Анализ ПЦР на ВИЧ достоверность и через сколько можно сдавать?

За время, прошедшее со дня открытия вируса иммунодефицита человека, в лечении наметился серьезный прогресс. Но до сих пор инфицированных и их близких интересует вирусная нагрузка при ВИЧ, ее показатели и норма. Эти данные учитываются при подборе терапевтических методов, продлевающих годы. При отсутствии лечения, людям с ВИЧ врачи прогнозируют до 10 лет жизни, при правильно подобранном лечении – до 70. Не последнее место в таком изучении занимают не только антитела к ВИЧ-инфекции, но и количество клеток, отвечающих за иммунитет, Т-лимфоцитов, или CD-4, – именно они могут обезопасить инфицированного от сопутствующих заболеваний, ведущих к смертности, или СПИДу. Прояснить ситуацию помогает общий анализ крови, назначаемый и при ВИЧ.При низком показателе антител к вирусу достаточно проходить обследование дважды в год, при увеличенных, при беременности, приеме сменных групп антиретровирусных препаратах – раз в 2-4 недели – 3 месяца.

Анализы крови при вирусе иммунодефицит человека

Исследование биологического материала, которым выступает кровь, остается наиболее информативным методом. Перед тем как сдавать анализ ВИЧ, стараются учитывать особенности поведения вируса. Он проявляется в плазме, хотя обнаруживается и в семенной жидкости, и во влагалищной слизи. Анализ на ВИЧ – многокомпонентная диагностика. Кровь берут для различных исследований:

1. Анализ крови на ВИЧ. Часто впервые обнаруживают вирус именно при сдаче анализа крови на ВИЧ и гепатит.
2. Общий анализ крови также назначается при ВИЧ. Он покажет специфические показатели лейкоцитов, тромбоцитов, гемоглобина, скорость оседания эритроцитов (СОЭ). Но эти же нюансы иногда указывают на другие вирусные инфекции, в случае отклонения от нормы назначаются другие исследования крови.

Важно! Если вы не знаете, как делаются тесты на ВИЧ, натощак или нет, врачи ответят: забор биологического материала осуществляется на голодный желудок. Это обеспечивает достоверный результат.

1. Экспресс-анализы на ВИЧ. Они дают результат в течение 30 минут. Проводят изучение не только крови, но и слюны, мочи. Тест информативен в плане диагностики заражения и количества антител. Иногда случается, что тест на ВИЧ положительный, анализ отрицательный. Результат ложноотрицательный, если заражение произошло недавно. Пройти это обследование нужно будет через 6 недель.
2. Иммуноферментное исследование. Из крови выделяют сыворотку, где и ищут антитела к вирусу иммунодефицита человека. На вопрос пациентов, сколько делается анализ на ВИЧ, врачи отвечают: до 10 дней. Но и здесь вероятность ошибочных результатов сохраняется. На это влияют аутоиммунные заболевания, обострения хронических болезней, раковые опухоли.

Задумываясь, где можно сдать анализ на ВИЧ, вам стоит обратиться в частную лабораторию, в центры профилактики и борьбы со СПИДом и ВИЧ, но проще всего сдать кровь в государственной поликлинике по месту жительства. Положительным аспектом каждого медицинского учреждения остается анонимность.

Узнать, сколько стоит ваш анализ на СПИД, можно заранее. Цена на ВИЧ-анализ колеблется от 300 до 12 000 рублей. Более дорогими по стоимости остаются исследования в частных лабораториях и высокочувствительные тесты.

ВИЧ.СПИД.ЗППП.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) представляет собой метод молекулярной генетики, который позволяет анализировать любую короткую последовательность ДНК (или РНК) даже в образцах, содержащих только мельчайшие количества ДНК или РНК, тем самым определив наличие/отсутствие патогенного возбудителя (определить, например есть ли в человеке вирус ВИЧ или гепатита Б или микобактерии туберкулёза). ПЦР используется для воспроизведения/умножения/клонирования (амплификации) выбранных участков ДНК или РНК для анализа.

Метод ПЦР настолько прост, что его может поставить даже школьник)

Раньше амплификация ДНК включала клонирование сегментов, представляющих интерес, в векторы для экспрессии в бактериях и занимала недели. Но теперь, когда ПЦР делается в пробирках, требуется всего несколько часов. ПЦР является высокоэффективной, так что из ДНК может быть сделано огромное количество копий.

Последовательность ДНК и соответствие нуклеотидов.

Да не оскудеет рука дающего

Проект «СПИД.ВИЧ.ЗППП.» — некоммерческий, созданный добровольцами-экспертами в области ВИЧ/СПИДа за счет своих собственных средств, чтобы донести правду людям и быть чистыми перед своей профессиональной совестью. Будем благодарны за любую помощь проекту. Да воздастся Вам в тысячи крат: ПОЖЕРТВОВАТЬ.

Более того, ПЦР использует те же молекулы, которые природа использует для копирования ДНК:

• Два «праймера», коротких одноцепочечных последовательностей ДНК, которые синтезируются так, чтобы соответствовать началу и концу растяжения ДНК, подлежащей копированию.
• Фермент, называемый полимеразой, который перемещается вдоль сегмента ДНК, считывает его код и собирает копию.
• Куча блоков ДНК, которые необходимо сделать этой полимеразе.

То есть ПЦР — это такая техника при которой частицы ДНК (иногда РНК) умножаются в определенном растворе или на специальной поверхности, где они могут быть депонированы.

ПЦР — это метод, с помощью которого учёные могут находить иглу в стоге сена и затем строить стог из этих игл.

Ключом к пониманию ПЦР является знание о том, что каждый человек, животное, растение, паразит, бактерия или вирус содержит генетический материал — ДНК (или РНК) последовательности (нуклеотидные последовательности или кусочки ДНК (или РНК)), которые уникальны для каждого индивидуума. То есть, если образец содержит сегменты ДНК или РНК,

задача ПЦР как метода — умножить (амплифицировать), сделать как можно больше их копий, чтобы можно было идентифицировать кому они могут принадлежать (определенному человеку, животному или патогенному организму), даже если есть только следы наличия ДНК/РНК.

Оборудование для ПЦР.
Однако ПЦР-амплификация является лишь частью диагностического теста. После проведения амплификации амплифицированные сегменты необходимо сравнить с другими нуклеотидными сегментами, но уже из известного источника (например, конкретного человека, животного или патогенного организма). Это сравнение уникальных сегментов часто выполняется путем размещения нуклеотидных последовательностей, сгенерированных ПЦР, рядом с известными нуклеотидными последовательностями от людей, патогенов или других источников в специальном геле.

Когда электрический ток проходит через гель, то различные нуклеотидные последовательности образуют полосы, которые напоминают «лестницу» в соответствии с их электрическим зарядом и молекулярным размером. Это называется гель-электрофорез. Они мигрируют на одни и те же уровни в геле, показывая идентичность нуклеотидных последовательностей. Этот метод является одним из самых популярных последних этапов ПЦР-тестов.

Как ПЦР работает?

В 1983 году Кари Муллис разработал основные этапы по амплификации ДНК-последовательностей. Он и Майкл Смит были удостоены Нобелевской премии за создание ПЦР в 1993 году.

ПЦР проводится в одной пробирке с соответствующими химическими веществами и при определенной температуре нагревания.

Необходимы следующие реагенты или химикаты:

• Образец, содержащий нуклеотидную последовательность (из крови, волос, гноя, кожи и т. д.).
• ДНК-праймеры: короткая одноцепочечная ДНК, которая присоединена к нуклеотидным последовательностям, которая способствует синтезу комплементарной цепи нуклеотидов.
• ДНК-полимераза: фермент, который, когда ДНК связывается с праймером, спускается по фрагменту ДНК с добавлением структурных блоков ДНК для образования комплементарных пар оснований и, таким образом, синтезирует комплементарную нуклеотидную цепь ДНК (введение термостойкой ДНК-полимеразы, Taq-полимеразы , полученной из термостойких бактерий, заметно улучшает способность к ПЦР).
• Большой избыток структурных блоков ДНК, называемых нуклеотидами (аденин, тимидин, цитозин и гуанин, сокращенные как: A, T, C и G соответственно) в растворе. Когда эти блоки соединены вместе, они образуют нуклеотидную последовательность или одну нить ДНК. Когда эти строительные блоки связывают свой комплементарный строительный блок слабыми водородными связями (например, A будет связываться только с T и G только с C) образуется комплементарная нуклеотидная последовательность ДНК, которая связана с исходной одноцепочечной ДНК. Когда связывание завершается, комплементарная ДНК с двойной цепью образуется в определенной последовательности.

Кари Муллис очень интересный, прикольный дядечка, посмотрите как он интересно рассказывает, как он придумал ПЦР:

Он верит в астрологию, но не верит, что ВИЧ вызывает СПИД.)

Затем полимеразно-цепная реакция начинается с сегмента ДНК из образца, который помещается в пробирку с указанными выше реагентами. Раствор нагревают до 94°С. Нагревание разрушает водородные связи, которые позволяют образовывать комплементарные цепи ДНК, поэтому в смеси существуют только одиночные нити (это называется денатурацией двухцепочечной ДНК).

Этапы ПЦР

Смеси дают остыть до 54°C. При этой температуре ДНК-праймеры и ДНК-полимераза связываются с отдельной одноцепочечной ДНК (это называется отжигом ДНК). Поскольку строительных блоки в избытке (высокая концентрация) в смеси, полимераза использует их для создания новых комплементарных нитей ДНК (называемых расширением ДНК), и этот процесс происходит быстрее при 72°C. Этот процесс создает новую двухцепочечную молекулу ДНК из каждой из одиночных нитей исходной молекулы.

Этот цикл повторяется примерно 40 раз в машине, называемой термическим циклером (термосайклером), который автоматически повторяет циклы нагрева-охлаждения, при этом количество каждой последовательности ДНК удваивается каждый раз, когда цикл нагрева-охлаждения завершается. То, что изначально было одним коротким сегментом ДНК, можно было увеличить до примерно 100 миллиардов копий после 40 циклов удвоения.

Когда необходим тест на ПЦР?

Тест на ПЦР является основой для ряда тестов, которые могут отвечать на многие различные медицинские вопросы, которые помогают врачам диагностировать и лечить пациентов. Например, тесты ПЦР могут обнаруживать и идентифицировать патогенные организмы у пациентов, особенно тех, которые трудно культивировать (например, ВИЧ и другие вирусы и некоторые грибы).

Одни врачи назначают ПЦР-тесты, чтобы помочь диагностировать генетические заболевания, в то время как другие врачи используют ПЦР для обнаружения биологических родственных отношений, таких как идентификация родителей детей. ПЦР-тесты также используются для идентификации и характеристики генетических мутаций и перегруппировок, обнаруженных при определенных раковых заболеваниях.

Тем не менее, ПЦР-тесты были модифицированы и внедрены во многие аспекты научных исследований, включая эволюционную биологию, генетическую отпечатку пальцев, судебно-медицинские исследования и многие другие.

Что такое ОТ-ПЦР?

Обратно-транскриптазный ПЦР (RT-PCR) — это тест на ПЦР, который предназначен для обнаружения и измерения количества РНК. Хотя первоначальные тесты ПЦР амплифицировали ДНК, многие вирусы и другие биологические компоненты (например, митохондрии) используют РНК в качестве своего генетического материала. RT-PCR отличается от обычной ПЦР сначала взятием РНК и превращением нити РНК в нить ДНК. Это делается по существу тем же самым методом для ПЦР, описанным выше, за исключением использования фермента, называемого обратной транскриптазой, вместо ДНК-полимеразы.

Обратная транскриптаза позволяет перевести одну нить РНК в комплементарную цепь ДНК. Как только эта реакция происходит, рутинный метод ПЦР можно затем использовать для амплификации ДНК. RT-PCR используется для обнаружения и изучения многих РНК-вирусов. RT-PCR не следует путать с другим вариантом ПЦР, называемым ПЦР в реальном времени (реал-тайм).

ПЦР в реальном времени представляет собой вариацию ПЦР, которая позволяет анализировать амплифицированную ДНК в течение обычных 40 циклов процедуры. Хотя процедура аналогична обычной ПЦР с циклированием, ПЦР реального времени использует флуоресцентные красители, прикрепленные к некоторым из строительных блоков или небольших нуклеотидных нитей. В зависимости от используемого метода флуоресценция возникает, когда образуются амплифицированные нити ДНК. Количество флуоресценции можно измерить на протяжении 40 циклов и позволяет исследователям измерять определенные продукты и их количества во время циклов амплификации.

Это часто позволяет исследователям или техническим специалистам пропускать гель-электрофорез или другие вторичные процедуры, необходимые для анализа продуктов ПЦР, тем самым обеспечивая более быстрые результаты. ПЦР в реальном времени и RT-PCR являются вариациями или модификациями исходного теста ПЦР. Тем не менее, существует еще много вариантов (не менее 25), которые существуют и используются для решения конкретных проблем. Все они имеют разные названия, такие как сборка ПЦР, ПЦР с горячим началом, мультиплексная ПЦР, твердотельная ПЦР и многие другие.

ПЦР будет развиваться и дальше, чтобы помочь ответить на многие другие вопросы в медицине, биологии и других областях науки.

Что такое ПЦР анализ на ВИЧ?

ПЦР (полимеразная цепная реакция) — метод умножения генетического материала вируса, анализ, который определяет генетический материал вируса — РНК или ДНК ВИЧ.

Если вирус содержится в минимальном значении, то в результате реакции это количество многократно увеличивается. Поэтому ПЦР имеет высокое диагностическое значение.

Обычно этот тест используется для определения ВИЧ в донорской крови или для раннего определения наличия ВИЧ в организме до выработки специфических антител к ВИЧ. Специфические антитела определяют обычные тесты на ВИЧ (ИФА), но только через 1-3, редко 12 месяцев после заражения. А с помощью ПЦР можно дать достаточно точный ответ через 14 дней с достоверностью 98% и даже через 5 дней, но тогда достоверность будет 80%. ПЦР на ВИЧ — это дорогой и более трудоемкий анализ, чем ИФА, поэтому его используют не всем подряд, а только по особым показаниям (доноры, пострадавшие от медицинской аварии с ВИЧ-инфицированным) или платно.

Жизненный цикл ВИЧ (схема)

Качественный ПЦР анализ на ВИЧ

Качественный ПЦР анализ на ВИЧ — определяет есть вирус ВИЧ-1/ВИЧ-2 или его нет, но он не определяет количество копий вируса (для определения количества используется количественный ПЦР). Качественный ПЦР НЕ делают тем у кого известен диагноз «ВИЧ-инфекция». Его делают только тем, у кого пока неизвестно — инфицирован он ВИЧ или нет.

Это метод определения комплиментарного участка ДНК в геноме клетки лимфоцита пораженного ВИЧ. Т.е. определяется не сам вирус, а материал, который вирус встраивает в клетку. В ядре клетки уже будет храниться его ДНК из которой он потом будет считываться и размножаться (копировать самого себя).

Количественный ПЦР анализ на ВИЧ

Количественный ПЦР анализ на РНК ВИЧ — определяет количество копий РНК вируса в крови (для определения вируса в клетках используют ПЦР ДНК, например у детей). Делается только у ВИЧ-инфицированных, для контроля лечения, определения выраженности процесса развития болезни, эффективности лечения.

Через сколько времени после заражения можно обнаружить ВИЧ с помощью метода ПЦР?

Через сколько дней можно сдавать ПЦР на ВИЧ после контакта с ВИЧ положительным партнёром?

ВИЧ с помощью ПЦР можно обнаружить через 4-14 дней после заражения. Отрицательный результат ПЦР на ВИЧ достоверен после 14 дней после рискованного контакта, но по действующим нормативам всё равно требуется обследование с помощью ИФА.

Чем отличается ПЦР ДНК от ПЦР РНК ВИЧ?

РНК обычно используется в количественных тестах для оценки вирусной нагрузки у диагностированных лиц, например, для оценки эффективности терапии.

ДНК — в мононуклеарных клетках, например, для диагностики у детей, там, где антитела к ВИЧ матерей мешает использовать метод ИФА.

И тот и другой тест могут быть и количественными, и качественными.

И тот, и другой можно в особых случаях применить диагностики, но с учетом конкретных ограничений, которые накладывают технические параметры системы, т.е. по назначению врача.

Может ли ПЦР на ВИЧ быть ложноположительным, причины?

Если всё сделано правильно: медсестра не перепутала пробирки, посмотрела паспорт, прежде, чем делать забор крови, правильно промаркировала пробирку, правильно выписала направление и т.д., а специалист лаборатории (обычно это врач-лаборант) сделал всё согласно инструкции, им были соблюдены все требования лабораторного регламента (например, правильно «расскапал» биоматериал, без перекрестной контаминации (загрязнения) и т.д.) и была использована качественная тест-система, ТО ПЦР ложноположительным быть МОЖЕТ только в 2% случаях (это связано с чувствительностью используемых тест-систем).

Но если были допущены ошибки со стороны персонала медицинского учреждения, ТО ПЦР может быть ложноположительным, более чем в 2% случаев.

Как сдается ПЦР на ВИЧ?

Для исследования на ВИЧ методом ПЦР сдаётся кровь из вены, желательно (но необязательно) утром натощак.

Где можно сдать анализы на ПЦР ВИЧ?

Для этого нужно ввести в поиск Вашего браузера «сдать пцр вич» и добавить в запрос Ваш населенный пункт и Вы увидите организации, которые занимаются у Вас исследованиями на ПЦР.

Например,

• Москва: ЦМД (2450 руб.), ИАКИ (2300 руб.).
• Санкт-Петербург: СПб СПИД-центр.
• Екатеринбург: КДЛ (2480 руб.).
• Самара: СитиЛаб (1400 руб.).
• Краснодар: КДЛ (3000 руб.).
• Минск: Республиканский центр гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья.
• Киев: Первая Независимая Лаборатория.

Сколько стоит анализ на ВИЧ методом ПЦР?

Около 1,5-3 тыс. руб. в зависимости от региона.

Какова достоверность результатов ПЦР анализа на ВИЧ?

Через 14 дней после заражения достоверность ПЦР на ВИЧ составляет 100%, с 4-5 дня — достоверность 80%.

Сколько времени делается анализ ПЦР на ВИЧ?

Технически 4-6 часов, но в реальности зависит от организации работы лаборатории и обычно результат выдается через 2-3 дня.

ПЦР на ВИЧ у новорожденного ребенка

Так как у ребёнка до 1,5 лет рожденного от ВИЧ+ матери сохраняются её антитела против ВИЧ, то определить заражен ВИЧ ребенок или нет с помощью ИФА невозможно. В такой ситуации используется ПЦР:

• Если у ребенка возрастом 1 мес с помощью ПЦР обнаружили вирус, значит он заразился.
• Если у ребенка в 1-2 месяца и 4-6 месяцев ПЦР отрицательная, то при условии, что мать не кормила его своим грудным молоком — ребёнок здоров.

В чём разница между ПЦР и ИФА?

ПЦР определяет сам вирус, а ИФА реакцию (в виде антител) организма на вирус.

ПЦР быстрее определяет наличие вируса, чем ИФА.

Новый алгоритм определения ВИЧ.

Читать далее о других анализах на ВИЧ —>>

Дополнительно почитать:

• Диагностика венерических болезней методом ПЦР
• Расшифровка результатов анализа на ВИЧ, СПИД

Диагностика

Условно диагностические исследования делят на 2 вида. Первая группа помогает определить факт инфицирования. Такие тесты могут установить контроль над течением инфекции, указывают на результативность лечения.

Вторая группа определяет антитела к вирусу иммунодефицита человека, антиген р24 (серологические анализы) и РНК вируса, ДНК провируса (молекулярно-генетические тесты).

Детальная диагностика назначается после того, как был проведен общий анализ крови, что при ВИЧ желательно сделать. Инфицирование ВИЧ протекает в разных стадиях: от бессимптомного состояния до острой фазы, как СПИД. Во время него организм страдает от оппортунистических болезней, в то время как иммунитет здоровых людей им может противостоять. Это продемонстрируют общие показатели кровяных телец.

Диагностика помогает определить и количество лейкоцитов. От соотношения их и антител к вирусу тоже зависит будущее лечение и качество жизни. Кроме общих методов используют и специфические приемы.

Полимеразная цепная реакция

Это один из эффективнейших методов диагностики инфицирования. Его результаты правдивы на 90 – 99 %: тест выявляет не антитела к вирусу, а его РНК. Этот анализ на ВИЧ отличают короткие сроки готовности – до 3 дней.

Иммуноблоттинг

Это высокочувствительный и не самый дешевый метод распознавания вирусной инфекции. Он заключается в разделении белков вируса, после чего их перемещают на нитроцеллюлозную мембрану. После процедуры электрофореза его антигены, разные по молекулярному весу, сравнивают с образцами на тест-полоске. Метод показывает, на какой стадии иммунодефицита находится человек.

Кому назначается ПЦР?

Определение инфекции ВИЧ при помощи ПЦР по рекомендации специалиста производят в следующих случаях:

• предварительное диагностирование. ПЦР безошибочно подтверждает или опровергает результат ИФА;
• иммуноблоттинг подтвердил диагноз. Иммунный блоттинг является дополнительным способом исследования СПИДа. Оба метода применяются совместно, что позволяет исключить вероятность постановки ошибочного диагноза;
• при подтвержденном ВИЧ-статусе с помощью ПЦР отслеживают эффект от проведения выбранного лечения;
• для анализа крови доноров на присутствие ВИЧ-антител;
• для определения ВИЧ-статуса у новорожденного, когда мать имеет положительный результат. ПЦР в первые дни жизни позволяет определить внутриутробное инфицирование или заражение младенца при прохождении по родовым путям. Тест проводится на 2 – 3 неделе после рождения.

Сколько времени делается анализ ПЦР, и где его можно сдать?

Анализ ПЦР на ВИЧ проводится в специальной лаборатории. Сам тест и трактовка результата не требует много времени: месяца и даже недели. Для взятия крови необходимо до 6 минут. В обычном случае специалисту, чтобы поставить диагноз и выдать заключение, потребуется не больше суток. Первые 8 часов происходит изучение крови, оставшееся время уходит на оформление. Результат можно будет забрать уже на следующий день после взятия пробы. Срок проведения экспресс-тестирования – 2 часа.

Внимание! Полис ОМС дает возможность прохождения теста бесплатно в государственном учреждении здравоохранения.

Почти любая коммерческая лаборатория способна провести исследование, причем, на анонимной основе. Человеку присваивают специальный номер, к которому затем привязывают результаты. Данная информация заливается на сайт учреждения в личный кабинет пользователя.

Нормы

У здорового человека иммунный показатель CD-4 составляет 400-500 – 1600 клеток/мл. Если цифра уменьшается до 200-500, меняется каждые полгода на 45 единиц – высока вероятность инфицирования. Но учитывается и возможность заболеваний, влияющих на иммунные процессы, беременность и грудное вскармливание у женщин.

Также анализ крови на ВИЧ имеет нормы и для инфицированных людей. Если показатель клеток снизился до 350, пора начинать терапию. Благодаря этому не разовьются опасные для инфицированных людей сопутствующие заболевания.

Если цифра снизилась до 200 единиц, часто назначают высокоактивную антиретровирусную терапию. Страдающим иммунодефицитом советуют сдать анализы на ВИЧ и гепатит. Заболевания печени часто сопутствуют опасному вирусу, усугубляют состояние иммунитета.

Важно! Половина случаев инфицирования диагностируется после того, как был проведен анализ крови на гепатит, rw и ВИЧ: после постановки женщины на учет по беременности, во время профосмотров, перед сдачей донорской крови.

Показатель СОЭ при ВИЧ

СОЭ – показатель, который возрастает при воспалительных реакциях в организме.

В норме он не должен превышать 10 мм/ч.

При недавнем заражении ВИЧ этот показатель может значительно возрастать. Дальше он постепенно приходит в норму.

СОЭ отражает активность иммунитета. Этот показатель соответствует уровню цитокинов. В том числе интерлейкина-6 и фактора некроза опухолей α. В дальнейшем по увеличению уровня СОЭ можно предположить повышение активности ВИЧ-инфекции. Потому что данный показатель возрастает в тот период, когда отмечается уменьшение числа CD4 клеток.

Что такое вирусная нагрузка

Инфицированных интересует не только значение CD-4. Важно количество частиц опасного вируса в плазме крови. Нагрузка может показывать ошибочный результат из-за нарушения условий прохождения тестов, после вакцинаций, вследствие перенесенных заболеваний. Это касается и здоровых людей. Но если через месяц показатель увеличивается в 3-5 раз, это повод задуматься.

Многое зависит от состояния здоровья инфицированного. Его характеризуют кровяные тельца, в частности – отвечающие за борьбу с чужеродными телами, среди которых и вирусные инфекции.

О показателях после исследования методом полимеразной цепной реакции

Используя этот метод РНК ВИЧ и ДНК обнаруживается почти сразу после заражения. Но окончательного диагноза не ставится, требуется обязательное подтверждение другими методами. «Помогите расшифровать результат ПЦР.» — довольно часто можно услышать такую просьбу. Что пишется в этом случае, если обнаруживается вирус иммунодефицита? При ответе на результат анализа, сделанного с помощью ПЦР указывается количество копий РНК в миллилитре крови. В таблице, приведенной ниже, показан результат в зависимости от количественных характеристик в крови.

Использовать вышеприведенную таблицу хорошо, когда делается обследование на СПИД, так как по ней легко определяется стадия болезни.

Эти таблицы с учетом различных тест-систем есть в лабораторных кабинетах для каждого метода иммуноферментного анализа и иммуноблоттинга.

Часто просят: «Расшифруйте ответ после исследования методом полимеразной цепной реакции по показателю СД4.» Нормальным считается количество клеток СД4 от 600 до 1900 клеток на миллилитр биологического материала. Это соответствует ВИЧ-отрицательному статусу. Но надо знать, что эти показатели даже у здоровых людей бывают не в этом диапазоне.

В современном мире уже много лабораторий имеют хорошее оборудование, с помощью которого можно полностью исследовать организм на содержание в нем ВИЧ-инфекции.

Иммунный статус и вирус

Состояние инфицированного человека зависит от соотношения главных показателей: количества частиц вируса и клеток CD-4, иммунный статус и вирусная нагрузка – обязательные параметры для диагностики и возможного лечения. Задача врачей – повышать иммунный статус, который борется с вирусом. Однако он способен поражать клетки CD-4, их количество может резко снизиться до критического показателя. Именно поэтому периодически проводится диагностика пациента.

Добровольное обследование

Поводом для добровольного обследования на ВИЧ-инфекцию могут стать три группы показаний. Это пациенты, имеющие симптомы острого заболевания, лица с признаками иммунодефицита, а также люди без каких-либо проявлений ВИЧ, но имеющие высокий риск этого заболевания (обнаружение одного или нескольких факторов риска, свидетельствующих о значительной вероятности заражения).

Симптомы, которые могут оказаться признаками ВИЧ-инфекции, являющиеся поводом для обследования:

• сохраняющийся более 1 месяца подряд частый жидкий стул, повышенная температура тела или увеличенные лимфоузлы двух и более групп;
• снижение массы тела на 10% и больше, если для потери веса нет других объяснений (спорт, тяжелый физический труд, низкокалорийная диета и т.д.);
• приобретенное слабоумие, если для него не было других причин (алкоголизм, черепно-мозговые травмы и т.д.).

В заключительной фазе ВИЧ у пациентов резко снижается клеточный иммунитет. Клинические признаки иммунодефицита тоже могут быть поводом для обследования:

• длительные, плохо поддающиеся лечению, частые пневмонии;
• любые бактериальные, вирусные, грибковые инфекции, которые протекают тяжелее, чем у большинства людей (включая диссеминированную герпетическую инфекцию, герпетический менингоэнцефалит, инвазивный кандидоз или глубокие микозы);
• хронические воспалительные процессы малого таза у пациентов женского пола, которые не поддаются лечению стандартными методами.

Следующие заболевания часто ассоциированы с ВИЧ-инфекцией, поэтому являются показаниями для лабораторной диагностики:

• опоясывающий герпес у лиц, моложе 60 лет;
• криптококкоз (кроме легочной формы);
• пневмоцистная пневмония;
• поражения головного мозга токсоплазмой;
• криптоспоридиоз;
• гистоплазмоз;
• саркома Капоши;
• онкогематологические заболевания.

Обследоваться на ВИЧ рекомендовано лицам из групп риска по этому заболеванию. К факторам риска относятся гомосексуализм, проституция, беспорядочная половая жизнь, наркомания, пребывание в местах лишения свободы. Обследуют контактных лиц: в основном после полового акта с носителем инфекции или медицинских работников, проконтактировавших с кровью ВИЧ-позитивного пациента.

Результаты и расшифровка анализов

Показатели иммуноферментного анализа могут отличаться. Они определяют разные белковые соединения, присутствующие в оболочках вируса. Наборы белков у тест-систем могут отличаться, но если обнаруживаются 3 основные – тест даст положительный результат.

Ученые выделяют следующие показатели:

• До 20 тысяч копий/мл – недостаточная концентрация РНК. Для зараженного человека это хороший результат. У здорового показатель должен быть равен нулю.
• От 20 тысяч до 100 тысяч – средняя стадия, характеризуется первичными или вторичными проявлениями иммунодефицита.
• От 100 тысяч до 450 тысяч считается смертельно опасным показателем. Чем выше цифра, тем больше вероятность развития СПИДа.

Важно! Можно повторно сдать кровь при ложноотрицательном, ложноположительном и неверном результате. Отрицательный результат правдив, если риск инфицирования отсутствовал в течение 12 недель до забора крови.

О нормальном результате

Норма — что это значит? Когда анализ на ВИЧ отрицательный, это считается нормой.

1. Последнее поколение тест-систем ИФА позволяют определить наличие антител к ВИЧ и белковых частиц. Если анализ в норме, то в крови не находят антител и белковых частиц возбудителя. Но точно сказать, что человек здоров на основе этого можно, если до сдачи его отсутствовал риск заражения 3 месяца. В противном случае еще раз через какое-то время надо повторить сдачу анализов.

Бывали случаи, что ВИЧ обнаруживали только через 6 месяцев. Поэтому, если результат отрицателен, а был контакт с ВИЧ-инфицированным больным, для достоверности надо повторить сдачу анализов через три, четыре и шесть месяцев. Бывает, что ИФА дал отрицательный результат, а у человека явно есть подозрение на присутствие признаков ВИЧ, то рекомендуется сдать анализ еще раз. Ошибочный результат возможен из-за ранних сроков проведения анализа либо из-за человеческого фактора.

2. Если результат отрицательный получен при иммуноблоте, то в настоящее время это самый достоверный анализ.

Если у человека присутствует вирус иммунодефицита, а результат отрицательный, то скорее всего это врачебная ошибка, которая может возникнуть на любом этапе проверки. Если при повторе иммуноблота через три и шесть месяцев результат отрицательный, то беспокоиться не о чем, это говорит о норме. И только после отрицательного ответа иммуноблота будет выдана справка, что ВИЧ анализ отрицательный.

3. ПЦР исследование у взрослых при диагностировании вируса иммунодефицита используется крайне редко, а для только что рожденных детей используется именно этот метод.

Нормой здесь так же считается отрицательный результат.

4. Согласно социологическим исследованиям, многие пользуются экспресс-тестом на ВИЧ. При виде отрицательной полоски люди успокаиваются и отказываются идти в медицинское учреждение, даже при наличии всех признаков ВИЧ-инфицирования. Но надо знать, что точность экспресс-теста составляет восемьдесят пять процентов. Кроме этого, в домашних условиях можно неверно его провести, или будут нарушены условия его хранения. Возникает еще большая вероятность, что результат неверен. Даже прием за 8 часов до тестирования минеральной щелочной воды повлияет на результат теста. Поэтому о том, что вирус иммунодефицита отсутствует у человека на основании экспресс-теста, даже если он отрицательный, далеко не всегда является верным утверждением.

Пути передачи вирусной инфекции

Стоимость анализа на ВИЧ делает его доступным для каждого желающего. Актуальность проблемы подтверждают распространенные способы передачи инфекции: это использование нестерильных медицинских инструментов, в частности шприцов, путь от матери к ребенку, при незащищенном половом акте, при переливании крови.

На вопрос, через сколько можно сдавать анализы на ВИЧ после возможного заражения, врачи отвечают: нужно выждать время от 3 недель до 3-5 месяц.

Что делать инфицированным и их близким:

1. Следить за количеством копий РНК вируса ВИЧ. Это снижает риск инфицирования матерью плода, а также увеличивает продолжительность жизни зараженного.
2. Своевременно сдавать анализы и ответственно проходить курсы антиретровирусной терапии.
3. Помнить, что не только определение вирусной нагрузки при ВИЧ –важные показатели, их соотношение с результатами на иммунный статус – главная составляющая лечения. Тесты сдаются регулярно.

Поскольку лекарство от вируса ВИЧ не изобретено, людям с вирусной нагрузкой нужно следить, что показатель вирусных частиц не выходил за пределы нормы. Даже при наличии этого диагноза вы можете продолжать полноценную жизнь.

Происхождение анализа методом ПЦР

Датой рождения можно назвать 1983 год. Метод основан на том, чтобы вычленить фрагмент нуклеотидной цепи чужака, это может быть как рибонуклеиновая кислота так и дезоксирибонулеиновая, искусственно размножить его и исследовать. Специалист по ПЦР ДНК ВИЧ берет и размножает по принципу комплементарности, выстраивая довольно длинную цепочку, которую удобно рассмотреть и подвергнуть тестированию. ПЦР РНК ВИЧ осуществляется так же, только берется плазма или сыворотка.

Возникновение этого подхода в широкой практике явилось настоящим прорывом и позволило совершить большой шаг в вопросе помощи больным. Таким образом стало реальным помогать людям на самых ранних этапах, обнаруживать недуг еще до появления специфичных антител. С этого дня истории медицины, ВИЧ уже не является приговором.

О сдаче анализов

Расшифрованный тест позволяет подтвердить инфицирование ВИЧ либо опровергнуть данный факт. Для обследования необходим биологический материал человека. Для анализа можно взять не только кровь, но и другие жидкости человека (к примеру, слюну). При выявлении антител подтверждается смертельный диагноз.

Исследование биологического материала проводится в лабораторных условиях. Однако результаты могут изменяться, если человек является носителем ВИЧ. У пациента может наблюдаться тромбоцитопения либо лейкопения.

Следовательно, если у пациента по результатам анализа крови выявляют прогрессирующие изменения, то необходим тест на вирус иммунодефицита. Для этого человека направляют на один из двух видов – ПЦР либо же ИФА.