Современные анализы на вирус Эпштейн-Барр (ВЭБ) и их расшифровка

В этой статье расскажем о природе вирусе Эпштейн-Барра и многочисленных анализах на этот вирус, их разновидностях и расшифровке. Вирус Эпштейн-Барра или, как говорят чаще – Эпштейн-Барр бужем иногда подменять аббревиатурой ВЭБ. Из этой статьи вы узнаете:

• Почему при всех плюсах современная реакция ПЦР в реальном времени является недостаточно информативной;
• Что такое иммуноблотинг, и каковы его преимущества в поиске вируса Эпштейн-Барр в анализе крови. Когда его надо применять;
• Сколько стоят эти анализы в крупных лабораториях в начале 2020 года в России.

Но начнем мы, как обычно, с описания виновника сегодняшней статьи, и дадим представление о том, что такое ВЭБ, и каково его место в живой природе.

Что такое антитела к вирусу Эпштейна-Барра (ВЭБ)?

Возбудитель относится к группе герпесвирусов

Вирус Эпштейна-Барра относится к группе герпесвирусов. Он поражает лимфатическую систему, слизистые оболочки, ЦНС и практически все внутренние органы. Симптомов при поражении не возникает, и человек не подозревает об инфицировании. Согласно международной статистике, вирусом поражены или перенесли его ранее каждые 9 человек из 10. Если иммунитет в момент заражения находится в хорошем состоянии, то ВЭБ полностью уничтожается и формируется пожизненный иммунитет к инфекции.

Антитела против вируса вырабатываются иммунной системой человека. Они представляют собой иммуноглобулин (особый вид белка), который продуцируется клетками лимфоцитами. Их предназначение — связывание антигенов вируса. Для каждого антигена организм продуцирует свои антитела, из-за чего при анализе по наличию тех или иных белков удаётся установить заражение различными инфекциями.

Трактование анализа

Норма показателей в крови исследуемого может варьировать в зависимости от конкретной лаборатории. Для анализа крови применяются разные реагенты, поэтому лучше ориентироваться на норму, указанную в соответствующей графе выданного результата.

Но есть и общие, усредненные результаты:

• Отрицательный результат – менее 5 Ед/мл.
• Сомнительный результат – 5-20 Ед/мл.
• Положительный результат – более 20 Ед/мл.

При сомнительном результате нужно сдать анализ на вирус Эпштейна-Барр повторно через 2-3 недели.

Чтобы самостоятельно расшифровать анализ, можно воспользоваться шпаргалкой:

• IgG к EBNA (–) (отрицательный), IgG к VCA (–), IgM к VCA (+) (положительный) – инфекция первичная, заражение произошло недавно, специфический иммунитет еще не выработан.
• IgG к EBNA (–), IgG к VCA (+), IgM к VCA(+) – инфекция первичная, протекает в острой форме.
• IgG к EBNA (+), IgG к VCA (+), IgM к VCA (+) – активно протекающий инфекционный процесс, возможно, рецидив.
• IgG к EBNA (–), IgG к VCA (–), IgM к VCA (–) – следы вируса не обнаружены, иммунитет не сформирован.
• IgG к EBNA(+), IgG к VCA (+), IgM к VCA (–) – пациент носитель вируса, но никаких симптомов патологии нет.
• IgG к EBNA (+), IgG к VCA (–), IgM к VCA (–) – латентная форма болезни, заражение произошло очень давно.

Если какой-то показатель повышен, риск ложного результата минимален, так как серологические тесты довольно чувствительны, они могут определить наличие антитела в крови даже у пациентов с иммуносупрессией.

Но риск ложноотрицательных результатов при обследовании на ВЭБ есть. Бывают атипичные формы болезни, при которых ни один иммуноглобулин не повышен. Если есть основания заподозрить вирус Эпштейна-Барр, необходимо сдать другие анализы, например, методом ПЦР (полимеразной цепной реакции) для обнаружения вируса

Важно! Вероятность ложного результата теста повышается, если в крови человека есть вирус герпеса 6 типа или цитомегаловирус. Но повторное обследование исключает риск ошибки. Если оба раза были получены разные результаты, нужно прибегнуть к другим анализам.

Чем опасна ВЭБ-инфекция?

Инфекция может стать пусковым фактором рассеянного склероза

Опасность вируса заключается в том, что он приводит к снижению иммунитета и может быть основной причиной для начала развития аутоиммунных патологий и диабета. Инфекция способна вызвать врождённые уродства у ребёнка. Также, по мнению врачей, ВЭБ-инфекция, возможно является причиной, по которой развиваются следующие опасные патологии:

• рассеянный склероз,
• онкологические поражения,
• тяжёлые острые аллергии.

Кроме того, из-за влияния на работу иммунной системы вирус вызывает ослабление естественной защиты организма. Это приводит к значительному усложнению любых заболеваний и повышает риск развития осложнений большинства патологий и даже незначительных травм.

Патогенез

Входными воротами для вируса ЭБ является эпителий слизистой верхних дыхательных путей. Проникая через интактные слои слизистой, вирус адсорбируется на клетках эпителия слизистой назофарингеального отдела, тимуса, эпителии канальцев слюнных желез и инфицирует В- и Т-лимфоциты, нейтрофилы, натуральные макрофаги, эндотелиоциты. Количество пораженных клеток после инфицирования начинает увеличиваться посредством неконтролируемой вирус-зависимой клеточной пролиферации и вирус по лимфоидным тканям и периферической крови распространяется по организму.

В клетках, инфицированных вирусом, могут происходить два типа его размножения: литический — продуктивный (приводящий к лизису клетки-хозяина, т. е. к гибели) и латентный, когда клетка не разрушается, а персистенция ВЭБ в эпителиоцитах слюнных желез, слизистой назофарингеальной области и трансформированных В-лимфоцитах приводит к постоянному носительству вируса. При активной форме (острой инфекции) наблюдается преимущественно литическая репликация вируса, которая сопровождается выработкой вирусных гликопротеидов и проявляется манифестными формами заболевания.

Инфицирование ВЭБ приводит к ослаблению активности врожденных факторов резистентности (угнетению Т-клеточного звена) и способствует формированию механизма неполноценного иммунного ответа преимущественно по клеточному типу (расстройство механизма регуляции иммунного ответа Т-хелперами 1 и 2 типов). В условиях недостаточности/отсутствия специфического иммунного ответа — на фоне подавления продуцирования интерферона и выработки иммуноглобулинов, в организме не происходит полного подавления процесса репликации ВЭБ, а под действием иммуносупрессирующих факторов (присоединении микстинфекции) происходит реактивация возбудителя.

Именно нарушения иммунного статуса и являются основным патогенетическим фоном, способствующего длительной персистенции ВЭБ в тканевых клетках. ВЭБ в процессе хронической персистенции в клетках иммунной системы и эпителии самостоятельно реализует сложные механизмы иммуносупрессии, что не позволяет иммунной системе организма контролировать инфекционный процесс.

Показания к исследованию

Частые ОРИ — показание анализу

Проводится исследование крови на наличие антител к ВЭБ только по показаниям. Основными из них являются:

• наличие симптомов, позволяющих заподозрить мононуклеоз инфекционной природы, который всегда сопровождает поражение ВЭБ;
• частые вирусные инфекции, такие как грипп и ОРЗ;
• ангина, которая развивается 3 раза в год или чаще;
• простуда, при которой всегда отмечаются заметное увеличение в размерах лимфатических узлов и повышение температуры до высоких значений;
• разовое увеличение лимфатических узлов, гланд и аденоидов;
• период планирования беременности;
• наличие онкологических заболеваний;
• обнаружение ВИЧ инфекции.

Также в ряде случаев исследование крови на антитела к вирусу назначается при наличии синдрома хронической усталости.

Профилактика

Cпецифических мероприятий и средств, уменьшающих вероятность заражения вирусом ЭБ не существует. В качестве профилактики можно рекомендовать мероприятия, направленные на разрыв механизма передачи возбудителя и повышение иммунитета:

• Избегайте контакта с больными людьми (кашляющими, чихающими, жалующихся на боль в горле).
• Не практикуйте незащищенные половые контакты.
• Не разрешайте ребенку тянуть руки/игрушки в рот.
• Повышайте иммунитет (здоровое полноценное питания, закаливание, практикуйте периодическую поддерживающую витаминотерапию, избегайте стрессов).

Как подготовиться к исследованию

Накануне теста стоит минимизировать физическую активность

Для получения максимальной точности данных при анализе требуется подготовка к исследованию, которая заключается в следующем:

• отказ от каких-либо лекарственных препаратов за сутки до сдачи крови;
• отказ от алкоголя и табачных изделий за сутки до анализа;
• минимизация физических и эмоциональных нагрузок за 12 часов до сдачи материала;
• отказ от еды за 12 часов до анализа.

При необходимости специфической подготовки по индивидуальным показаниям рекомендации даёт врач, назначающий исследование крови на антитела.

Подготовка к сдаче анализа

При сдаче анализа на вирус Эпштейна-Барр требуется исключить все факторы, которые могут исказить результат ПЦР:

1. Биологический материал необходимо брать утром натощак.
2. Накануне проведения ПЦР рекомендуется отказаться от плотного ужина. Лучше немного перекусить за 9 часов до времени взятия биоматериала.
3. За трое суток до сдачи анализа исключить алкоголь, энергетические напитки, жирную, сладкую или мучную пищу.
4. За день до анализа исключить чай и кофе, газированные напитки.

Перед анализом маленьким детям дают кипячённую воду (до 200 мл в течение получаса). Не рекомендуется принимать лекарства, начиная за 10-14 дней до ПЦР, но если они необходимы по жизненным показаниям, то их названия нужно предоставить врачу, который будет расшифровывать анализ.

Способы выявления антител к ВЭБ

Выявить антитела можно с помощью нескольких методик

Для выявления антител к вирусу могут быть использованы различные методы.

Гетерофильные антитела

При таком методе специфические гетерофильные антитела к ВЭБ определяются при помощи агглютинации с эритроцитами из крови барана, быка или лошади, которые прошли особую обработку. Обнаружение данного вида антител возможно в течение полугода с момента инфицирования человека. Исследование проводится у взрослых и даёт точность результатов до 99%. Для детей точность такого исследования только 30%.

Серологические исследования

Серологический тест информативен спустя 14 дней

При этом методе из сыворотки крови выделяются специализированные антитела против вируса. После инфицирования мононуклеозом наличие антител против ВЭБ выявляется через 2 недели с момента инфицирования. В ходе исследования проводят иммуноферментный анализ, а также применяют методы антикомплемант-флюоресценции и непрямой флуоресценции.

Антитела к раннему антигену

Ранний антиген и антитела к нему появляются первыми после момента заражения. Антигены обнаруживаются только в В-лимфоцитах и находятся в их цитоплазме. Обнаружение таких белков возможно ещё в инкубационном периоде. Выявление данных антител возможно в течение 6 месяцев с момента заражения.

Антитела к капсидному антигену

Антитела к капсидному антигену сохраняются пожизненно

Обнаружение антител к данному антигену является ценным диагностическим результатом. Они присутствуют в течение жизни, что позволяет выявлять переболевших вирусом даже через большой промежуток времени от момента инфицирования. После заражения определяются антитела только с 2 месяцев. Наличие данных антител указывает на устойчивость организма к ВЭБ.

Антитела к нуклеарному антигену

Выявить антитела к данному антигену возможно только на позднем этапе. Они указывают на то, что начался процесс активного выздоровления, но вирус ещё присутствует в организме. После болезни в течение длительного времени результат исследования на антитела к нуклеарному антигену может сохраняться положительным.

Как можно заразитьcя?

Существует четыре варианта заражения Эпштейн-Барр вирусом:

1. Воздушно-капельным путём. Герпес 4 типа передаётся воздушно-капельным путём, только в случае, когда источник заражения носит острую форму инфекции Эпштейн-Барр вируса. В этом случае при чихании частицы вируса Эпштейна могут легко переносится по воздуху проникая в новый организм.
2. Бытовые контакты. В данном случае в первую очередь идёт речь обо всех бытовых контактах с заражённым, включая рукопожатие. И при этом необязательно чтобы носитель имел острую форму заболевания, поскольку ещё полтора года после острой вирусной инфекции Эпштейна-Барра, носитель легко может заражать других контактным способом.
3. Половые контакты и поцелуй. Герпес четвёртого типа легко передаётся через все способы сексуального взаимодействия, а также через поцелуи. Считается что у трети всех инфицированных людей Эпштейна-Барр может жить в слюне до конца жизни, поэтому заразиться им очень легко.
4. От беременной к ребёнку. Если у беременной женщины обнаружен Эпштейн-Барр в крови, то он легко может передаться от неё к плоду через плаценту, а в будущем ребёнку.

Конечно, понимая, как легко возможно инфицироваться вирусом Эпштейна-Барра возникает вопрос, а как же переливания крови или пересадка органов. Естественно, при переливании и трансплантации органов тоже легко заполучить Эпштейна-Барр, но вышеперечисленные пути передачи являются самыми распространёнными.

Расшифровка результатов

Результаты анализов интерпретирует врач

Расшифровку полученных в результате анализа данных проводит лечащий врач. Работники лаборатории не имеют права консультировать человека относительно результатов, и всё сказанное ими может расцениваться только как озвучивание показателей, но не врачебное заключение.