По мере развития болезни начинает преобладать синтез IgG, которые появляются на 4 неделе после заражения, достигают более высоких титров и длительно сохраняются даже после клинического излечения.

Источники возникновения ошибок при использовании ИФА-тест- систем:

нарушения техники взятия крови, условий транспортировки и хранения тест-систем и проб.

некачественная работа лаборантов,

любые отклонения от инструкции по применению тест-системы,

неисправность инструментов и приборов,

Последняя актуализация описания производителем 31.07.1996

Фильтруемый список

Что такое кровь на РМП и как сдавать анализ

Довольно часто в больницах на первой процедуре спрашивают, что такое кровь на РМП и сколько его делать. Данная процедура выполняется в течение одного дня и по его окончании уже можно узнать результаты анализа.

Прохождение процедуры анализа крови на РМП ничем не отличается от обычного забора крови.

Следует прийти на процедуру натощак. Разрешается пить обычную воду (без подсластителей и без газа).

Накануне анализа требуется воздержаться от приема алкоголя, острой пищи, жареных блюд — все это может снизить точность проводимой процедуры.

Заранее проинформируйте специалиста о приеме тех или иных медицинских препаратов

— действующие вещества лекарств тоже могут снизить точность проводимого анализа. Следует воздержаться от интенсивных физических нагрузок перед проведением данной процедуры.

Помимо вышеперечисленного крайне важно стараться не нервничать. Да, от результатов анализов зависит многое, однако если перенервничаете, то анализы придется пересдавать

Для успокоения выпейте стакан обычной воды — достаточное количество жидкости в организме способствует стабилизации нормального самочувствия.

У пациента берут образец крови, с которым затем проводят определенные манипуляции: добавляют специальные антигены, которые при наличии сифилиса приведут к разрушению эритроцитов (гемолиз). Данная процедура для больного ничем не отличается от обычного забора крови на общий анализ.

Обратите внимание

В настоящее время в медицинской практике титр антител от 1:2 до 1:800 свидетельствует о наличии сифилиса.

В результате обследования анализа крови на микрореакцию возможны положительный, отрицательный или ложноположительный ответы.

Положительный результат

говорит о том, что в организме пациента выявлены возбудители сифилиса. После этого сдаются дополнительные анализы.

Ложноположительный результат

возникает при обнаружении других заболеваний у пациента: злокачественная опухоль, диабет, СПИД, гепатит, подагра и другие.

Отрицательный результат

говорит об отсутствии у человека сифилиса. Для подтверждения отсутствия заболевания через некоторый промежуток времени данный тест проводят повторно: если первый анализ крови на микрореакцию преципитации проводился на раннем этапе заболевания (прошло меньше недели после заражения), то возбудители сифилиса могли еще не спровоцировать выработку антител, а соответственно, тест не мог их заметить.

Самым неприятным заболеванием, оказывающим удручающее влияние на личную жизнь человека, считают сифилис. Эта опасная инфекционная , вызывает массу тяжёлых последствий. Современная медицина владеет несколькими способами диагностики сифилиса, один из которых-анализ крови на РМП. Так, в сокращённом виде, называют реакцию микропреципитации.

При госпитализации или предоперационном обследовании пациент должен иметь представление об анализе крови на рмп, что это рутинная процедура, которую обязаны пройти все.

Принцип микропреципитации заключается в обнаружении к антигену кардиолипиновому, находящемуся в мембранах возбудителя сифилиса, Treponema pallidum и прочих микроорганизмов из рода Treponema порядка Spirochaetales. Реакция основана на феномене преципитации- выпадении в осадок смеси и реактива. Если осадок образуется, тест считают Положительной считают реакцию с образованием осадка.

Интерпретация и расшифровка результатов

Расшифровка анализа крови на РМП предполагает выдачу не количественного, а качественного результата: «положительно» или «отрицательно» — антитела обнаружены или не обнаружены.

В случае первичного сифилиса это реакция может быть положительной уже в 60% случаев и выше. В случае вторичного сифилиса, когда антител в организме много, реакция становится достоверно стопроцентной. Если сифилис протекает скрыто или латентно, но уже достаточно долгое время, то реакция микропреципитации будет достоверной в 80% случаев.

При третичном сифилисе разброс значений может колебаться — от 37% до 94%. Ведь если сифилис протекает очень долгое время, буквально годы, то антитела по разным причинам могут исчезать из крови, или переставать нарабатываться.

Поскольку реакция микропреципитации является скрининговым методом, то необходимо учитывать следующее очень важное обстоятельство. Это реакция проявляется образованием иммунных комплексов-преципитатов только в том случае, если антитела и антиген находятся в крови в строгих соотношениях, их должно быть ровно столько, чтобы антитела полностью связались со всем количеством антигена и не оказалось избытка в растворе ни одного из реагентов.

Если антител значительно больше, в таком случае реакция вообще может не произойти. Этот феномен стал известен при исследовании врождённого сифилиса. У малышей с врождённой инфекцией настолько много антител в крови, что реакция просто не происходит.

Именно поэтому к интерпретации результатов РМП у грудных детей следует подходить очень осторожно.

При каких заболеваниях могут возникать ложноположительные результаты? Их перечень достаточно велик:

• системные заболевания соединительной ткани и ревматические поражения;
• беременность (нечасто);
• подагра и гиперурикемия;
• хронический алкоголизм;
• сахарный диабет;
• , поскольку микобактерии и бледные трепонемы имеют схожие антигены;
• внутривенная наркомания;
• лимфоцитарная ангина или ;
• другие вирусные и бактериальные инфекции (вирусные гепатиты или энтеровирусная диарея, скарлатина, корь);
• вирусная или бактериальная пневмония;
• аутоиммунный тиреоидит;
• пожилой и старческий возраст.

Также эта реакция может быть ложноположительной после различных прививок и вакцинаций.

Однако, в том случае если реакция микропреципитации или ее более совершенный аналог – RPR — отрицательны, то это не может однозначно свидетельствовать об отсутствии сифилитической инфекции. Пациент может заразиться сифилисом буквально за два-три дня, за неделю или за две до проведения обследования и тогда антитела в крови просто ещё не успею появиться. Такое состояние называется серонегативным ранним сифилисом. Возможна и полностью обратная ситуация, когда пациент болеет уже 10 или 20 лет и у него поздний третичный сифилис с отсутствием антител в плазме крови.

Порядок проведения исследования

Что же это

такое
анализкрови
РМП и как его делают? Для исследования у пациента отбирают плазму венозной
крови
, жидкость, сочащуюся из высыпаний на слизистой или пункцию лимфоузла. Выбор биоматериала определяется врачом.

Сдавать анализ

на РМП следует натощак. При этом со времени последнего приема пищи должно пройти не менее 8-10 часов.

Перед проведением анализа пациенту разрешается пить минеральную воду без газа в малых количествах.

За день до проведения исследования из рациона обязательно нужно исключить острую, жирную и соленую пищу, алкогольные напитки.

Показания

Анализ с кардиолипиновым антигеном назначают в следующих случаях:

• при наличии незащищенных половых контактов пациента со случайными партнерами;
• при бытовых контактах с больными сифилисом;
• при симптомах первичной и вторичной стадии сифилиса (шанкре, высыпаниях на теле);
• при подозрении на нейросифилис (психических и неврологических нарушениях);
• детям, рожденным инфицированными женщинами;
• для контроля эффективности противосифилитической терапии.

Этот тест не всегда бывает информативен при запущенных (третичных) формах патологии. На поздних стадиях сифилиса выработка антител существенно снижена.

Пробу с кардиолипиновым антигеном обязательно сдают во время беременности. Кроме этого, такое исследование требуется пройти донорам и людям, оформляющим медицинскую книжку.

Если РМП или RPR положительна

Конечно, больше всего людей беспокоит, если РМП положительна.

В этом случае необходимо проводить дополнительные подтверждающие тесты, о которых говорилось выше. Если предметом выбора будет иммуноферментный анализ и реакция пассивной гемагглютинации или РПГА, то их специфичность намного выше и составляют 100% при чувствительности в 95%. Но даже эти дополнительные методы могут тоже дать ложный положительный результат, особенно в случае сопутствующих воспалительных заболеваний, а также аутоиммунных процессов. Именно поэтому в клинической практике обязательно подтверждают диагноз сифилиса с помощью двух дополнительных способов. Это может быть реакция иммунофлюоресценции или иммобилизации возбудителей сифилиса (РИБТ). Но эти исследования дорогие и применяются нечасто.

Возможно применять реакцию связывания комплемента (РСК), в которой используется специфический трепонемный антиген. Показано проведение иммунного блота, который помогает в сомнительных случаях при неясных клинической картине. Наконец, на помощь приходит полимеразная цепная реакция, с помощью которой можно определить наличие ДНК бледной спирохеты в организме пациента.

Возможные отклонения

Рассмотрим расшифровку анализа. Выраженность положительной реакции обозначена в бланке с результатами пробы знаками «+». Отклонениями от нормы считаются следующие данные теста:

• «+ » — сомнительный результат (рекомендуется пересдать анализ).
• «++» — слабоположительная реакция.
• «+++» — положительный результат.
• «++++» — резко положительная проба.

Что делать, если проба с кардиолипином дала положительные результаты? Диагноз «сифилис» обычно не ставится только лишь по реакции Вассермана. В этом случае врачи всегда назначают дополнительные исследования.

Этот тест в 70 % случаев позволяет выявить первичную стадию сифилиса, и в 100 % случаев показывает вторичную форму болезни. Однако положительные результаты исследования не всегда свидетельствуют об инфицировании бледной трепонемой. На данные этого анализа могут повлиять многие факторы. Они будут рассмотрены далее.

Как диагностируют сифилис

Диагностика заболевания всегда должна базироваться на достоверных и неопровержимых клинических проявлениях:

• специфические проявления на коже и слизистых оболочках;
• данные анамнеза (наличие половых связей в определенный промежуток времени);
• результаты лабораторных исследований (РМП, RPR).

RPR-модификация

RPR (реакция плазменных реагентов) также является нетрепонемным тестом диагностирования сифилиса, по сути это аналог РМП (европейский метод), но может проводиться и с плазмой крови. РМП (плазмотест) допускается, но считается экспресс-методом. Проводится быстрее по времени и считается достоверным, но в сомнительных случаях лучше обратиться к анализу РМП из инактивированной сыворотки.

Информация!

Инактивация – помещение сыворотки человека в термобаню на 30 мин. Для RPR диагностики она не обязательна.