Что из себя представляет данный анализ?
В организме в ответ на внедрение патогенной микрофлоры или при повреждении собственных клеток образуются особые белковые элементы – антитела. При диагностике сифилиса методом микрореакции (МРП) в крови пациента пытаются найти связь между антителами и фосфолипидами — белками, входящими в состав всех клеточных мембран.
Иммунный ответ в виде выработки антител формируется как раз тогда, когда фосфолипиды из клеточных мембран попадают в кровь. Это происходит при проникновении в ткани человека бледной трепонемы – возбудителя сифилиса и ряда других инфекций.
Чтобы при заражении сифилисом антитела начали вырабатываться, требуется определенное время. Это происходит не мгновенно, а, самое раннее, спустя 3-4 недели после инфицирования. Именно поэтому этот анализ не подходит для ранней диагностики. Но благодаря легкости проведения и невысокой стоимости МРП относится к скрининговым исследованиям, предназначенным для выявления болезни среди широких масс населения.
Диагностика сифилиса этим методом состоит из следующих этапов:
- подготовка больного к сбору материала;
- сдача крови в лаборатории. Для анализа требуется кровь пациентов, которую чаще всего берут из вены, но в некоторых лечебных учреждения используется и из пальца;
- на специальном оборудовании отделяют плазму крови от клеточных элементов;
- в полученную биологическую жидкость добавляют антиген с визуализирующим агентом. Чаще всего для этого используется уголь;
- при наличии в сыворотке фосфолипидных антител происходит их склеивание с введенным антигеном, что проявляется образованием черных хлопьев, указывающих на положительную реакцию. При отсутствии в организме антител к фосфолипидам хлопья не образуются.
Также проводится количественная оценка наличия бледной трепонемы в организме с вычислением показателей титра. Для этого микрореакцю на сифилис выполняют в разведениях. В процессе исследования сыворотку крови пациента разводят физиологическим раствором сначала в два раза, потом в четыре и так далее, каждый раз удваивая разведение и проводя тест на выявление антител в материале. При этом отмечается разведение, на котором микрореакция последний раз остается положительной. Например, 1:320 означает, что даже при разведении в 320 раз в сыворотке крови еще содержатся антитела. Это цифра является показателем титра и указывается в анализе. Чем выше значение титра, тем активнее протекает патологический процесс в организме.
Количественное определение титра важно для контролирования результативности терапии и диагностирования окончательного излечения сифилиса. В течение года после курсовой терапии должно отмечаться падение титров в 4 раза. Контрольные анализы проводят через 3 месяца, полгода и год после лечения.
Как ставится диагноз сифилиса
Диагноз сифилиса ставиться на совокупности данных анамнеза,конфронтации,клинической картины и лабораторных данных,включающих обнаружение возбудителя и результатов серологического обследования.Подтверждение диагноза лабораторными данными обязательно.
В случае полного отсутствия возможности использования методов лабораторной диагностики сифилиса, Всемирная организация здравоохранения (1999 г.) и МЗ РФ ( приказ № 327 от 25.07.2003 г.) допускают использование так называемого синдромного (эпидемиологического) лечения сифилиса на основе клинико-анамнестических данных.
Методы диагностики,подтверждающие наличие сифилиcа
Подтвержденный диагноз сифилиса у полового партнера Случайная половая связь без барьерного предохранения в период ,соответствующий инкубационному периоду Наличие в прошлом высыпаний в области половых органов,увеличения лимфоузлов
Осмотр половых органов,кожных покровов,слизистой рта,ануса Пальпация высыпных элементов при их наличии Пальпация периферических лимоузлов
Наличие характерных для различных периодов сифилиса поражений кожи и слизистых. Увеличение лимфоузлов
Обнаружение T.pallidum в материале из очагов поражения,лимфатических узлов,амниотической жидкости,ликвора
Обнаружение типичных форм трепонемы
Наличие флюоресцирующих трепонем
Обнаружение специфической ДНК T.pallidum
Нетрепонемные серологические тесты – обнаружение в сыворотке крови антител против фосфолипидов тканей,разрушенных сифилитической инфекцией и липидов мембраны Т.pallidum
Макроскопический тест Тест быстрых плазменных реагинов (Rapid Plasma Reagins, RPR)
Микроскопический тест VDRL (Venereal Disease Research laboratory) Количественный тест VDRL
Трепонемные серологические тесты – обнаружение в сыворотки крови антител против антигенов бледной трепонемы
Положительный (позитивный) результат
Методы диагностики, подтверждающие наличие различных форм и осложнений сифилиса
Формы и осложнения
Ренгенография аорты длинных трубчатых костей грудины костей черепа суставов
Ранний врожденный сифилис Поздний врожденный сифилис Третичный сифилис
Неврит слухового нерва Сифилитический лабиринтит
Неврит зрительного нерва Паренхиматозный кератит
Также применяются и рутинные методы исследования – общие анализы крови и мочи,биохимический анализ крови и.т.д.
Показания к исследованию
Микрореакция преципитации на сифилис выполняется в диагностических целях и при проведении скрининговых исследований. Для выявления и констатации наличия инфицирования бледной трепонемой анализ МРП назначают следующим группам пациентов:
- имеющие клинические проявления болезни. В первую очередь, это больные с характерными изъязвлениями на половых органах и участках тела, контактирующих с партнером в процессе полового акта. Также обращается внимание на увеличенные близкорасположенные к очагу лимфатические узлы;
- лицам с любыми высыпаниями или язвочками в области гениталий;
- сексуальным партнерам и членам семьи больного;
- новорожденным, родившимся от матерей, болеющих или имеющих сифилис в анамнезе;
- больным любой другой патологией, передающейся при интимных контактах.
Также исследование проводят лицам, не имеющим ярко выраженной симптоматики, но предположительно болеющим сифилисом. Это связано с тем, что при подозрении на заражение иногда люди не обращаются к врачу, а сами начинают лечить болезнь антибиотиками. Это приводит к тому, что проявления патологии уходят, но бледная трепонема в организме остается, и заболевание протекает в скрытой форме. Поскольку в такой ситуации диагностировать сифилис визуально очень сложно, врач назначает лабораторный анализ крови.
Также МРП на сифилис регулярно проводят военнослужащим, сотрудникам учреждений общественного питания, здравоохранения и образования. Этот анализ обязательно назначается беременным женщинам, донорам, пациентам с хирургической патологией перед оперативным вмешательством.
Для контроля эффективности проводимого лечения регулярно обследуются все инфицированные пациенты. Лица, прошедшие курс терапии от сифилиса, также в течение года после излечения периодически сдают кровь для определения титра возбудителя. При полном избавлении от инфекции с течением времени реакция становится отрицательной.
Симптоматика
Инкубация характеризуется миграцией бактерий по лимфатическим и кровеносным сосудам и их активным размножением в лимфоузлах. Продолжительность периода — от 3 недель до 3 месяцев.
- У больных в месте внедрения бактерии появляется плотный безболезненный красноватый узелок, превращающийся в язву, которая получила название твердый шанкр. Это кожное поражение располагается на половом члене, половых губах, в уретре, ротовой полости, во влагалище, около ануса, на коже молочных желез, внизу живота, на пальцах рук. Размеры язвы могут варьироваться от карликовых – с маковое зерно до гигантских. Они бывают множественными, биполярными и единичными. Практически у всех больных увеличиваются лимфоузлы в районе заражения, обычно паховые.
- Спустя 10 недель после возникновения твердого шанкра возникает вторичный сифилис, который характеризуется генерализацией инфекции. Микробы попадают в кровь и гематогенным путем диссеминируют по всему организму. Во внутренних органах спирохета вызывает специфическое воспаление. На коже появляется симметричная розовая сыпь, представляющая собой вторичные сифилиды. Они появляются приступообразно, без лечения исчезают, а затем появляются вновь.
сифилитическая сыпьСыпь при вторичном сифилисе розеолезная, папулезная или пустулезная. Развиваются интоксикационные признаки: жар, разбитость, слабость, явления фарингита, миалгия, артралгия, резкое похудание. Для вторичной формы патологии характерна эритематозная ангина, ангулярный стоматит или хейлит, генерализованный лимфаденит, лейкодерма, алопеция, появление на половых органах широких кондилом. Если на первой или второй стадии не провести комплексное лечение, то спустя несколько лет наступит третья стадия сифилиса, проявляющаяся поражением черепно-мозговых и периферических нервов.
- Третичная форма сифилиса возникает через 3-15 лет после первичного инфицирования. Она может протекать с образованием множества гумм и очагов деструкции, по типу нейросифилиса, кардиоваскулярного или висцерального сифилиса. Развиваются необратимые нарушения в работе внутренних органов и систем. У больных нарушается процесс глотания, речи, дыхания, происходит перфорация твердого неба, «проваливается» нос. Этот период болезни обычно заканчивается инвалидностью больного или летальным исходом.
Врожденный сифилис развивается в результате внутриутробного заражения плода. Эта тяжелейшая патология проявляется характерной триадой симптомов у ребенка: врожденной глухотой, кератитом, гетчинсоновыми зубами.
Как правильно подготовиться к анализу?
Чтобы при исследовании на сифилис получить корректные результаты микрореакции преципитации, надо в течение некоторого времени перед посещением лаборатории выполнить ряд условий. Рекомендации по подготовке к сдаче крови на сифилис включают следующие пункты:
- обязательно поставить доктора в известность обо всех имеющихся сопутствующих заболеваниях. Наличие некоторых патологий может исказить результаты;
- для получения корректных результатов дайте врачу список всех медикаментов, назначенных другими специалистами, которые вы в данный период времени принимаете. Возможно, понадобится отмена на неделю или внесение корректив в схему лечения;
- за неделю до посещения лаборатории требуется прекратить прием любых лекарств, обладающих антибактериальным, противовирусным или противогрибковым действием;
- за трое суток до сдачи материала прекращается употребление любых напитков, содержащих алкоголь, даже в минимальных количествах;
- за сутки до исследования из рациона исключаются жирные, острые, копченые и жареные блюда;
- за час до анализа надо полностью отказаться от курения.
Кровь сдается утром натощак. До этого времени можно употреблять только чистую негазированную воду.
При правильной подготовке к проведению исследования значительно снижается риск получения ложноположительных результатов. Поэтому надо точно выполнять все рекомендации лечащего врача перед проведением исследования.
Как интерпретировать тесты на сифилис
В мировой медицинской практике для диагностики сифилиса используют три реакции: нетрепонемный тест – RPR или VDRL и два трепонемных тестов – реакцию иммунофлюоресценции ( РИФ-FTA) и реакцию пассивной гемоагглютинации (РПГА – TPHA)
нет сифилиса или инкубационный период или очень ранняя стадия
нелеченый или недавно леченый сифилис
первичный сифилис или ложноположительные РПР и РИФ
ложноположительные РПР и РПГА или ложноотрицательная РИФ
леченый сифилис или нелеченый поздний сифилис
биологическая ложноположительная реакция
ранний первичный сифилис или недавно леченый сифилис или ложноположительная РИФ
пролеченый сифилис или ложноположительная РПГА
В России для диагностики сифилиса еще применяют реакцию связывания комплимента (реакцию Вассермана) и реакцию иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)
При первичном серонегативном периоде сифилиса бывают положительные РИФ и Ig ИФА как наиболее чувствительные серореакции. Однако это не является основанием для постановки таким больным диагноза первичного серопозитивного сифилиса.У ряда больных в этом периоде бывает изолированный положительный результат при постановке реакции Вассермана с трепонемными или с кардиолипиновым антигенами. В конце 3-й или в течение 4-й недели после появления шанкра становятся положительными стандартные серологические реакции – с этого момента начинается первичный серопозитивный период сифилиса. На 1-2-й неделе первичного серопозитивного сифилиса отмечается увеличение степени позитивности серореакции (1+, 2+, 3+) и нарастание титра реагинов (1:5, 1:10, 1:20). РИФ и ИФА уже у всех больных дают резко положительный результат, но РИБТ, как правило, отрицательная или процент иммобилизации очень низок. Диагноз первичного серопозитивного сифилиса ставится и тем больным, у которых осадочные реакции и реакция Вассермана с неспецифическими антигенами дали даже однократный слабоположительный результат. При дальнейшем течении первичного сифилиса все серологические реакции становятся резко положительными (4+); титр реагинов достигает 1:80, 1:160, РИФ продолжает быть резко положительной, но РИБТ у большинства больных еще остается отрицательной или может стать слабоположительной.
При вторичном свежем сифилисе резко положительный результат по всем стандартным серологическим реакциям наблюдается почти в 100% наблюдений; титр реагинов наиболее высок – 1:160; 1:240 или 1:320. РИФ – 4+; РИБТ дает положительнй результат более чем у половины больных, однако процент иммобилизации трепонем невысок (40-60%). При вторичном рецидивном сифилисе положительный результат по стандартным серологическим реакциям отмечается в 96-98% наблюдений. Отрицательные результаты могут иногда объясняться малосимптомным рецидивным течением, наличием астенизации и сочетанием сифилиса и ВИЧ-инфекции. РИБТ дает положительный результат у 85-90% больных при выраженной степени иммобилизации – 80-90-100%.
Третичный сифилис характеризуется положительными результатами по стандартным серологическим реакциям в 50-90% наблюдений и положительной РИБТ у 92-100% пациентов с высоким процентом иммобилизации.
Диагноз скрытого серопозитивного сифилиса, как указывалось выше, устанавливают только по положительным серореакциям в крови с обязательным подтверждением их по РИБТ, так как только РИБТ (и в меньшей степени РИФ) позволяет отдифференцировать ложноположительные серореакции (даже с позитивностью в 2+ или 3+) от истинно положительных.
Нейросифилис и висцеральный сифилис
Разные формы сифилиса нервной системы и висцерального сифилиса имеют различную частоту и выразительность стандартных серореакции. Так, прогрессивный паралич в 100% случаев сопровождается резко положительными всеми стандартными серологическими реакциями. Сифилис сосудов мозга, спинная сухотка, сифилитическое поражение сердечно-сосудистой системы сопровождаются положительными серореакциями лишь в 40-50-60% наблюдений. Однако РИБТ почти при всех перечисленных патологических состояниях дает резко положительный результат (90-100% иммобилизации).
При диагностировании врожденного сифилиса в первые 2 мес после рождения стандартные серологические реакции у ребенка не определяют, т. к. они могут быть положительными за счет пассивной передачи реагинов через плаценту. По этой же причине не имеет значение и положительный результат РИБТ. Пассивно переданные от матери ребенку имобилизины самопроизвольно исчезают в течение 6 мес после рождения. Если ребенок инфицируется незадолго до родов, то в этом случае РИБТ будет еще отрицательной (в связи с более поздним образованием иммобилизинов), несмотря на наличие в организме ребенка сифилитической инфекции. При врожденном сифилисе детей грудного возраста с активными проявлениями стандартные серореакции могут быть отрицательными в 1% наблюдений.При врожденном сифилисе раннего детского возраста отрицательные стандартные серореакции варьируют от 15 до 20%, но в этих случаях РИБТ дает положительные данные у 90-98% детей.При позднем врожденном сифилисе даже при наличии активных проявлений стандартные серореакции констатируются лишь у 70-80% обследованных, но зато РИБТ четко положительная у 100% больных с высоким титром иммобилизинов.
Причины возможных ошибок
Иногда при исследовании получают ложноположительные результаты. На «правильность» заключения влияет целый ряд внешних и внутренних факторов.
Прежде всего, для понимания причины ложноположительного результат надо иметь в виду, что микрореакция на сифилис – это не трепонемный анализ. Исследование не определяет саму бледную трепонему или продукты ее жизнедеятельности. А значит, подобные антитела к фосфолипидам могут образовываться при других заболеваниях, при которых происходит нарушение целостности клеток в организме человека.
- различные травмы;
- состояния после операции;
- аллергические заболевания;
- крапивница;
- системная красная волчанка;
- острые респираторные заболевания;
- беременность.
Также возможно искажение результатов при пневмонии, вирусном гепатите, инфекционном мононуклеозе, сахарном диабете. На исследование влияет наличие у больного аутоиммунных, онкологических патологий, туберкулезных инфекций, антифосфолипидного синдрома.
Ложноположительная реакция наблюдается и при приеме препаратов группы цитостатиков, при эндокринных патологиях и нарушениях метаболизма. Именно поэтому при положительной реакции микропреципитации назначается дополнительный комплекс анализов на сифилис.
Также на конечный результат исследования оказывают влияние такие факторы, как техника забора крови, при которой в биологическом материале могут остаться воздушные пузырьки, хранение и транспортировка анализа непосредственно в лабораторию. Немаловажное значение имеют и правильная предварительная обработка лабораторной посуды, срок годности используемых реактивов. На результат влияют и ошибки медицинского персонала при проведении исследования. К таким погрешностям относятся отказ от использования контрольных сывороток крови, недостаточное перемешивание антигена в эмульсии, использование двухзамещенных солей лимонной кислоты вместо трехзамещенных.
Положительный ответ МРП служит сигналом к более полному и внимательному дополнительному обследованию данного пациента.
Treponema pallidum
Морфология
Treponema pallidum — грамотрицательный микроорганизм, имеющий форму тонкой спирали, скрученной в 8-12 мелких завитков. Свое название бледная трепонема получила благодаря способности не воспринимать обычные лабораторные красители.
Спирохета является строгим анаэробом, хорошо растущим в бескислородной среде. Но не смотря на это, жизнеспособность бактерий сохраняется на окружающих бытовых предметах в течение 3 и более дней. Трепонема имеет жгутики и фибриллы. Благодаря им и собственным сокращениям клетки бактерия совершает поступательные, вращательные, сгибательные, волнообразные, винтообразные и контрактильные движения. Она быстро проникает в живые клетки и стремительно размножается в них поперечным делением.
Бледная трепонема имеет трехслойную клеточную стенку, цитоплазму и органеллы: рибосомы, мезосомы, вакуоли. Рибосомы синтезируют белки, а мезосомы обеспечивают дыхание и обмен веществ. Ферменты и антигены содержатся в цитоплазматической мембране. Тело бактерии покрыто слизистой бесструктурной капсулой, выполняющей защитную функцию.
Физические свойства
Микробы устойчивы к низким температурам и чувствительны к высоким. При нагревании они гибнут в течение 20 минут, при высыхании в течение 15 минут, а при кипячении – мгновенно. Антисептики и дезинфектанты быстро уничтожают бледную трепонему. Губительное действие на бактерию оказывают: ультрафиолет, свет, спирт, щелочи, уксус, мышьяк, ртуть, хлорсодержащие дезинфицирующие средства. Treponema pallidum устойчива к некоторым антибиотикам.
Бледная трепонема проявляет свои патогенные свойства во влажной и теплой среде. В организме человека излюбленным местом размножения являются лимфатические узлы. На стадии вторичного сифилиса микробы концентрируются в крови и проявляют свои патогенные свойства.
Культуральные свойства
Трепонема паллидум не растет на искусственных питательных средах, в культуре клеток и куриных эмбрионах. Ее культивируют в яичках кролика. В этих клетках микроб хорошо растет и размножается, полностью сохраняя свои свойства и вызывая у животного орхит.
Существуют обогащенные питательные среды, предназначенные для выделения чистой культуры. Микробы на них растут под толстым слоем вазелинового масла. Таким способом получают антитела, необходимые для постановки специфических реакций на сифилис.
Трепонемы растут на кровяном или сывороточном агаре в бескислородной среде. При этом они теряют свои патогенные свойства, но сохраняют антигенные. Патогенные трепонемы способны ферментировать маннит, утилизировать лактат и образовывать специфические метаболиты.
Патогенность
К факторам и компонентам патогенности и вирулентности бактерий относятся:
- Белки-адгезины, обеспечивающие фиксацию микроба на клетке-хозяина,
- Миофибриллы, способствующие глубокому проникновению в организм и миграции бактерии в теле хозяина,
- Образование L-форм,
- Липополисахариды наружной мембраны,
- Фрагменты болезнетворной клетки, проникающие вглубь тканей,
- Способность внедряться в межклеточные соединения эндотелия,
- Антигенная изменчивость.
Трепонема паллидум оказывает прямое токсическое действие на синтез макромолекул – ДНК, РНК и белков. Антигены Т. pallidum используются в реакции Вассермана для серодиагностики сифилиса. При неблагоприятных условиях спирохета трансформируется в L-формы, которые обеспечивают ее устойчивость к антибактериальным средствам и антителам.
Расшифровка результатов
Расшифровать микрореакцию преципитации на сифилис может только лечащий врач с учетом данных анамнеза и визуального осмотра. В результате исследования лаборатория может предоставить три варианта ответа:
- положительная реакция. Такое заключение подразумевает наличие у пациента скрытого, первичного, вторичного или третичного сифилиса. Также такой ответ может указывать на сохраненную стойкую позитивную реакцию на серологические обследования, встречающуюся примерно у 10% лиц, полностью излеченных от сифилиса. Не следует упускать из виду и ложноположительные варианты;
- отрицательная реакция. Отмечается не только при отсутствии заболевания, но и на поздних стадиях развития патологии или при первичном сифилисе. Такой результат может быть и как ложноотрицательный ответ в случае очень высокой концентрации антител в исследуемом материале;
- сомнительная реакция. Ставится в случаях низких показателей титра антител.
В процессе лечения и после него оцениваются и количественные показатели активности возбудителя сифилиса. Так, при положительной реакции титр антител находится пределах от 1:2 до 1:320. При отрицательном ответе антитела не выявляются. Сомнительная реакция отмечается при низких показателях титра. Полное излечение диагностируется только в случае падения титра антител в течение года в 4 раза.
Все сомнительные результаты требуют проведение дополнительных анализов другими методами – реакцией пассивной гемагглютинации, иммунофлюоресценции, антикардиолипинового теста.
Что такое трепонемные тесты
Как и при нетрепонемных тестах при проведении трепонемных тестов используется иммунологическая реакция антиген-антитела.Но в качестве антигенов применяются трепонемные антигены – либо интактные трепонемы либо очищенные и ультраозвученные трепонемы либо рекомбинантные антигены.Для проведения и обнаружения результатов реакции антиген-антитела используют более сложные и дорогие различные методы.Наиболее часто используются следующие трепонемные тесты.
- Реакция иммунофлюоресценции (РИФ -FTA) в различный модификациях
- Реакция пассивной агглютинации (РПГА – TPHA)
- Иммуноферментный анализ (ИФА -EIA) в том числе рекомбинатный ИФА
- Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)
- Иммуноблотинг
Где можно сдать анализ?
Анализ крови методом МРП выполняет клиническая лаборатория. Для получения направления следует обратиться к дерматовенерологу своей участковой поликлиники или в кожно-венерологическом диспансере. Провести исследование на условиях полной анонимности помогут коммерческие диагностические и лабораторные центры.
Ставит окончательный диагноз и проводит специфическое лечение только дерматолог-венеролог. В случае необходимости для назначения наиболее эффективного курса терапии лечащий врач может привлечь для консультаций других специалистов:
Для адекватного выбора медикаментозных препаратов при наличии сопутствующих заболеваний также может понадобиться заключение узкопрофильного доктора.
Сифилисом можно заразиться не только от своего полового партнера, но и бытовым путем. Для ранней диагностики заболевания при подозрении на инфицирование бледной трепонемой надо как можно скорее сделать скрининговое исследование и, при подозрении на сифилис, обратиться к врачу для уточнения диагноза и получения лечения.
«>
Источник: 1poserdcu.ru
Микрореакция на сифилис относится к нетрепонемным тестам, в основе которых лежит иммунологическая реакция между антителами и антигенами. Реакция микропреципитации на сифилис призвана определить в крови пациента реагиновые антитела, выработка которых является ответом на повреждение липидов бледной трепонемой. Однако в связи с тем, что миропреципитация направлена на поиск антилипидных антител, данный тест нельзя считать подтверждающим наличие сифилиса. Правильным будет направление на этот анализ в качестве отборочного. Такая ситуация связана с тем, что помимо сифилиса, МР обнаружит антитела в случае многих других состояний и заболеваний человека, которые сопровождаются разрушением тканей организма. Поэтому микрореакцию обычно используют как маркер и сочетают с трепонемными тестами для получения более точного результата.
Своё название микропреципитация получила в связи с необходимостью лишь незначительного количества реагентов и исследуемого материала для проведения реакции, от латинского слова Precepitacio, означающего падение. В данном случае — выпадение в осадок антиген-антител в виде хлопьев.
По своей разности выполнения МРП сифилиса различают:
- Макроскопический тест – результаты оцениваются на глаз;
- Микроскопический тест — для оценки результатов используют световой микроскоп, позволяющий провести подсчёт преципитантов.
Обычно МР при сифилисе применяют, когда необходимо провести плановое обследование определённой группы населения, то есть когда простота, дешевизна и быстрота получения результатов при МРП тестировании оправданны, чем точность полученных результатов. Микрореакция на сифилис качественно проводится в основном при обследовании таких лиц как:
- Доноры органов на трансплантацию
- Доноры крови
- Беременные женщины
- Работники сферы питания, здравоохранения и образования
- Заключённые
- Военнослужащие
- Все поступающие на стационарное лечение в больницы, а также лица, готовящиеся к предстоящим оперативным вмешательствам.
Если результаты анализов показывают наличие бледной трепонемы в организме, то такого человека направляют на дальнейшее лечение в стационар, а затем ещё на определённое время ставят на учёт в поликлинике. Однако для того чтобы выписать больного из стационара, необходимо убедиться, что он вылечился. Обычно для этого проводят анализы, но не всё так просто. Ориентироваться на внешние проявления нельзя, зная о периодах скрытого протекания заболевания, а большинство анализов может показывать наличие в организме бледной трепонемы ещё долгие годы после успешного лечения. В таком случае используют микрореакцию на сифилис, отрицательный результат которой относится к основным критериям успешного лечения.
При МРП анализе на сифилис результаты оцениваются количественным методом, что позволяет, сравнивая показатели тира до начало терапии и во время, подтвердить эффективность лечения при понижении титров или указать о необходимости смены врачебной тактики при отсутствии положительной динамики. Тем самым, микрореакция на сифилис качественно отличается от других серологических исследований, которые способны точно указать на наличие заболевания, но не на его динамику или излечение.
В качестве материала для микропреципитации могут выступать не только венозная кровь или из пальца, но и спинномозговая жидкость. В первых двух вариантах крайне желательно чтобы сбор исследуемого материала производился натощак. При люмбальной пункции отказ от еды перед анализом не обязателен. МР становится положительным уже через месяц после инфицирования больного, затем с развитием заболевания титры будут нарастать, а вот при переходе в скрытую форму наблюдается их уменьшение вплоть до полной отрицательной реакции при третичном сифилисе. Всего вариантов микрореакции может быть три:
- Положительная – антитела обнаружены;
- Сомнительная – низкие титры;
- Отрицательная – антитела отсутствуют.
Как уже говорилось, микропреципитация может давать ложноположительный или ложноотрицательный результат на сифилис. Причиной ложноотрицательного МР теста является высокое содержание в крови больного антител, что встречается очень редко. Так же отрицательный результат МРП покажет в первые недели после инфицирования, когда организм ещё не вырабатывает нужное количество антител к бледной трепонеме. А вот причинами ложноположительного результата обычно являются такие состояния организма как:
- Беременность;
- Невенерические трепонематозы;
- Сахарный диабет;
- Антифосфолипидный синдром;
- Онкологические заболевания;
- Туберкулез;
- Подагра;
- Аутоиммунные заболевания;
- Пневмония;
- Вирусные гепатиты;
- Инфекционный мононуклеоз;
- Хронический алкоголизм и наркомания.
Ещё одной причиной ошибок при микропреципитации — это нарушение техники проводимых исследований.
Отзывы и комментарии
Оставить отзыв или комментарий
Источник: www.zppp.saharniy-diabet.com
Что такое серологическая диагностика сифилиса
В большинстве случаев обнаружить возбудителя сифилиса невозможно или обнаружение его затруднительно.Поэтому для диагностики сифилиса применяют так называемое серологическую диагностику,основанную на определении различных видов и классов антител,которые организм выработал с целью своей защиты от сифилитической инфекции т.е определяется не возбудитель инфекции,а как организм прореагировал на его появление. Серологическое исследование (от от лат. serum – сыворотка) представляет собой лабораторный анализ плазмы каппилярной или венозной крови основаный на иммунологической реакции антиген-антитело. В качестве антигенов используют фабрично изготовленные препараты,аналогичные по своей структуре антигенам липидов,появляющихся в организме при разрушении тканей бледной спирохетой,липидам ее мембран и специфическим молекулярным соединениям,входящих в состав мебраны бледной спирохеты (для этих целей используются очищенные и ультраозвученные штаммы трепонем или выделенные от них рекомбинантные антигены). В лабораторных условиях к антигенам добавляется сыворотка крови обследуемого.Если в сыворотке (плазме) крови присутствуют антитела происходит реакция антиген-антитело и ее результаты обнаруживаются различными методами (положительный результат) при отсутствии антител реакция не происходит (отрицательный результат).Серологическую диагностику сифилиса осуществляют в следующих случаях.
Скрининг на сифилис
Массовое обследование определенных групп населения.Для скрининга применяются дешевые,простые и быстрые по исполнению тест системы,основанные на нетрепонемных тестах.Скринингу на сифилис подвергаются:
- Беременные женщины
- Доноры крови и органов для трансплантации
- Некоторые профессиональные контингенты (работники питания,образования,здравоохранения)
- Военнослужащие
- Лица,отбывающие наказание в местах лишения свободы
- Больные,готовящиеся к оперативному хирургическому вмешательству
- Лица,поступившие на стационарное лечение (обязательная вассерманизация – в России,странах СНГ и некоторых других странах)
Для диагностики сифилиса применяются комбинация нетрепонемных и трепонемных тестов на сифилис или только трепонемные (подтверждающие) реакции.Серологическое обследование на сифилис назначается в следущих случаях:
- Лицам,имеющих клинические признаки сифилиса
- Лицам с любыми генитальными язвами
- Лицам – половым партнерам больных сифилисом,а также в случае близкого бытового контакта с больным вторичным сифилисом
- Детям,родившимся от больных сифилисом матерей
- Лицам с подтвержденным диагнозом других половых инфекций
- Для подтверждения результатов скрининга (отборочных реакций)
Контроль за лечением сифилиса
Применяются нетрепонемные тесты,так трепонемные тесты остаются положительными продолжительное время после лечения,а иногда всю жизнь.
Анализ крови на микрореакцию
Одним из видов нетрепонемных тестов является микрореакция на сифилис. Это исследование считается экспресс-методом и позволяет выявить присутствие антител к бледной трепонеме. Такие тесты используются для обследования больших групп населения, и после определения положительного анализа требуется дополнительное обследование.
Что такое микрореакция на сифилис и когда нужно сдать анализ
Как только бледная трепонема попадает в организм человека, она начинает вырабатывать кардиолипиновые антигены, которые запускают развитие антифосфолипидных антител. Данный анализ считается неспецифичным, так как не выявляет самого возбудителя, а исследует наличие определенной реакции организма на сифилис.
Важно отметить, что микрореакция — это отборочный метод, который не подтверждает диагноз, а только выявляет наличие антител.
Они возникают не только при сифилисе, но и при развитии туберкулеза, аутоиммунного заболевания или сахарного диабета.
Микрореакция преципитации возникает при соединении эмульсии кардиолипинового антигена с плазмой или сывороткой больного сифилисом образуется флокулянт, который выглядит как белые снежинки. Для осуществления анализа используют капиллярную кровь — собранную из пальца.
Различают несколько видов микрореакций:
- Микроскопический тест проводят при помощи светового микроскопа, под увеличением которого подсчитывают число преципитатов.
- Макроскопический тест — предполагает подсчет невооруженным глазом, для этого добавляют химическое вещество, которое окрашивает комплекс антиген-антитело.
- Тест с количественным показателем — предполагает многократное разведения биологического материала, с последующим подсчет титров в каждой порции.
Наиболее информативной микрореакция будет в период от трех недель после предполагаемого заражения.
Как подготовится к обследованию
Для получения точных данных, необходимо подготовиться к сдаче анализа. Для этого специалисты рекомендуют придерживаться правил:
- не принимать антибиотики не менее чем за неделю перед сдачей крови,
- отказаться от алкоголя за два дня до анализа,
- за день исключить жирную и острую пищу из рациона,
- не курить за час до процедуры,
- сдавать кровь необходимо натощак.
Стоит воздержаться от сдачи анализов, если наблюдаются симптомы простудного заболевания.
Также нужно предупредить врача о наличии хронических заболеваний, сахарного диабета или беременности.
Оценка результатов – нормы и отклонения
- Образование большого количества хлопьев — положительная реакция, которая свидетельствует о наличии любой формы сифилиса.
- Отсутствие хлопьев — отрицательная реакция, которая подтверждает, что обследуемый здоров.
- Присутствие небольшого количества хлопьев — пограничное состояние, которое часто считают ложноположительным. Обычно бывает на ранних стадиях болезни или при развитии других недугов. Необходимо дополнительное обследование.
Ложноположительная реакция возникает при следующих обстоятельствах:
- развитие туберкулеза,
- беременность,
- недавно перенесенное инфекционное заболевание,
- гепатиты вирусного типа,
- сахарный диабет,
- наличие опухолей в организме,
- при длительном употреблении алкоголя,
- зависимость от наркотиков,
- аутоиммунные заболевания.
Существует и ложноотрицательная реакция, которая возникает при небольшом количестве антител, связано это с ранней стадией развития сифилиса. В ситуациях, если результат теста отрицательный, но в дальнейшем проявились другие признаки заболевания, назначается консультация венеролога и дополнительные серологические анализы.
Вероятность ошибки
Микрореакция преципитации(мр) на сифилис считается методом выявления сифилитических антител у широких масс населения, это позволяет избежать эпидемий и контролировать развитие заболевания, но несмотря на свою эффективность, возможны ошибочные реакции. Часто это связано с несоблюдением техники поведения исследования.
Влиять на результат может неправильный забор крови из пальца, несоблюдение сроков хранения биологического материала, а также нарушение температурного режима.
Использование загрязненной посуды, просроченной эмульсии. Даже незначительная замена реагентов или недостаточное перемешивание материала может способствовать ошибочным результатам.
Несмотря на большое количество нюансов проведения процедуры, микрореакцию на сифилис считают качественным методом, который дает информацию о наличии антител в 98% случаев. Но точное определение диагноза возможно только при дополнительной диагностике.
Цена вопроса
В среднем скрининговое исследование на сифилис стоит около 7$ в частных клиниках. Также пациенту предоставляется полная анонимность. Стоит отметить, что коммерческие клиники предоставят результат уже через несколько часов после забора крови.
Государственные медицинские учреждения также могут осуществить данное тестирование, и на бесплатной основ, но для этого у пациента должен быть медицинский полис и документы удостоверяющие личность. Он должен посетить венеролога или терапевта, который напишет направление на сдачу крови. Результат анализа обычно готов не раньше чем через три дня. И получить его можно только на приеме у врача.
Нередко министерство здравоохранения финансирует скрининг населения в рамках профилактики распространения венерических заболеваний. Такие мероприятия заранее анонсируются властями, носят анонимный характер и предоставляют результат в короткие сроки.
Где сдать анализ крови на микрореакцию
Существует несколько способов сделать скрининг крови на сифилис:
- В домашних условиях при помощи экспресс-тестов. Такой способ доступен в любое время, человек сохраняет за собой анонимность, а результат исследования можно узнать уже через 20 минут. Но существует погрешность в случаях ложноположительного или ложноотрицательного результата.
- Обратиться в поликлинику или венерологический диспансер. Услуга будет предоставляться бесплатно, но результат анализ и направление получить у лечащего врача. Такой способ имеет меньшую погрешность чем домашний тест, но срок получения итогов анализа может длиться до трех дней.
- Посетить платное медицинское учреждение. Данный вариант предполагает анонимность, возможность предварительной записи на сдачу анализа, а также получение результата в короткие сроки. Получение отчета об анализе обговаривается индивидуально, в редких случаях его могут отправить по электронной почте, но в основном предоставляют его лично в руки.
Такие клиники как Инвитро, KDL имеют представительства во всех областных центрах страны, и готовы предложить услуги по проверке микрореакции на сифилис. При получении положительного результата, нужно обратиться к врачу для уточнения диагноза и назначения лечения.
Источник: veneromed.ru
Источник: kardiolog.neboleite.com
Что такое иммуноблотинг
Иммуноблотинг (Western blot) для определения специфических IgM либо IgG является одним из современных и точных методов диагностики сифилиса.При проведении иммуноблотинга T.pallidum подвергаются электрофорезу , в результате чего происходит разделение белковых иммунодетерминант. Затем проводится обработка разделенных точек – blots исследуемой сывороткой и антителами к IgG либо IgM, помеченных ферментами или радиоактивными веществами. Выявленные с помощью иммуноблотинга определенные иммунодетерминанты являются диагностическими признаками сифилиса. IgG-иммуноблотинг (IgG Western blot)по чувствительности и специфичности соответствует РИФ-абс.IgM -иммуноблотинг (IgM Western blot) применяется как диагностический тест при врожденном сифилисе.
Современные методы выявления возбудителя сифилиса
Бледная спирохета может быть выявлена благодаря характерным признакам заболевания. Они могут отличаться на разных стадиях прогрессирования.
Основные симптомы:
- При первичном заражении – , язва, окрашенная в розовый или красный цвет, твёрдая и безболезненная. В основном, появляется в местах проникновения инфекции – , на губах. На начальной стадии также происходит увеличение лимфатических узлов;
- Вторичная стадия предполагает по всему телу, повышение температуры, поражение слизистых оболочек, ложные признаки ОРЗ;
- Третичный период может наступить, спустя много лет. Инфекция активно разрушает внутренние органы, костный скелет, поражает органы слуха, зрения, головной мозг.
Диагностика болезни проводится несколькими способами. Для этого проводятся следующие процедуры:
- Темнопольная контрастная микроскопия осуществляется с помощью специального микроскопа и образца серозной жидкости шанкра;
- Лабораторный анализ мочи и крови, предполагающий окрашивание микроорганизма;
- Полимеразная цепная реакция (ПЦР), распознающая ДНК бактерии;
- Реакция Вассермана;
- Иммунофлюоресценция (РИФ), метод направлен на то, чтобы найти антитела к бледной трепонеме при взаимодействии специального раствора антител и сыворотки крови пациента;
- Пассивная гемагглютинация на основе иммунологического склеивания эритроцитов при фиксации на них частиц патогенной бактерии – поскольку кровь содержит антитела, эритроциты склеиваются, а через месяц реакция становится положительной, таковой она может оставаться и после антибактериальной терапии;
- – с использованием этой методики выявляются антитела к treponema pallidum разных видов, кроме того, ИФА даёт возможность определять их количество, что позволяет предположить специфику протекания заболевания, его тяжесть и продолжительность.
Наиболее точным и информативным считается иммуноферментный анализ, поэтому его следует рассмотреть более подробно.
Антитела к сифилису: какой материал берут и как готовиться
Сдать анализ антитела к сифилису достаточно просто. Однако не все пациенты представляют, как подготовиться к исследованию, и что придется сдавать во врачебном кабинете.
Считается, что раз сифилис – это типичный представитель ИППП, то для обнаружения АТ придется пройти процедуру мазка. Особенно плохо эту перспективу воспринимают мужчины. Так как процедура отличается болезненностью и неприятными ощущениями. Однако для поиска антител необходимо сдавать не мазок, а кровь.
Чтобы кровь была пригодной для оценки, пациент должен будет соблюсти несколько простых рекомендаций. Необходимо:
- посетить поликлинику или диагностический центр для забора образцов в утреннее время;
- проследить, чтобы между забором и принятием пищи прошло не менее 8 часов;
- непосредственно за полчаса до входа в кабинет не курить;
- сутки не принимать никакие алкогольные напитки;
- исключить антибактериальные препараты, если с их помощью проводилась терапия;
в течение 24 часов соблюдать простую диету, в которой будут отсутствовать вредные продукты питания.
Сроки появления антител к сифилису в среднем составляют от 7 до 14 дней. Именно поэтому сразу после подозрительного контакта обращаться в больницу бесполезно. Необходимо сдать образцы крови через 7-8 дней после опасного контакта.
Особенности метода ИФА
Вполне нормальной реакцией организма за внедрение инфекционного агента является ответ иммунитета. Бледная спирохета идентифицируется лимфоцитами, как чужак, и начинается активный синтез иммуноглобулинов. Суммарные антитела к инфекции – IgM формируются уже через неделю после заражения, IgG – спустя месяц.
Это два разных класса, которые образуются на ранних сроках поражения сифилисом. Чтобы успешно бороться с болезнью, лечение должно быть направлено на снижение уровня IgM и стабильно высокую концентрацию IgG. Такое соотношение показывает хорошие показатели сильного иммунитета, выработавшегося к трепонеме.
В свою очередь, антитела к treponema pallidum, используя рецепторы, начинают плотно контактировать с антигенами возбудителя. Тестирование с помощью метода ИФА позволяет фиксировать эти комплексы враждебных клеток и делать определённые прогнозы.
К примеру, следует проверить малыша, родившегося у заражённой матери. Тест на treponema pallidum антитела будет положительный у ребёнка на первом году жизни, так как в его организме есть антитела IgG, переданные от матери. Это подтверждает факт трансплацентарного инфицирования.
Как проводится анализ
Исследование проводится в лабораторных условиях, так как требуется специальное медицинское оборудование. Для работы врачу нужна панель с круглыми углублениями (около ста лунок) и приготовленные концентраты антигенов к трепонеме. Они и размещаются в лунках. Пациент приходит в лабораторию утром и на голодный желудок сдаёт кровь из вены. Для определения антител требуется только сыворотка, которая и отделяется от крови. Далее врач наблюдает реакцию на различные антигены в углублениях.
Помимо введения в лунки ферментов для считывания информации, туда добавляются красящие вещества, так как в дальнейшем расшифровка будет происходить при использовании цветовой таблицы. Таким образом, определяются суммарные тела, их количество и т.п. Медицинское оборудование в этом процессе представлено спектрофотометром. Он необходим для выявления плотности образцов, их отличие от контрольных тестов. В результате устанавливается результат – степень выраженности патологии.
Следует отметить, что treponema pallidum антитела положительный результат может сохраняться у человека на протяжении многих лет, несмотря на успешную терапию, иногда он остаётся таким до конца жизни.
Микробиологическое тестирование на трепонему
Тестирование организма на то, что это трепонема является причиной разрушений кожи или заболеваний внутренних органов, является успешным благодаря отсутствию естественного окраса у бактерии. Для того чтобы визуализировать вирус, в процессе микробиологического анализа производят окрашивание тела спирохеты контрастными цветами. Благодаря своей тонкой внешней оболочке трепонема легко поддается воздействию на нее спирта и фиксирует окрашивание.
Веществами, которые разрушают бактерию, могут быть:
- мышьяк;
- лекарства на пенициллиновой основе;
- вещества, содержащие ртуть;
- щелочные средства и кислоты;
- ультрафиолетовое облучение;
- антисептические растворы и смеси.
Стоит сказать также о том, что заражение спирохетой первичного типа может иметь реверсивный характер и возвращаться спустя некоторое время после полного выздоровления. Однако люди, которые повторно инфицированы, имеют меньше шансов снова заболеть. Тестирование нетрепонемного типа позволяет не только эффективно и вовремя выявить наличие в организме вредоносных бактерий сифилиса, но и проводить анализ лечения на протяжении всего периода протекания болезни.
СОВЕТУЕМ ПОСМОТРЕТЬ:
ЗАПИШИТЕСЬ НА ПРИЕМ:
Симптомы инфицирования
У мужчин диагностировать новообразование проще
Первые симптомы у представителей обоих полов одинаковые. У больных воспаляются лимфатические узлы. Формируется круглая язва (шанкр), не вызывающая болезненных ощущений. Оттенок она имеет синевато-красный. Шанкр на ощупь твердый. У мужчин диагностировать новообразование проще. Оно формируется на половом члене, в паху, на бедрах, животе. Редко на губах, в ротовой полости, на руках.
Шанкр у женщин обычно образуется в шейке матки, на половых губах. Очень редко в области живота, таза. Когда новообразование возникает во внутренних половых органах, своевременно обнаружить его тяжело. Поэтому венерический недуг диагностируется только при осмотре в гинекологическом кресле.
Если язву не лечить, она проходит самостоятельно через 4-6 месяцев. Уплотнение рассасывается, следов обычно на этом месте не остается. Больной ошибочно полагает, что с ним все в порядке и не спешит с визитом к врачу. Это приводит к неблагоприятным последствиям.
Спустя неделю, после появления шанкра, на горле и в паху увеличиваются лимфатические узлы. Это является сигналом для обращения в медицинское учреждение. Формирование новообразования сопровождается следующей симптоматикой:
- гипертермия без явных на то причин;
- увеличение белых кровяных телец;
- понижение гемоглобина, возникновение анемии;
- мигрени;
- ухудшение качества сна;
- потеря аппетита;
- чрезмерная раздражительность, агрессивность;
- боли в частях опорно-двигательного аппарата;
- отечность миндалин, гениталий, гортани;
- сифилитическая сыпь по телу.
При возникновении перечисленных проявления нужно незамедлительно пройти диагностику.
Виды
Таксономия трепонемы — возбудителя сифилиса:
- Трепонема паллидум. Спирохета pallidum бледная самый распространенный патогенный вид. Провоцирует возникновение сифилиса.
- Трепонема carateum вызывает патологию Пинта. Это заболевание кожных покровов. Встречается в Латинской Америке.
- Трепонема pertenue приводит к невенерическому сифилису. При патологическом состоянии затрагиваются кости, суставы, эпидермис. Инфекция наиболее распространена в тропических странах.
- Трепонема endemicum вызывает беджель. Это эндемическая форма сифилисного поражения. Существует преимущественно в Экваториальной Африке, на Ближнем Востоке.
В нашей стране встречается первая разновидность. Поэтому в дальнейшем речь пойдет о ней.